培养液中添加硫酸链霉素对蛋白核小球藻生长、细胞组成及α-亚麻酸含量的影响

研究了0(对照组)、20、60、180和540 μg/mL 5个硫酸链霉素(STRS)浓度下蛋白核小球藻SHOU-1002(Chlorella pyrenoidosa SHOU-1002)生长、细胞组成及α-亚麻酸含量。结果表明：培养前6 d,对照组的藻细胞密度显著高于各STRS处理组(P＜0.05),第10 d对照组和各STRS组藻细胞相对生长率则无显著差异(P＞0.05)。对照组、20、60和180 μg/mL STRS组藻细胞叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量均随培养时间的延长呈现先降低后升高的变化,但各组拐点出现的时间随STRS浓度的升高而延后；540 μg/mL STRS组藻细胞叶绿素a和叶绿素b含量随培养时间的延长持续下降,而类胡萝卜素前4 d快速下降后趋于稳定。藻细胞中α-亚麻酸含量和叶绿素a含量呈极显著负相关(P＜0.01)。培养4 d后各STRS组藻细胞α-亚麻酸(C18:3n-3)含量显著高于对照组(P＜0.05),而C18:2n-6含量则显著低于对照组(P＜0.05)。培养第10 d,藻细胞α-亚麻酸含量在180 μg/mL STRS组最高(52.09 mg/g),较对照组提升了108.19%；同时180 μg/mL STRS组有最高的α-亚麻酸产量(35.34 mg/L)和n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs)产量(52.29 mg/L)。以上结果表明STRS胁迫在抑制蛋白核小球藻SHOU-1002叶绿素a的同时促进了藻细胞中α-亚麻酸及n-3PUFAs的蓄积。     

藻-菌单一及共生系统对海水养殖尾水的净化作用

为探索高效可行的海水养殖尾水处理技术,在净化尾水污染物的同时达到微藻生物量积累,本文对比了普通小球藻(Chlorellavulgaris)和芽孢杆菌(Bacillusspp.)在游离和固定形态下,单一和共生系统的细胞生长及其对尾水中氨氮(NH_4~+-N),正磷酸盐(PO_4~(3–)-P),总磷(TP),化学需氧量(COD_(Mn))的去除效果。实验结果表明:游离状态下,藻–菌共生系统促进小球藻细胞生长及尾水中PO_4~(3–)-P和COD_(Mn)的去除。固定态藻–菌共生系统对NH4~+-N, PO43–-P和TP的处理效果优于单一固定态小球藻和单一固定态芽孢杆菌。对比实验设计的所有处理(游离或固定态下的单一藻、单一菌、藻–菌共生),藻–菌共固定系统的处理效果相对最优,对NH_4~+-N, PO_4~(3–)-P, TP和COD_(Mn)的去除率分别达到96.57%, 98.62%, 89.89%和39.09%,出水NH_4~+-N, PO_4~(3–)-P分别达到中国《渔业水质标准》和《海水养殖水排放要求》二级标准, COD_(Mn)达到《污水综合排放标准》二级标准。     

不同提取方法对双叉犀金龟蛋白质提取率 及体外抗氧化活性的影响

双叉犀金龟（Allomyrina dichotoma）蛋白质含量丰富，是一种重要的资源昆虫。采用碱提法、酸提法、盐提法和醇提法分别提取双叉犀金龟幼虫蛋白质，并以DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性和总还原力为指标，测定4种方法所提取的蛋白质的抗氧化活性。结果显示：碱提法蛋白质提取率显著最高，蛋白质浓度与抗氧化活性之间呈现良好的正相关关系，但不同种类蛋白质的抗氧化能力有所不同；其中盐溶蛋白的DPPH自由基清除活性及总还原力最强，IC₅₀和A₇₀₀为1时的浓度分别0.360 4 和4.780 5 mg·mL^-1；酸溶蛋白的ABTS自由基清除活性最强，IC₅₀为4.439 0 mg·mL^-1。综合来看，提取方法不同时，双叉犀金龟蛋白质具有一定的ABTS自由基清除活性、较高的DPPH自由基清除活性和总还原力，可为后续进一步向食品、医药等方向开发利用提供理论参考。     

氟唑菌苯胺对蛋白核小球藻的立体选择性毒性效应

为了探究氟唑菌苯胺对水生生物的立体选择性毒性效应，测定了氟唑菌苯胺对映体对蛋白核小球藻的急性毒性以及光合色素含量的影响。结果表明，S-氟唑菌苯胺对蛋白核小球藻具有更高的急性毒性，是R-氟唑菌苯胺1.2倍。高剂量暴露浓度下，S-氟唑菌苯胺对小球藻叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素生物合成的抑制率分别为35%、28%、37%，是R-对映体的2.1、1.9、2.8倍，表明氟唑菌苯胺对蛋白核小球藻的立体选择性急性毒性可能是由于对映体对光合色素生物合成抑制差异造成的。降解实验结果表明低毒对映体R-氟唑菌苯胺被优先降解，第7天时R-氟唑菌苯胺和S-氟唑菌苯胺降解率分别为82.5%和65.8%，EF值为0.12，且对映体构型稳定。研究结果为氟唑菌苯胺水生生态风险评价提供数据支撑，同时为手性农药立体选择性机制研究提供新的思路。     

两株蛋白核小球藻 rbcS cDNA 全序列的克隆和分析

以2株蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)F-9和820为实验材料,根据已知绿藻rbcS基因设计简并引物,分别克隆到2条245bp的cDNA片段,以此片段为基础使用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,获得了2条长度分别为861bp和907bp的rbcS基因。序列分析表明,蛋白核小球藻F-9和820的rbcS分别编码181和184个氨基酸,编码区具有与高等植物rbcS保守序列YYDGRYWTMWKLPMFG相类似的结构,起始密码子附近有Kozak保守序列(A/GXXATGG),3′非翻译区有加尾信号TGTAA。同源性分析结果表明,F-9与蛋白核小球藻(GenBank登录号BAE48226)的相似性最高(91%),而F-9与820、F-9和普通小球藻(C.vulgaris)的相似性分别为64%和50%。这2条rbcS基因与其他绿藻和高等植物也表现了广泛的同源性,但相似性不高。该研究旨在为rbcS基因的功能和表达研究奠定基础。     

低温对高浓度人尿液废水培养小球藻的影响

针对寒区气温低，微藻培养过程加热能耗大的问题，以蛋白核小球藻Chlorella pyrenoidosa和普通小球藻 Chlorella sp为试验藻种，利用人工气候培养箱，在人尿液废水添加比例40%条件下，研究2种小球藻在15.0、17.5、20.0、22.5、25.0 ℃较低温度下的生长特性和小球藻蛋白质含量，以及培养液中营养物质的利用情况。结果表明，2种小球藻均可以在高浓度尿液废水中生长，蛋白核小球藻Chlorella pyrenoidosa对各试验组培养液中总氮、氨氮、总磷和化学需氧量（Chemical Oxygen Demand, COD）的平均去除率分别达到78.02%、79.59%、79.31%、20.11%，最大生物量达到0.502 g/L；普通小球藻 Chlorella sp对培养液中总氮、氨氮、总磷和COD的去除效果更好，平均去除率分别达到87.90%、89.55%、89.29%、68.66%，最大生物量达到1.007 g/L。2种小球藻对低温的响应均呈现随温度的升高生物量和培养液中相关指标的去除率也随之增大的趋势，但不同温度区段的变化率存在差异，温度为20.0 ℃及以上时变化较小，温度低于20.0 ℃时变化较大。并且在微藻培养各指标中，微藻的生物量和蛋白含量，以及培养液中的COD含量变化较大，而培养液中的总氮、氨氮、总磷的变化规律差别较小。普通小球藻Chlorella sp对低温的耐受特性明显优于蛋白核小球藻Chlorella pyrenoidosa，普通小球藻 Chlorella sp更适合在低温条件下用于高浓度尿液废水的处理和资源化。该研究为寒区微藻的低耗高效培养和尿液废水的资源化利用提供理论支持。     

饲料中添加藻粉对半刺厚唇鱼生长性能及肠道组织结构的影响

为探讨饲料中添加藻粉对半刺厚唇鱼生长性能、肠道结构的影响。我们设计1号(基础料)、2号(基础料+5%小球藻)、3号(基础料+5%螺旋藻)3个组别，每组设3个平行，每个平行300尾鱼，养殖周期为90 d。在试验周期内，2号半刺厚唇鱼的尾绝对增重最大，增重率达到187.96%,显著高于1号、3号；2号、3号丰满度、内脏比显著低于1号；各组别成活率都较高，差异不显著；2号饲料系数最低，为1.70,显著低于1号的1.86、3号的1.81。2号肠道结构完整，杯状细胞含量多，肠绒毛排列整齐且高度最大，褶皱个数最多。根据生长性能、肠道形态学指标分析，饲料中添加适量小球藻，有利于半刺厚唇鱼的生长。     

小球藻吸附镉的表征及机理

为了研究小球藻吸附镉的机理,在经过一段时间的暴露富集后,我们利用电镜扫描-能谱、红外光谱仪分析重金属镉富集下小球藻细胞表面发生的变化;利用电感耦合等离子体发射光谱仪分析重金属镉富集下小球藻元素含量的变化。结果表明,吸附前藻细胞的细胞壁平滑,吸附后细胞壁不再光滑。红外光谱分析表明,吸附后3 276 cm^-1处的吸收强度减弱,1 535 cm^-1处的酰胺Ⅱ带,N—H弯曲振动和C—N伸缩振动,1 044 cm^-1处有减少17 cm^-1的变化;电感耦合等离子体发射光谱分析发现吸附后Cd²⁺增加,K⁺、Na⁺含量也有所增加,而Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺和Fe²⁺减少。     

六价铬对普通小球藻的急性毒性效应

为探究重金属铬在水环境中的致毒机理和生态风险，本实验开展不同浓度Cr⁶⁺(0、0.1、0.75、1.5、2.25和3 mg/L)对受试生物普通小球藻(Chlorella vulgaris)的急性毒性实验，分析藻密度、叶绿素a(Chl-a)含量、多糖含量、蛋白(TP)含量、活性氧自由基(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、细胞膜通透性、总抗氧化(T-AOC)能力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、植物螯合肽(PCs)含量和吸附效率等指标的影响。研究结果表明在96 h内Cr⁶⁺各浓度组均会抑制藻细胞的生长，其中3 mg/L处理组抑制率最高，为57.32%,96 h-IC₅₀为2.067 mg/L。叶绿素a(Chl-a)含量和藻细胞生物量的变化呈现一致性，3 mg/L处理组最低，仅为对照组的26.60%。藻细胞胞内多糖和TP含量随着胁迫浓度的升高而降低。胁迫浓度的增加诱导了ROS含量的升高，3 mg/L浓度组ROS水平为对照组的6倍，MDA含量呈现相同趋势。此时藻细胞受到氧化损伤，细胞膜通透性显著增强...     

臭氧处理海水对小球藻的生理效应

采用经臭氧处理的海水培养小球藻，分析了小球藻的相对增长速率、叶绿素-a含量，DNA和RNA含量及海水中三氮含量的变化，结果表明：1、一定剂量的臭氧处理可提高小球藻的生长速度和叶绿素的含量，高剂量的处理会抑制小球藻的生长。2、藻细胞中DNA含量对臭氧处理表现的相对稳定，而RNA含量比较敏感，一定剂量的臭氧处理可引起RNA含量增加。3、经臭氧处理的海水，硝态氮（NO3^--N)的含量有所提高，而铵态氮（NH4^ -N)和亚硝态氮（NO2^--N)的含量降低。