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为了研究表皮生长因子和血小板衍生生长因子-BB对山羊SSCs中凋亡相关基因的影响,本研究将60~75日龄的山羊睾丸(n=6)剪碎后,利用两步酶消化法得到睾丸单细胞悬液,然后通过两次差速贴壁法分离纯化山羊SSCs,并采用免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定。随后,单独或联合添加EGF和PDGF-BB,体外培养山羊SSCs 6d,运用real time PCR技术检测不同处理组中BAD、BCL2和BAX基因的相对表达量。结果表明,睾丸单细胞悬液经两次差速贴壁纯化后,能够获得纯度较高的SSCs。染色结果显示,纯化后的细胞大量表达SSCs的标记分子THY1和PLZF。与对照组相比,3个试验组的BCL2基因表达量均上调。其中,联合添加20ng/mL PDGF-BB+25ng/mL EGF处理组的中细胞的抗凋亡能力显著高于其他组(P0.05),25ng/mL EGF组的BCL2表达水平显著高于对照组(P0.05),然而20ng/mL PDGF-BB组中的抗凋亡基因BCL2表达水平与对照组相比差异不显著(P0.05);与其他所有试验组相比,对照组的促凋亡基因BAX和BAD的表达水平显著升高(P0.05),而试验组之间差异均不显著(P0.05)。 相似文献
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在羊精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度的海带多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0mg/mL)、枸杞多糖(0、2.0、4.0、6.0、8.0mg/mL)以及联合添加海带多糖与枸杞多糖(1.0+0、0+4.0、0.5+2.0、0.5+4.0、1.0+2.0、1.0+4.0mg/mL),比较解冻后精液品质(精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性等),以研究海带多糖、枸杞多糖以及海带多糖和枸杞多糖联合应用对羊精液的冷冻保存效果。结果表明:在山羊精液冷冻稀释液中添加一定浓度的海带多糖和枸杞多糖,均能提高山羊精液冻融后的品质,其中二者添加的最适浓度分别为1.0mg/mL、4.0mg/mL;联合添加海带多糖和枸杞多糖能够提高山羊精子活率、质膜完整率、顶体完整率,其中较佳浓度组合为(1.0+2.0)mg/mL组合与(0.5+4.0)mg/mL组合。 相似文献
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为研究陕北白绒山羊生精细胞发育规律,取1月龄、3月龄、6月龄及成年陕北白绒山羊睾丸组织,HE染色观察睾丸发育情况。结果表明:(1)随着年龄的增长,曲细精管直径显著增大(P0.05),6月龄达到150.72μm,略低于成年羊(161.94μm)(P0.05)。(2)细胞层数随年龄的增长而增长,6月龄达到7.70层,显著高于1月龄和3月龄(P0.05)。曲细精管横截面细胞总数随年龄增长而增长,6月龄和成年绒山羊曲细精管横截面细胞总数显著高于1月龄和3月龄绒山羊(P0.05)。(3)3月龄陕北白绒山羊曲细精管中精原细胞最为丰富,占总细胞数的46.40%,明显高于1月龄(33.10%)、6月龄(9.10%)和成年羊(7.60%)(P0.05)。(4)精原干细胞标记基因(CD49f、PLZF、Thy1、ETV5、VASA、Oct4、Nanog、Nanos2)均在3月龄睾丸中高表达,其中Oct4、PLZF、Thy1、ETV5、VASA、Nanog及Nanos2显著高于1月龄、6月龄及成年羊(P0.05)。研究结果表明,6月龄陕北白绒山羊已经达到性成熟;与1月龄、6月龄和成年羊相比,3月龄陕北白绒山羊睾丸组织含有更加丰富的精原细胞。 相似文献
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为探究骨形态发生蛋白15(Bone morphogenetic protein 15,BMP15)的生物学特性,本试验运用BioXM、DNAMAN、SignalP、ProtScale、PredicProtein、prosite、Smart和ProtFun等生物信息学软件分析山羊BMP15基因cDNA序列信息,预测其编码的蛋白的理化性质、二级结构、疏水性、信号肽、功能结构域和功能等。结果表明,山羊BMP15基因编码区长1185bp,编码394个氨基酸,其基因序列及蛋白序列与绵羊、牛的同源性分别为99%和98%,亲缘关系近。BMP15蛋白序列在25和26位氨基酸之间存在最佳剪切位点,存在信号肽,属于分泌性蛋白,具有信号转导功能。BMP15具有细胞外被膜功能的可能性最大,达到12.822,推测其合成后可能被转运到细胞外膜上进行功能反应。BMP15蛋白序列有TGFβ功能结构域,位于293~394氨基酸区域,且作为激素在生理活动中传递信息的可能性最大。总的来说,山羊BMP15属于分泌性蛋白,可能作为激素进行信号传递来调控机体生理活动,这为进一步研究对BMP15蛋白的功能调节机制奠定理论基础。 相似文献
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为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。 相似文献
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在牛冷冻精液稀释液中,卵黄中的低密度脂蛋白(LDL)对精子起主要保护作用。本研究利用含有7%、8%、9%和10%(w/v)LDL配制成的稀释液制作牛细管冷冻精液(0.25mL/支),冷冻-解冻后,通过计算机辅助分析系统(CASA)对精子运动参数进行分析。结果表明:稀释液中含8%(w/v)LDL时冷冻效果最好,其冻后精子活力平均可达55.6%,显著高于其他组(P<0.01);精子直线速度平均为32.5μm/s,平均路径速度为35.7μm/s,与对照组相比差异显著(P<0.05);a,b级精子可占精子总数的54%。本研究为牛冷冻精液新型稀释液的开发与利用提供了一定的依据。 相似文献