茄花青素5-O糖基转移酶基因克隆与表达特征分析

以云南长紫茄果皮为实验材料,采用同源克隆技术和RACE结合的方法,克隆到茄子花青素5-O糖基转移酶基因(5GT).该基因编码区为1 413 bp,与矮牵牛5GT基因序列同源性为87.4％.花青素含量测定和半定量PCR结果表明,该基因在云南紫长茄的花瓣和成熟果皮中的表达量要高于云南圆白茄;而在叶片和未成熟果皮中,2个品种...     

小果型番茄花药愈伤组织诱导因素的研究

以5个小果型番茄F1代为材料,研究了不同基因型、低温预处理时间、蔗糖浓度、激素配比以及培养条件对花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:5个基因型的花药愈伤诱导能力有明显的差异,以XF98-7×奇斯曼尼的出愈率最高,达到33.46%;4 ℃低温预处理2 d对愈伤组织的诱导有显著的促进作用;最适愈伤诱导培养基是MS + 0.5 mg·L-1 NAA +1 mg·L-1 KT+40 g·L-1蔗糖;在黑暗条件下培养有利于愈伤组织的诱导.     

NaCl胁迫对不同品种番茄种子发芽特性的影响

本研究采用 6个番茄栽培品种,以不同浓度NaCl对种子发芽作盐胁迫处理。研究结果表明,在发芽期的耐盐力上,参试品种间存在明显差异。“豫番茄1号”和“圣女”耐盐力最强:在60mmol/L NaCl胁迫时,发芽才明显推迟;在80mmol/L NaCl胁迫时,相对发芽率还分别可达64.8％和56.9％。“洋杂94—1”耐盐力最弱:在20mmol/L NaCl胁迫时,发芽就明显推迟;在80mmol/L NaCl胁迫时,发芽率为零。     

茄子抗逆相关基因SmDREB3的克隆和表达分析

DREB(dehydration responsive element binding protein)基因在植物非生物胁迫的应激反应中具有非常重要的作用,本研究运用同源克隆的方法从‘YZ-14’紫茄品种中分离克隆得到了一个DREB基因,因其与番茄和马铃薯中DREB3基因的相似度很高,所以命名为SmDREB3。SmDREB3基因的cDNA全长为887bp,开放阅读框(ORF)长度为777bp,可以编码一个含有259个氨基酸的蛋白,与同科作物马铃薯中DREB基因序列的相似性高达90%,与番茄中DREB基因序列的相似性也能达到88%。成熟蛋白等电点为6.39,分子量为28.665kDa。RT-qPCR实验结果表明,SmDREB基因在紫茄的各个组织中都会表达,但表达水平具有组织特异性,其在果皮中的表达量最高,其次为叶和果肉,而在根、花和茎中的表达量相对较低。本研究为深入研究茄子的抗逆机制以及培育抗逆茄子新品种方面提供了理论基础。     

烟粉虱的危害及其综合防治技术

烟粉虱严重危害夏季番茄、黄瓜等夏秋蔬菜的生产,为解决此问题,笔者在查阅大量资料并结合实地调研的基础上,分析了烟粉虱的危害特性,并提出了相关防治技术,以供参考。     

茄子紫外光受体蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析

以光敏感型茄子(Solanum melongena L.)‘蓝山禾线茄’子叶为材料,克隆了紫外光受体蛋白基因UVR8同源基因SmUVR8的cDNA全长序列,并对序列进行生物信息分析,通过转化拟南芥突变体以及实时荧光定量PCR研究其功能。序列分析表明,SmUVR8的CDS全长1 530 bp,编码509个氨基酸,属于较不稳定亲水性蛋白。蛋白序列比对发现,SmUVR8与其他茄科植物的UVR8高度同源。通过拟南芥uvr8突变体转化试验发现,转基因植株(SmUVR8/uvr8)恢复了野生型的表型,说明SmUVR8与拟南芥的UVR8功能具有相似性。通过实时定量PCR发现,UV-B照射影响SmUVR8以及下游SmHY5和SmCHS的表达。酵母双杂交结果表明,SmUVR8与SmCOP1的互作依赖于UV-B。推测UV-B在茄子中是通过紫外光受体SmUVR8与SmCOP1的互作,促进SmHY5和SmCHS的表达。     

茄子花青素合成中SmTTG1、SmGL3和SmTT8的表达及其蛋白质间的相互作用

采用同源克隆方法从茄子（Solanum melongena L.）中分离得到3个基因,分别命名为SmTTG1、SmGL3和SmTT8。序列分析表明,SmTTG1的cDNA全长1 220 bp,开放阅读框为1 029 bp,编码342个氨基酸,与马铃薯（S. tuberosum L.）TTG1基因序列同源性达到94%,成熟蛋白等电点为4.90,具有典型的WD结构域;SmGL3的cDNA全长2 329 bp,开放阅读框为1 887 bp,编码628个氨基酸,与马铃薯GL3基因序列相似性达到94%,蛋白等电点为5.61,有典型的HLH结构域;SmTT8的cDNA全长2 242 bp,开放阅读框为1 896 bp,编码631个氨基酸,与马铃薯TT8基因序列同源性为85%,蛋白等电点为5.18,有典型的HLH结构域。荧光定量检测结果表明,SmTTG1、SmGL3和SmTT8在茄子根、茎、叶、花、果皮和果肉中均有表达,但表达水平具有组织特异性。酵母双杂交结果表明,SmTTG1与SmTT8、SmGL3之间有相互作用,并且SmTTG1、SmGL3和SmTT8都与SmMYB之间发生作用。推测SmTTG1为WD40转录因子,SmGL3和SmTT8为bHLH转录因子,它们都参与调控茄子花青素的合成。     

栽培番茄品种指纹图谱的AFLP分析

以62份栽培番茄为材料,利用65对AFLP引物进行选择性扩增,选出5对多态性丰富、带型清晰的引物进行扩增,共获得85个多态性位点,占总扩增位点的35.41%;选出清晰的16个位点构建了62份栽培番茄的AFLP指纹鉴别图谱。结果表明,由引物组合P55M48、P58M68、P21M49、P77M51、P58M60所构建的DNA指纹鉴别图谱可将供试材料完全区分开。     

不结球白菜SRAP标记体系的建立与作图亲本筛选

SRAP标记是遗传作图和分子辅助育种的重要技术之一,为了建立具有通用性的不结球白菜SRAP标记体系,选用国家种质资源重点实验室的不结球白菜作为试材,利用正交设计方法对、模板DNA、引物、Taq酶和缓冲液6个因素进行了优化,获得了不结球白菜SRAP标记反应体系的最佳组合:10 μL反应体积中包含40 ng的DNA模板、75 ng引物、0.2 mmol·L-1的的、0.15 U的Taq酶和1倍体积的缓冲液.筛选不结球白菜的作图杂交亲本是构建遗传连锁图谱的基础,以12份不结球白菜亲本为试材,利用70对SRAP引物组合共扩增出了382条多态性带,平均每个引物组合扩增出5.46条,由聚类分析图确定了杂交亲本为相似系数最小的2个组合,Q06-2和Q06--4或Q06-2和Q06-6,同时验证了SRAP标记体系的通用性.     

正交设计优化茄子SSR反应体系

以茄子基因组DNA为模板,利用正交设计方法对茄子SSR反应体系中的Mg^2＋、模板DNA、Taq聚合酶、dNTP、引物5个因素进行了优化,同时对反应程序中的退火温度及循环次数进行筛选。结果确定了茄子10μL体积SSR反应体系的最优条件为：Buffer为1μL,Mg^2＋为2．25mmol·L^-1,dNTP为400μmol·L^-1,上下游引物各为39.60ng,Taq聚合酶为0．75U,DNA约为100ng。PCR程序为94℃预变性2min：然后进行35个循环的94℃变性30s,52℃复性30s,72℃延伸45s;72℃延伸8min后4℃保存。