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【目的】构建方便快捷的植物表达载体.【方法】应用Isothermal in vitro recombination system or"Gibson Assembly"方法设计包含片段间20~25 bp互补重叠序列的引物,通过PCR扩增出带有首尾重叠的目的 DNA片段,可将1个或多个片段和线性化的载体一步组装成表达载体.【结果和结论】利用该方法快速构建了多个水稻基因的全长以及部分缺失编码区表达载体.此外,还通过对Gibson Assembly连接产物进行PCR扩增后再连接到载体,提高多DNA片段组装的效率.本方法不受目的片段内部限制性酶切位点的限制,可广泛应用于各种载体的构建. 相似文献
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《东北农业大学学报》2009,(8)
<正>英国《自然》杂志网站近日报道,中国科学家周琪和高绍荣等人利用iPS细胞(诱导多功能干细胞)克隆出活体实验鼠,首次证明iPS细胞与胚胎干细胞一样具有全能性。中国科学院动物研究所周琪和北京生命科学研究所高绍荣领导的研究小组日前分别利用基本相同的基因技 相似文献
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胡瑞兰 《邯郸农业高等专科学校学报》1999,16(1):48-48
克隆技术是指单性生殖,由单一细胞通过分裂繁殖后代,即产生无性繁殖系或称复制。用扦插法自育果树,这是在植物上最早的克隆。采用植物的体细胞或单一的性细胞(如花粉)也可直接培育成完整的植株。动物的克隆技术开始于本世纪五十年代,未洗将两栖类离蛤模的卵细胞仅用针刺等物理方法不经受精就发育成于代。六十年代童第周等在鱼类胚胎细胞核移植方面做了研究.Gurdon做了用紫外线照射去核和活化爪蟾卵,移植蝌蚪肠上皮细胞核发育为成蛙的研究。八十年代细胞核移植工程转向辅乳类,利用胚胎早期细胞核移植到去核的卵细胞而发育成个体的… 相似文献
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本实验通过对CAEV3’LTR克隆、测序及序列分析,对CAEV3’LTR的变异性与生物学功能有了一定的认识,为进一步揭示LTR与病毒的毒力及复制密切相关奠定了基础。 相似文献