农杆菌介导大麦无筛选标记转基因植株的获得

【目的】目前,国内外大麦遗传转化主要利用Golden Promise品种,基因依赖性严重,尤其是大麦的转化效率较低,并且获得安全型转基因大麦植株对其进一步产业化非常重要。建立高效、无筛选标记大麦遗传转化体系,拓展大麦遗传转化的受体基因型,为大麦基因功能解析和大麦转基因育种及商业化种植提供技术保障。【方法】以优良大麦品种Vlamingh为受体,取开花授粉后14 d左右的幼胚为转化材料,通过对培养基成分及培养步骤优化,建立农杆菌介导的高效遗传转化体系,并利用该体系将Bar和GUS在不同T-DNA区段的双T-DNA表达载体pWMB123转化大麦,获得候选转基因植株,然后利用PCR、Bar试纸条、组织化学染色和Southern blot等检测方法,在T₁代转基因植株中成功获得无筛选标记大麦转基因植株。【结果】在愈伤组织分化阶段,发现培养基中添加1.0 mg·L^-1 KT、0.5 mg·L^-1 6-BA和0.05 mg·L^-1 NAA明显促进愈伤组织分化。在转基因植株生根阶段,发现采用添加1.0 mg·L^-1的IBA的SM1（无其他生长素）的生根效果最佳,培养基中添加2.5 mg·L^-1 CuSO₄显著降低了大麦转基因植株白化现象。共转化了138个幼胚,最终获得14株大麦转基因植株,转化效率10.14%。PCR、Bar试纸条、GUS染色等检测证实,T₀代转基因植株中均含有Bar,而仅有10株含有GUS,2个T-DNA的共转化效率为71.43%。选取4个同时含有Bar和GUS的转基因植株,对其自交后代进行检测,在BL8株系中筛选到2株只含GUS而不含Bar的转基因植株,无筛选标记效率为6.9%。在T₁代转基因植株中对Bar和GUS进行了Southern blot鉴定,发现在多数转基因植株中Bar和GUS均为多拷贝整合,进一步证实BL8-15和BL8-19为无筛选标记的转基因植株。【结论】利用大麦品种Vlamingh为转化材料可以较高效率获得转基因植株,提高愈伤组织分化效率和转基因植株生根效率,降低转基因植株白化现象。利用农杆菌介导双T-DNA表达载体转化大麦,成功获得了无筛选标记转基因植株。     

浅析冷鲜禽不同销售渠道的效益与申浙家禽业务发展方向

2014年7月1日开始浙江省推行家禽定点屠宰、杀白上市,冷鲜禽已成为浙江百姓最重要的家禽产品消费形态。近年来,随着互联网及互联网经济的发展,冷鲜禽的销售渠道已经发生很大变化,不同销售渠道各有特点,本文以杭州申浙家禽有限公司的销售现状为例,对各个销售渠道效益进行比较,同时,通过分析,对杭州申浙家禽有限公司下一步的销售重点方向进行了规划。     

不负绿水青山 方得金山银山

石哈河镇位于巴彦淖尔市最东端,为阴山北麓丘陵半农半牧地区,这里十年九旱,是巴彦淖尔市多年来脱贫攻坚的主战场。从国家八七扶贫攻坚计划到精准扶贫,石哈河镇始终把生态扶贫作为最大的基础工程和民生项目来抓,充分践行了习近平总书记提出的"绿水青山就是金山银山"的发展理念。     

乳果糖和凝结芽孢杆菌合生素对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率和血液指标的影响

本试验旨在研究乳果糖和凝结芽孢杆菌合生素对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率和血液指标的影响。选取24头27～28日龄健康"杜×长×大"三元杂交断奶阉公猪,初始体重为(9.09±0.12) kg,随机分为对照组(n=12)、试验Ⅰ组(n=6)和试验Ⅱ组(n=6)。对照组饲喂基础饲粮(不含抗生素),试验Ⅰ组饲喂基础饲粮+75 mg/kg的金霉素,试验Ⅱ组饲喂基础饲粮+乳果糖和凝结芽孢杆菌合生素(10 g/kg的乳果糖和2×109CFU/kg的凝结芽孢杆菌)。试验期29 d。结果表明:1)第1天、第15天和第29天,3组之间体重均无显著差异(P0.05)。第1～2周,3组之间平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)无显著差异(P0.05);试验Ⅱ组的料重比(F/G)显著低于对照组(P0.05),且与试验Ⅰ组无显著差异(P0.05)。第3～4周和第1～4周,3组之间ADG、ADFI和F/G均无显著差异(P0.05)。2)第3～4周,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的腹泻率显著低于对照组(P0.05),且试验Ⅰ组和试验Ⅱ组之间无显著差异(P0.05);第1～2周和第1～4周,3组之间腹泻率无显著差异(P0.05)。3)试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的总能和粗脂肪的表观消化率高于对照组(P0.05),且试验Ⅰ组和试验Ⅱ组之间无显著差异(P0.05);试验Ⅰ组的粗蛋白质表观消化率高于对照组(P0.05),但试验Ⅱ组与其他2组无显著差异(P0.05)。4)3组之间血液常规指标均无显著差异(P0.05)。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的血清总胆红素含量显著低于对照组(P0.05),且试验Ⅰ组和试验Ⅱ组之间无显著差异(P0.05)。综上所述,在无抗饲粮中添加乳果糖和凝结芽孢杆菌合生素可降低断奶仔猪腹泻率,提高总能和粗脂肪表观消化率,降低血清总胆红素含量,并降低F/G。     

蔬菜农残快速检测仪操作技术及注意事项

通过介绍蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测仪的检测原理、特点、功能和应用领域。并详细概述了农残试剂配制,样品制备,残留农药的提取方法,检测结果的判断及注意事项。     

火红的果子 火红的日子

<正>一公斤杨梅卖到60元,产品供不应求;杨梅合作社齐给力,"年产"十几个"富农"——这说的是靖州杨梅。靖州县种植杨梅已有200多年历史,在全国杨梅产区中,其品质、种植面积、产量均列前茅。目前,全县种植面积已达4000公顷,鲜果总产量6万吨。一个产业的壮大,离不开政府的倾力支持,靖州杨梅也是如     

聚集两会:关注畜牧行业的那些提案

生猪养殖提案刘永好:运用大数据破解"猪周期"全国人大代表、新希望集团董事长刘永好认为,破解"猪周期"要依靠科学,不能盲目跟从,要依靠大数据研究、分析生猪生产与市场需求之间的关系。近年来,全国各地相继建成规模养殖场,国家在鼓励、支持规模化养殖的同时,也应该