猪源唾液酸黏附素受体的表达及其纳米抗体筛选

为制备特异性结合猪源Sn受体的纳米抗体分子，采用人工合成猪肺泡巨噬细胞Sn受体胞外区(Sn4D)基因序列，将其克隆至pET-30a载体中，并在大肠杆菌中诱导表达Sn4D蛋白；经Ni柱纯化的Sn4D蛋白作为靶标分子，在T7噬菌体展示的纳米抗体文库中进行3轮亲和筛选；然后从筛选产物中挑选单抗克隆噬菌体进行亲和力、特异性鉴定。结果显示，成功构建了pET-30a-Sn4D重组表达载体，并诱导表达出约50 ku的目标蛋白，Western-blot显示该蛋白具有良好的反应活性；经过3轮亲和筛选，投入产出比逐渐升高，并从筛选产物中鉴定出6株特异性结合Sn4D的纳米抗体分子。该纳米抗体分子的获得为今后进一步开展抗病毒活性的研究奠定了良好基础。     

大刺鳅促黄体生成素基因克隆及其组织表达分析

[目的]克隆大刺鳅(Mastacembelus armatus)促黄体生成素(LH)基因及明确其表达规律,为进一步阐明LH基因在大刺鳅性腺发育过程中的生理功能及揭示大刺鳅的生殖调控机理提供参考依据.[方法]采用RACE克隆大刺鳅LH基因cDNA全长序列,从GenBank中选择硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物等物种的LH氨基酸序列,通过ClustalX 2.1进行氨基酸序列比对,以MEGA 6.0中的邻接法(NJ)构建系统发育进化树,并应用实时荧光定量PCR检测分析大刺鳅LH基因在不同组织及不同性腺发育期的表达情况.[结果]大刺鳅LH基因cDNA序列全长799 bp,包括224 bp的5'非编码区(5'-UTR)、131 bp的3'非编码区(3'-UTR)和444 bp的开放阅读框(ORF),共编码147个氨基酸残基,第1~22位氨基酸残基组成其信号肽区域.大刺鳅LH氨基酸序列C-末端区域高度保守,但N-末端区域与其他硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物存在明显差异.大刺鳅LH氨基酸序列与其他鱼类的LH氨基酸序列同源性较高,其中与黄鳝(Monopterus albus)的亲缘关系最近.大刺鳅LH基因在其脑组织中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05);在卵巢、心脏、肝脏和精巢中的相对表达量次之;大刺鳅LH基因在不同发育期卵巢和精巢中的表达变化趋势一致,从II期开始其相对表达量随之增加,至V期时达峰值.[结论]大刺鳅LH氨基酸序列具有高度保守区域,其基因在各组织中广泛表达,尤其在脑组织和性腺中具有较高表达量,提示LH的靶基因可能在脑—垂体—性腺轴上,参与大刺鳅的性腺发育调控,主要促进卵母细胞和精子成熟并刺激排卵或排精.     

酿酒酵母细胞壁可通过TLR2受体调控绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1

旨在研究酿酒酵母细胞壁对体外培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响及其调控途径,为揭示酿酒酵母细胞壁对机体免疫的调控机制提供理论依据。本研究将不同质量浓度的酿酒酵母细胞壁提取物(0,25,50,100,200,400mg/L)作用于绵羊瘤胃上皮细胞不同时间(0,2,4,8,12,24h)后,检测上皮细胞SBD-1和Toll样受体-2(TLR2)mRNA表达水平,并进一步通过TLR2阻断试验来证实TLR2是否介导酵母细胞壁促进SBD-1表达。结果表明,不同浓度的酵母细胞壁刺激瘤胃上皮细胞时,随着细胞壁浓度的增加SBD-1mRNA表达量呈先升高后降低的趋势,且酿酒酵母细胞壁质量浓度为200mg/L刺激12h时,SBD-1 mRNA表达量达到峰值,与对照组和其他时间组相比差异显著(P0.05);用质量浓度为200mg/L的酿酒酵母细胞壁刺激绵羊瘤胃上皮细胞不同时间,同样在12h时,TLR2的mRNA表达量达到最大;阻断试验表明TLR2可介导SBD-1的表达。本研究结果表明酿酒酵母细胞壁可促进绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且质量浓度200mg/L时,刺激瘤胃上皮细胞12h时SBD-1的表达量达到最高,而TLR2参与该调控过程。     

半胱胺在动物生产中的应用研究进展

半胱胺(Cysteamine,CS)是一种氨基硫醇,含有活性的巯基和氨基,是半胱氨酸的脱羧产物和辅酶A的组成成分,在体内有着重要生理调节作用。自20世纪50年代开始在动物上应用以来,因其自身的生理特性在防辐射、促生长、治疗胱氨酸病等方面均有着良好的效果。随着CS研究的不断深入以及相关产品的研发,其在影响泌乳、机体免疫、繁殖以及肠道微生物方面的作用也在被重新认识、发现和改善。文章就CS在动物生产中的应用及可能存在的问题方面进行综述,为其在动物饲料添加剂中更加科学、合理地应用提供借鉴与参考。     

复方植物提取精油(奥来可)在养猪临床应用初探

伴随着全球畜牧业禁抗、限抗、降锌的步伐,寻找新的替代抗生素促生长的功能性添加剂势在必行。基于国内外最新基础理论研究进展和大量养猪实践及临床数据的取证,发现复方植物提取精油在改善肠道微生态、抗炎、抗氧化应激、提升机体免疫能力和促生长方面有着优秀的作用。天然、绿色、安全的植物提取精油是养殖业高效、高品质发展的需要,也是提供无抗养殖及安全畜产品的需要。     

实现母牛一年一胎关键技术

多数母牛的妊娠期平均为270~280d,只有让母牛在产犊后的100d内发情、配种、妊娠,即胎间距控制在370d内,才能实现真正意义上的一年一胎. 1 一年一胎技术的理论依据 产后母牛完成子宫内膜的完全再生一般需要30~45d.而产后乏情是由于哺乳行为对乳头的刺激使乳头的感受器兴奋,然后发出冲动经传人神经传到下丘脑,传入神经元末梢分泌神经递质,使下丘脑神经元对雌激素的负反馈作用的敏感性增加,从而降低脉冲发生器的功能,促性腺激素释放激素GnRH的分泌受到抑制,使促卵泡素FSH、促黄体素LH处于低水平,卵泡发育受阻,因而造成了母牛乏情.当然,母牛的饲养管理,产后管理不当等因素,也会导致母牛乏情.     

甘肃嘉峪关日光温室甜樱桃促早栽培技术

从园地选择、建造日光温室、土壤改良、品种选择、砧木选择、苗木定植、扣棚、温湿度调控、肥水管理、花果管理、整形修剪、病虫害防治、采收后管理等方面总结了甜樱桃日光温室栽培技术。     

嫁接植物砧木与接穗互作机理研究进展

嫁接技术作为广泛应用的无性繁殖方式,成为良种化生产的重要环节,已被广泛应用于农林业领域的扩繁、新品种选育、品种改良等方面,开展砧木与接穗间相互作用机制的研究,对于科学选择砧穗组合具有重要意义。从水分和矿质离子、有机物和抗氧化酶、激素作用、基因调控和表观遗传学角度综述砧穗互作的研究现状,阐述主流观点;从激素、基因调控和表观遗传学三者间相互作用方面,初步探索砧穗互作的普适规律。