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羟基自由基氧化对牛血清白蛋白结构及水合特性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
【目的】研究羟基自由基(·OH)氧化对蛋白结构及其水合特性的影响,探讨氧化介导的关于蛋白质和水分相互作用的变化情况。【方法】将牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)溶解在含15 mmol·L~(-1)的PIPES缓冲溶液中(pH 6.0),并在不同浓度H_2O_2(0、0.5、1.0、5.0、10.0和20.0 mmol·L~(-1))的铁-抗坏血酸-过氧化氢(FeCl_3-Vc-H_2O_2)羟基自由基氧化体系孵育12 h,采用氨基酸自动分析仪分析BSA不同程度氧化的氨基酸含量变化;通过测定羰基含量、巯基含量分析蛋白的氧化程度;通过测定BSA表面疏水性、离子键、氢键,考察BSA氧化不同程度后水合能力的变化情况;通过测定Zeta电位值来分析蛋白氧化后表面电荷的变化;采用傅里叶红外光谱法分析蛋白二级结构的变化。【结果】随着羟基自由基氧化体系中H_2O_2浓度的增加,氨基酸含量呈下降趋势,但不同种类氨基酸对·OH氧化敏感性不同,在1 mmol·L~(-1) H_2O_2处理浓度下,苏氨酸(Thr)、赖氨酸(Lys)含量显著降低,较对照组(未经H_2O_2处理组)分别下降了4.30%、4.22%;当H_2O_2浓度升高到20 mmol·L~(-1)时,较对照组蛋氨酸(Met)、酪氨酸(Tyr)、组氨酸(His)这3类氨基酸的含量下降程度最大,分别为35.32%、19.19%、11.15%,其次为异亮氨酸(Ile)、甘氨酸(Gly)、半胱氨酸(Cys)。随H_2O_2浓度的增加,BSA的羰基含量显著增加(P0.05),20 mmol·L~(-1) H_2O_2处理组比对照组羰基含量升高了57.52%;巯基含量显著降低(P0.05),20 mmol·L~(-1) H_2O_2处理组比对照组巯基含量降低了74.04%,蛋白氧化程度显著加剧;BSA经氧化处理后,蛋白二级结构发生变化,α-螺旋、无规卷曲含量显著降低(P0.05),β-折叠、β-转角含量显著增加(P0.05),多肽链中α-螺旋结构伸展变成线性结构,蛋白表面疏水性随着氧化程度的加剧而显著增加(P0.05),蛋白持水力降低;同时氧化作用降低了蛋白表面的净电荷数,Zeta电位的绝对值随着羟基自由基氧化体系中H_2O_2浓度的增加而显著降低(P0.05),离子键和氢键作用力显著减弱,降低了蛋白-水分子相互作用力,蛋白持水力降低。【结论】BSA在羟基自由基氧化体系中,存在显著的浓度效应,随着氧化程度加剧,蛋白表面的净电荷显著降低,离子键和氢键作用力显著减弱,蛋白二级结构发生了变化,蛋白-水分子相互作用力降低。 相似文献
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本试验为研究金荞麦超微粉对肉鸡免疫功能和生长发育的影响,将160只1日龄白羽肉鸡随机分为4组,7日龄时用新城疫活疫苗滴鼻(1头份/只),同时颈部皮下注射新城疫-禽流感二联灭活疫苗(0.3 mL/只),间隔12 h后各组分别饲喂含不同药物的饲料,自由采食。低、高剂量组分别在饲料中添加4.50‰、8.75‰金荞麦超微粉,连续给药7 d。阳性对照组在饲料中添加400 g/L黄芪多糖,连续给药7 d;空白对照组饲料中不添加任何药物。随后在给药结束后的第7、21和35天翅下静脉采血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中抗体效价;同时称量各组肉鸡体重,屠宰后解剖,取脾脏、法氏囊和胸腺计算免疫器官指数。结果显示,与对照组相比,在给药结束后7、21和35 d,金荞麦超微粉高、低剂量组与黄芪多糖组料重比均不同程度降低(P>0.05);此外给药组可提高肉鸡外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和肉鸡体重,其中给药结束后21 d,金荞麦超微粉高剂量组禽流感病毒和新城疫病毒抗体效价与对照组相比差异极显著(P<0.01);同时还能提高脾脏和法氏囊的脏器系数,并具有量效关系。综上所述,金荞麦超微粉可以显著提高雏鸡的细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能,并显著增加体重。表明金荞麦超微粉具有增强白羽肉鸡免疫力和促进生长发育的功效,为开发金荞麦超微粉为新型天然植物药、饲料添加剂提供了依据。 相似文献
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本试验旨在研究金荞麦超微粉对小鼠免疫功能和生长发育的影响。将60只昆明小鼠随机等分为4组,高、中、低剂量组分别灌胃1.75、1.25、0.75 g/kg 体重金荞麦超微粉悬液,连续给药7 d;空白对照组灌胃等量的生理盐水。最后一次给药后间隔12 h,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,随后在给药结束后的第7、14和21天取小鼠外周血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力,微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平,同时称量各组小鼠体重;给药结束后21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及脾脏指数。统计学分析结果显示,与对照组相比,中剂量金荞麦超微粉可极显著提高小鼠外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和体重(P<0.01),同时极显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力和脾脏指数(P<0.01)。试验结果表明,金荞麦超微粉能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育,为开发金荞麦超微粉成为新型天然植物药、饲料添加剂提供依据。 相似文献
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马铃薯贮藏技术复杂困难,对条件要求严格,尤其是加工马铃薯对温度、湿度、CO_2浓度要求更为严格。一般长期贮藏的加工马铃薯要求温度为8.5~9.0℃,湿度在80%~93%之间,CO_2浓度为430~850毫克/米~3。 相似文献
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正市种子管理站的品种鉴定。1.特征特性。该品种为中早熟、丰产、优质、全雌型水果黄瓜一代杂交品种,生长势强,叶绿色。以主蔓结瓜为主,第五节左右开始着生雌花,坐瓜率高;瓜深绿色、短圆筒形、长14~18厘米,瓜条粗细均匀,瓜面光滑,无刺瘤,有微棱。瓜肉淡绿色,口感脆甜,品质优,适合生食。抗霜霉病、白粉病,中抗花叶病毒病。耐低温弱 相似文献
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山蒌及其他海南胡椒属野生植物扦插生根技术研究 总被引:1,自引:1,他引:0
山蒌(Piper sarmentosum Roxb.)是极具开发利用价值的海南胡椒属野生植物。利用不同浓度(100、400和800 mg/L)的根旺、IAA、IBA和NAA 4种不同的生长调节剂在对山蒌插条基部浸泡处理不同时间(0.5 h、2 h和4 h),以研究其扦插生根技术。结果表明,不论从生根率、平均根数还是最长根长等指标来看,所有处理均取得较对照好的结果。根据生根率高低,以IBA在100 mg/L处理5 h的生根率最高,达到80.00%;该处理获得的平均根数为5.67,最长根达到10.6 cm。利用同样的方法对其他9个海南胡椒属野生种进行生根实验也取得良好的生根结果。 相似文献