烤烟旺长期叶片叶绿素荧光特性的测定分析

田间条件下对烤烟旺长期下、中、上3个部位叶片主要叶绿素荧光特性的变化进行了测定分析.结果表明:随着烟叶部位的升高,叶片PSⅡ的初始荧光表现为随之降低的变化规律,而叶片PSⅡ最大荧光、可变荧光、光适应下的初始荧光、光适应下的最大荧光、光适应下的可变荧光和光适应下的稳态荧光则表现为"∧"型的变化;不同烟叶部位之间叶片初始荧光、最大荧光、可变荧光、光适应下的初始荧光、光适应下的最大荧光、光适应下的可变荧光和光适应下的稳态荧光的差异均极显著.相关分析表明,最大荧光、可变荧光、光适应下的初始荧光、光适应下的最大荧光、光适应下的可变荧光和光适应下的稳态荧光相互之间均呈极显著正相关;初始荧光与最大荧光二者之间呈显著正相关;初始荧光与叶位之间呈极显著负相关(r=-0.991**).     

烤烟成熟过程中叶片组织结构的变化

对烤烟下、中、上3个部位叶片成熟过程中叶片厚度等结构变化研究表明:随烟叶部位的上升,叶片厚度、栅栏组织细胞宽度、细胞间空隙率均表现为随之降低的变化规律;随着烟株移栽后天数的增加,新鲜烟叶的上部叶片厚度和栅栏组织细胞宽度均呈现出逐渐上升的变化规律.3个烟叶部位之间叶片厚度和栅栏组织细胞宽度的差异极显著,细胞间空隙率的差异不显著;在田间不同生长时期栅栏组织细胞宽度的差异极显著,叶片厚度的差异显著,细胞间空隙率的差异不显著.烟株移栽后天数与栅栏细胞宽度之间呈极显著正相关,与叶片厚度和细胞间空隙率之间的相关性不显著;烟叶栅栏组织细胞宽度与叶片厚度之间呈极显著正相关.     

农杆菌介导的厚皮甜瓜遗传转化体系的建立

【目的】遗传转化是进行基因功能验证的重要手段,构建较为完善、高效的厚皮甜瓜遗传转化体系,为基因功能验证和厚皮甜瓜种质改良提供技术支撑。【方法】以厚皮甜瓜B8为材料,用携带植物双元表达载体p QY002005的根癌农杆菌介导转化B8子叶诱导再生,通过探究影响甜瓜遗传转化过程中的重要因子的作用,建立以B8为基础的甜瓜遗传转化体系。【结果】以正常光周期培养3 d的无菌苗子叶节为外植体,对其进行微刷+10 s超声处理可提高农杆菌侵染效率,荧光芽获得率达29.6%;压力85 kPa的2次5 min的抽真空侵染方式(间隔1 min)侵染效果较佳;4 mg·L^-1的Basta较适宜筛选抗性植株。利用以上方法,单次转化120个子叶节外植体,可获得31个再生荧光芽,17株生根苗,通过PCR检测确定8株阳性苗,阳性率达58.8%,阳性植株获得率为6.7%。【结论】成功建立了以B8为材料的甜瓜高效遗传转化体系,为甜瓜关键基因功能验证和种质精准改良提供技术支持。     

禽腺病毒Ⅰ群血清4型的分子鉴定及其卵黄抗体的防控效果

对山东临沂某肉鸡养殖场疑似禽腺病毒感染的病鸡进行了PCR诊断,序列比对及同源性分析。结果发现,该病毒与NCBI中禽腺病毒Ⅰ群血清4型毒株的同源性在99%以上,动物回归试验能够复制出禽腺病毒的典型症状,对发病动物进行病理切片发现肝脏中有大量炎性细胞浸润,脾脏间质增大,出血。利用组织毒免疫商品蛋鸡,提取卵黄抗体分别进行该病原的预防和治疗试验,结果发现0.3 mL/只的卵黄抗体可100%保护15日龄肉鸡不发病;感染发病鸡按照0.8 mL/只和1 mL/只剂量注射卵黄抗体进行治疗,其治愈率分别为86.7%和96.7%,说明制备的卵黄抗体对禽腺病毒Ⅰ群血清4型感染具有较好的预防与治疗作用。     

一株鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及其致病性研究

为了确诊临床雏鸭"肝脾坏死症"的致病原,试验取患"肝脾坏死症"死亡雏鸭的肝脏和脾脏制备病料滤液,用其接种SPF鸭胚并分离病原,对分离病原进行相关研究。结果表明:病料滤液传至第6代时对鸭胚的有效致死率为94.44%,死亡鸭胚胚体有出血斑点,肝脏和脾脏有坏死灶;病原经RT-PCR扩增确诊为鸭呼肠孤病毒(DRV),基因片段与NCBI中10株水禽呼肠孤病毒比对同源性为95.5%～97.3%,将其命名为鸭呼肠孤病毒JS株;该病毒对氯仿不敏感,对1%鸡红细胞悬液无凝集性,对鸭胚的半数致死量为1×10~(-3.24)ELD_(50)/0.1 mL,对雏鸭的半数感染量为1×10~(-3.49)ID_(50)/mL;人工感染雏鸭5 d后扑杀,取肝脏和脾脏制做病理切片,病理切片显示肝脏和脾脏损伤明显。说明临床雏鸭患"肝脾坏死症"的致病原为鸭呼肠孤病毒,鸭呼肠孤病毒JS株可作为候选毒株用于该病的进一步防控研究。     

鸭瘟病毒PCR检测方法的建立与优化

为了快速、准确诊断鸭瘟病毒,根据Gen Bank中登录的鸭瘟病毒基因(UL51)序列,设计合成1对特异性引物,以鸭瘟疫苗株病毒基因组DNA为模板进行PCR扩增;优化PCR扩增程序中的延伸时间、退火温度、循环次数,并对方法的敏感性和特异性进行验证。结果表明:PCR方法经优化后可扩增得到916 bp的目的条带,同预期相符;该方法的最低检出浓度为1.041μg/m L,对其他7种常见鸭易感性病原体的检测结果均为阴性。说明该诊断方法的特异性好、灵敏度高,同时操作快速、简单,可应用于实验室快速诊断鸭瘟病毒。     

田间生长过程中烤烟叶片主要含氮化合物的变化

以烤烟龙江911品种为材料,测定了田间生长的烤烟下、中、上3个部位叶片烟碱、蛋白质及游离氨基酸等主要含氮化合物质量分数的变化。结果表明:烤烟叶片烟碱质量分数从移栽后15 d开始逐渐升高,到采收前达到最大值,下部叶片的烟碱质量分数高于中、上部叶片。蛋白质和游离氨基酸质量分数移栽后呈下降趋势,蛋白质的下降速率比游离氨基酸高。蛋白质和游离氨基酸的质量分数与烟碱质量分数呈极显著负相关。     

填充型烤烟栽培中氮磷钾肥与产量的施肥模型

以填充型烤烟品种“龙江911”为试验材料,通过正交回归田间试验,建立了N、P、K肥与烤烟产量的回归效应模型,并对各因子及交互作用进行了分析,计算了土壤丰缺指标及基础肥力贡献率,建立了东北烤烟的优化施肥方案.结果表明:施N量增加,产量提高;K肥增加,产量先上升后下降;P肥对产量的影响并不明显;N和P、N和K、P和K表现出协同促进作用,但是过高的肥量则表现出拮抗作用.通过对N、P、K肥与产量的施肥模型综合分析得出:在东北填充型烤烟生产区,建议烟田的基础施肥量,纯N为40.08～52.49 kg/hm2,P2O5为36.19～62.19 kg/hm2,K2O为70.73～114.41 kg/hm2.     

烤烟田间生长过程中叶片钾与钙比值的变化

田间条件下对烤烟下、中、上3个部位叶片生长发育过程中叶片的钾、钙含量及钾与钙比值的变化进行了研究.结果表明:在烤烟田间叶片生长发育过程中,随着烟叶部位的上升,叶片钾/钙值表现为逐渐增加的变化规律,而叶片钾和钙的含量均表现为逐渐下降的变化规律.随着叶龄的增长,新鲜烟叶中各部位叶片钾/钙值呈逐渐下降并趋于稳定的规律;叶片钾含量变化表现为逐渐下降,叶片钙含量变化表现为逐渐上升.3个部位叶片钾/钙值、钙含量的差异极显著,叶片钾含量的差异不显著;不同叶龄之间叶片钾/钙值的差异极显著,叶片钾和钙含量的差异显著.叶龄与叶片钾含量、钾/钙值呈极显著负相关,而与叶片钙含量呈显著正相关;烟叶中钾/钙和钙含量呈极显著负相关(r=-0.795**),与叶片钾含量呈极显著正相关(r=0.786**);烟叶中钾与钙含量呈显著负相关(r=-0.569*).