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用耐性菜豆根尖为材料,以λgt10为载体获得了4.8×105个重组噬菌体的cDNA文库。以植物EPSP合成酶基因保守序列合成二段探针,经噬菌体原位杂交筛选出了阳性克隆,并进行了酶切鉴定。测定 cDNA 序列长度为2024个核苷酸,其中编码长1569个核苷酸,共编码523个氨基酸和一个终止密码子,与已发表的其它植物成熟EPSP合成酶氨基酸序列相比具有很高的同源性(≥84.8%),但进入叶绿体运输肽的氨基酸同源性低。以耐性菜豆EPSP合成酶的cDNA序列为模板,用RT-PCR方法扩增感性菜豆EPSP合成酶cDNA片段,并克隆于pUC18质粒上,经测定序列并比较发现:感性菜豆EPSP合成酶cDNA核苷酸序列1737位碱基为G,而耐性的为C,从而表达出的513位氨基酸残基感性的为E,耐性的为Q,表明两种菜豆EPSP合成酶cDNA核苷酸序列一位点的差异是它们对草甘膦耐性不同的原因。 相似文献
62.
镰刀菌引起的北京市草莓根腐病病原鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
对北京市昌平区采集的35个草莓根腐病病样进行病原鉴定,结果分离获得13个菌株,根据培养特征和形态学鉴定,确定分离到的菌株均为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)|选取真菌通用引物ITS1/ITS4扩增菌株的rDNA-ITS序列并进行测序,通过与GenBank数据库序列比对,分子鉴定结果与形态学一致。将分离到的菌株回接到健康草莓幼苗上,植株表现出与田间发病相似的症状,重新分离能够得到相同的病原物。基于形态学、分子生物学鉴定及致病性检测,最终确定北京市昌平区草莓根腐病的病原菌为Fusarium oxysporum。 相似文献
63.
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65.
66.
[目的]了解山东和河北部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的发病情况。[方法]用间接ELISA方法对144个规模化养猪场的2 008份猪血清进行抗体水平检测。[结果]两省猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬中和(gB基因)、伪狂犬病毒野毒感染(gE基因)、圆环病毒病的抗体平均阳性率分别为:89%~92%、87%、92%~95%、33%~40%和76%。各阶段猪群的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬中和(gB基因)抗体阳性率普遍较高,都在80%以上;伪狂犬野毒(gE基因)抗体阳性率在14%~90%之间,其中流产母猪的抗体阳性率最高,为90%;1~4周的仔猪圆环抗体阳性率为76%(152/199),4~10周的保育猪的抗体阳性率最低,为67%(327/489)。[结论]这四种猪病的抗体阳性率较高,免疫猪基本能得到保护,但在个别猪场仍有发病,可能与免疫失败、新流行毒株的出现、继发感染等因素有关。提示各大猪场要针对实际情况,制定出严格的综合性防控措施。 相似文献
67.
江苏省刺槐豹蠹蛾防治研究协作组 《江苏林业科技》1977,(4)
刺槐豹蠹蛾(zeuzera sP.)属鳞翅目豹蠹蛾科(Zeujcridae),是蛀害林木和果树枝条的害虫。由于此虫为害,使枝条枯萎和折断,树冠残缺,严重影响生长和结果,东海县马陵山果园西山林场的刺槐林受害面积已达3500亩,其中严重受害的有1500亩。据1976年2月调查,被害株率最高达73.7—94.5%,平均被害株率达50%以上。在苹果园,据1975年调查有50%新梢受害,最多的一株有17—20根枝条枯死。 此虫在我省各地均有分布,寄主甚广,在林木上危害刺槐、法桐、核桃、薄壳山核桃、枫杨、乌柏、杨、榆、香椿、板栗、檀树等;在果树上危害苹果、梨、桃、柿、枣、樱桃、石榴等。此外,还危害茶叶、油菜、白腊、紫穗槐、木荆、蓖麻、棉花等。 相似文献
68.
益生素在家禽养殖中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
随着生活水平的提高,人们对肉、蛋、奶的需求量不断增加,畜禽养殖规模也日益扩大,近年来畜禽病害发生越来越频繁,长期使用抗生素不仅会使细菌产生耐药性,动物消化道菌群失衡和免疫力降低,还会破坏养殖环境的微生物种群,同时抗生素在动物体内残留,也严重危害人类健康.益生素能通过改善动物消化道微生态平衡,抑制肠道有害微生物的生长与繁殖,增加动物机体免疫功能来增强畜禽体质,防止细菌感染,减少抗生素的使用,提高饲料利用率和畜禽的生长率,为养殖业的可持续发展提供了新的途径.益生素具有无毒、无抗药性、无残留等优点,是新型饲料添加剂的发展方向,其应用越来越受到人们的关注. 相似文献
69.
70.
根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶(AS-B)基因序列(登录号:GMU55874)设计特异引物,通过PCR扩增从大豆(Glycine max)cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a(+)载体,构建重组表达载体pET30a-AS,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS,并进行表达条件优化。结果表明,在16℃条件下,经0.5mmol·L-1IPTG诱导14 h,大部分重组AS-B以可溶性蛋白的形式存在。经Ni-NTA亲和层析和Sephadex G50脱盐后,重组蛋白产率为23.4 mg·L-1,纯度>90%,以L-谷氨酰胺和NH4Cl为氮源供体时,其比活力分别为2.32和2.60μmol·min-1.mg-1。研究结果为研究大豆AS-B结构与功能和酶催化动力学机制及建立AS-B抑制剂的高通量筛选平台奠定基础。 相似文献