鸡链球菌病的诊断

20 0 1年 5月 ,五大连池市某养鸡场发生了一种以急性死亡和败血性病理变化为特征的疾病 ,该病发病较为迅速 ,死亡率较高 ,给鸡场造成一定经济损失。经临床及实验室诊断 ,确诊为鸡链球菌病。现报道如下。1　发病情况及临床症状 　某鸡场饲养海塞克斯蛋用鸡30 0 0只 ,笼养 ,自配饲料。 2 0 0 1年 5月初鸡群突然发病 ,并开始出现死亡 ,每天死亡 6～ 10只 ,持续 2 0ｄ左右 ,共计死亡 187只 ,死亡率为 6 .2 3% ,产蛋率由发病初期的 87%降至 6 1%。白天观察鸡群仅发现有个别鸡排黄白稀便 ,其它未见异常症状 ,但每天早晨上料时发现死鸡 ,病鸡多为急…     

应用套式RT-PCR快速检测鸭坦布苏病毒

鸭坦布苏病毒是新发现的一种可引起鸭产蛋下降、生长迟缓和死亡的黄病毒。目前尚无可靠的快速诊断方法用于该病毒的检测。本研究根据鸭坦布苏病毒E基因序列,设计了2对重叠引物P1、P2和P3、P4,建立了检测鸭坦布苏病毒的套式RT-PCR方法,该套式RT-PCR比一般PCR敏感性高10倍。采用该方法对安徽省、河北省、山东省、浙江省、上海市等地发病鸭场的63份样品进行了检测,阳性检出率为48/63（76.2%）,而病毒分离率仅为13/63（20.6%）。由此表明,与其他方法相比较,本试验所建立的套式RT-PCR方法具有快速、敏感、特异优点,可用于鸭坦布苏病毒的流行病学调查及病毒的检测。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中的不同代次病毒的分子特征分析

为了追踪高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,HP-PRRSV）毒力逐渐减弱的分子轨迹,我们以HP-PRRSV亲本毒HuN4株及其系列传代致弱毒株为研究对象,对HuN4株及其不同代次毒株其全基因序列进行了序列比较分析。结果显示由高致病性的亲本毒HuN4株到无致病性的F112代的疫苗毒,共有65个核苷酸发生突变,其中导致41个氨基酸发生突变,这些突变的氨基酸分散性的存在于不同基因区域。与已经报道的高致病性JXA1株及其致弱毒株JXA80株相比较,可以看到两个强毒株毒力致弱的演变轨迹并不完全相同,二者之间不仅氨基酸突变数量不一致,而且突变氨基酸的位置也不完全相同,但其共同特点是由强毒株到弱毒株的变化过程中,突变率较高的结构蛋白相一致,突变率较高的非结构蛋白基本一致。分析结果提示我们决定高HP-PRRSV毒力强弱的因素可能不是由单个氨基酸的突变来决定的,推测是由一个基因或多个基因或多种因素共同造成的,同时也使我们认识到PRRSV的非结构蛋白区在病毒毒力变化中可能发挥重要作用。     

猪圆环病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中表达形成病毒样颗粒的研究

本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）PCV2b的ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMⅠPPH启动子控制下的多克隆位点,构建的质粒转化DH10BAC感受态细胞,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒rBacmid-cap。将rBacmid-cap转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,间接免疫荧光试验证明目的蛋白在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中获得了表达。将该重组杆状病毒感染HighFiveTM细胞后,用Western blot在细胞培养上清中检测到了目的蛋白,并于d 5达到表达高峰。电镜观察结果显示上清中的目的蛋白可以装配成直径约为17 nm的病毒样颗粒。病毒样颗粒在培养上清中的大量存在,为目的蛋白进一步的分离和纯化提供了便利,也为PCV2基因工程疫苗的产业化奠定了基础。     

冬季鹤鹑高产管理措施

1增加光照 产蛋鹌鹑每天需要12～14h光照时间。冬天需人工补充光照。每30～40mz鹑舍配1只40w电灯,每天天亮前2h开灯,天黑后2h关灯,保持稳定的光照度和时间。     

狐貉冬毛期的饲养管理

一、饲养1.冬毛期毛皮兽的蛋白水平较生长期略有降低,但此时貉、狐新陈代谢水平仍较高,为满足肌肉等生长,蛋白质水平仍呈正平衡状态,继续沉积。同时,冬毛期正是狐、貉毛皮快速生长时期,因此,这一时期日粮蛋白中一定要保证充足的构成毛绒的含硫必需氨基酸的供应,如蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸等,但其他非必需氨基酸也不能短缺。冬毛期狐、     

冬破一个茧 夏少万条虫

多数果树随着天冷逐渐落叶,进入休眠期,各种病虫也形成一些休眠结构,像害虫的卵、蛹、老熟幼虫,真菌的厚垣孢子、菌核以及有性繁殖器官等同时也相对集中在一些固定场所。这有利于我们采取防治措施。据调查．果树病虫越冬场所不外乎以下几种：     

蜂群冬繁五关键

一、换王促繁在秋繁过程中,要按蜂群及蜂王情况,有计划地换新王。选采蜜多、不分蜂的蜂群移虫育王。自己育王在继箱即可。王群成熟以后另组副群羽化交尾,待新王交尾成功以后,再将原群老王除掉,并在底箱和继箱中间隔上覆布,将新王群（副群）搬到原群的继箱里,但必须将继箱口移到与底箱口相反的方向,以免原群（主群）咬死新王。一昼夜后将主群底、继箱中问的覆布去除,并在底、继箱中间只隔一层纱布,便于尽快使主、副群的气味相投。这样,两天后即可把新王连同整个副群的蜜蜂从主群继箱全部搬人底箱的无王蜂群中,至此换王成功。     

通用型辅助性T细胞表位增强了猪瘟病毒合成肽抗原的免疫原性

为了探讨通用型辅助性T细胞表位对猪瘟病毒人工合成短肽抗原免疫原性的影响,本研究合成了含有猪瘟病毒E2蛋白线性中和表位的短肽B,合成了含有通用型辅助性T细胞表位的短肽Th-B。同时,为了探讨免疫刺激基序对人工合成短肽抗原免疫原性的影响,合成了含有免疫刺激序列的IS-Th-B。将上述3种合成肽与弗氏佐剂混合乳化后,免疫兔子,比较3种不同的抗原肽诱导的抗体水平,并用猪瘟弱毒对免疫兔子进行攻击,比较抗原肽的免疫保护效果。结果显示,Th-B和IS-Th-B诱导了相当的抗体水平,但显著高于抗原肽B诱导的抗体水平。Th-B和IS-Th-B免疫延迟但没有阻止兔定型热的产生,而抗原肽B免疫兔和未免疫兔一样发生了明显的定型热反应。本研究表明,免疫刺激基序对本研究中的短肽诱导的抗体应答没有产生明显影响,但通用型辅助性T细胞表位增强了短肽抗原的免疫原性。     

鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达

本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。