锦鲤microRNA-137系统进化、靶基因验证及表达分析

为了探究microRNA-137(miR-137)与锦鲤体色形成的关系,实验对已报道的14种鱼类miR-137前体序列(precursor miR-137, pre-miR-137)进行比对,利用最大似然估计法(Maximum Likelihood Estimate, MLE)构建系统进化树,同时荧光定量PCR (quantitative realtime PCR, qRT-PCR)分析其在体色发生阶段和不同组织中的相对表达水平,并预测其靶基因,随后对靶基因进行GO和KEGG分析,最后通过荧光素酶实验验证miR-137-3p与靶基因的靶向关系,并分析miR-137-3p与靶基因mRNA的表达变化。结果显示,锦鲤与鲤的pre-miR-137序列相似度最高,且pre-miR-137序列在所有鱼类中具有较高的保守性。对miR-137靶基因进行GO和KEGG分析,多个靶基因富集在色素沉积、色素细胞分化等信号通路。定量结果显示,锦鲤出膜后11 d(day post hatching, dph) miR-137-3p表达量达到最高,随后显著降低;miR-137-3p在锦鲤不同组织中均有表达,在眼和肌肉中表达量较高,在皮肤和鳍条等色素细胞存在的组织中也有较高表达,且白色组织表达量显著高于红色组织。荧光素酶实验结果显示,miR-137-3p可结合在mitfa 3′-UTR上并抑制其表达,但对sprb并无显著抑制作用;miR-137-3p与mitfa和sprb在不同发育阶段存在显著负相关,但在组织中不存在相关性。本研究发现,miR-137在鱼类进化过程中高度保守,与锦鲤体色形成具有一定的相关性,且可靶向调控mitfa参与体色的形成,以上结果为进一步探讨miR-137在锦鲤体色形成中的作用提供基础数据。     

不同组分与配比钝化剂对Pb、Cd污染土壤修复时效性研究

为了解不同组分及配比钝化剂对Pb、Cd污染土壤钝化效果及时效性,采用膨润土、沸石、石灰和磷肥作为原料制备钝化剂进行土壤试验。研究发现,钝化剂对土壤中Pb、Cd的钝化时效可持续90d以上。且以沸石作为原料制备的钝化剂对土壤中Cd的钝化效果最好,以膨润土作为原料制备的钝化剂对土壤中Pb的钝化效果最好。相较于其他配比,磷肥︰石灰︰粘土矿物比例为1︰2︰1配比的钝化剂对土壤中Cd和Pb的钝化效果较好。     

鸡传染性腺胃炎相关的圆圈病毒3型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立

本研究针对病毒基因组5'端非编码区的保守区域设计引物,建立了用于检测鸡传染性腺胃炎相关的圆圈病毒3型(Gyv3)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.该方法具有较好的特异性,敏感性和重复性,对于鸡Gyv3以外的其他常见鸡病毒性病原的DNA或cDNA均无特异性扩增,灵敏度能达到30.76 copies/μL,组内和...     

米曲霉HDF-7固定化菌体发酵产蛋白酶条件的优化

为了在工业化生产豆酱的过程中,缩短发酵周期,提高原料利用率,并降低生产成本,保证产品质量,利用从传统豆酱中分离得到的米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7作为出发菌株,经过海藻酸钠包埋法固定后,对其最佳固定化菌球的发酵产蛋白酶条件进行了优化。结果表明,固定化菌球以3%的接种量接入到中性蛋白酶发酵培养液中增殖至168 h后,其蛋白酶酶活力最高,为18.49±0.65 U/mL,利用该增殖菌球单批次发酵到24 h时,其蛋白酶活力表现最高。并可以重复分批发酵7次而蛋白酶活力保持不变。本研究通过固定化米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7菌体并优化其发酵生产蛋白酶的条件,可以缩短发酵时间,提高菌体的利用效率,并保持酶活稳定。该研究为蛋白酶的规模化生产提供了试验基础。     

5种开口饵料对淇河鲫仔鱼摄食、生长和存活率的影响

本研究采用丰年虫幼体、熟蛋黄、豆浆、商业开口料、脱壳丰年虫卵5种常见的淡水鱼开口饵料对淇河鲫（Carassius auratus）仔鱼进行了25 d的培育试验，探讨不同开口饵料对其开口摄食率、存活率、生长率和形态参数的影响，从而筛选出淇河鲫最理想的开口饵料。研究结果显示：投喂24 h后，蛋黄组的开口摄食率达到100%，其他各组的开口摄食率也都大于88%，各组之间无显著性差异（P> 0.05）；在0～15 d时，各组存活率呈现出明显的下降趋势，15 d后，各组的存活率基本保持稳定，25 d后，丰年虫幼体组的存活率显著大于蛋黄组和豆浆组（P <0.05）;25 d后，丰年虫幼体组的生长效果最好，其体重和体长分别增长了39.10倍和1.65倍，其末体重、末体长、日增体重、日增体长、体重和体长特定生长率均显著高于其他组（P <0.05），其次为蛋黄组，而另外三组表现出较差的生长效果；在形态参数方面，25 d后，丰年虫幼体组的肥满度显著大于其他组（P <0.05），其次为脱壳丰年虫卵组。综上，5种常见开口饵料中，丰年虫幼体是淇河鲫仔鱼最理想的开口饵料。     

生物质气化燃气和沼气分散供热经济与环境效益分析

随着中国新农村建设的推进和供热事业的迅速发展,高效清洁供热在中国农村引起关注。该文以天津市小塔沽村为供暖对象,对其进行热负荷估算,并采用方案比较法,针对农村2种新能源燃气(生物质气化燃气和户用沼气)分散供热的经济效益(投资、运行费用、投资回收期)和温室气体减排进行对比分析。研究结果发现户用沼气分散供热初投资高于生物质气化燃气分散供热,前者为后者的1.86倍;户用沼气运行费用也略高于生物质气化燃气,但生物质气化燃气分散供热后期管理要优于户用沼气分散供热,另外,户用沼气存在副产物经济效益,每年可高达29.9万元。2种供热方式温室气体减排效益接近,CO2的减排量都为561.18 t/a,CH4减排量约为1 300~2 200 kg/a。整体而言,生物质气化燃气分散供热优于户用沼气分散供热经济性。特别针对农村的管理水平落后,生物质气化燃气分散供热的优点更加突出。所以类似天津郊区这样的农村地区,供暖期需要大量燃气的农村宜采用生物质气化燃气分散供热方式。该文可从经济、环境角度为农村类似情况燃料及供热方式选择提供参考。     

模拟酸雨胁迫对菲白竹生理特性的影响1）

以园林观赏竹种菲白竹为材料,采用人工模拟酸雨的方法研究不同强度酸雨（ pH＝4．0、pH＝3．0、pH＝2．0）胁迫对菲白竹生理特性的影响。结果表明：不同强度的酸雨胁迫均导致菲白竹叶片出现不同程度的伤害症状,受伤害程度随着酸雨pH值的降低而加剧。胁迫解除初期,叶片可溶性蛋白质量分数和叶绿素相对含量（SPAD值）均低于对照,而丙二醛（MDA）质量摩尔浓度,质膜透性以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性较对照出现不同程度的升高,变化幅度随胁迫强度的增加而增加;不同生理指标对胁迫的敏感程度有所不同,可溶性蛋白质量分数、叶绿素相对含量、质膜透性等可作为反映酸雨胁迫下菲白竹受伤害程度的重要依据。经过1个月左右的恢复期,pH＝4．0胁迫处理组的大多数指标能恢复至对照水平;pH＝3．0处理组有一定的恢复趋势,但恢复程度不明显;而pH＝2．0胁迫组的各项指标均不能恢复,且与对照差异显著（ P＜0．05）。说明菲白竹对模拟酸雨pH＝4．0的胁迫处理表现出较强的自我修复能力;对pH＝3．0酸雨胁迫具有一定的修复作用;但在pH＝2．0处理下,则产生不可逆伤害,无法通过自我调节恢复,这与外部形态的观察结果一致。高频度强酸雨（ pH＝2．0）处理下,菲白竹叶片伤害的主要原因可能是由过量H＋累积对植株造成的直接伤害引起的;而低酸度（ pH＝4．0）处理产生的生理伤害及其修复与活性氧代谢调节有关。     

高氯酸钾浸种对水稻种子萌发及幼苗生理特性的影响

以水稻为实验材料,在水培及控制条件下,探讨不同浓度（0、20、50、100和300 mg·L^-1）的高氯酸钾浸种胁迫对水稻种子萌发及幼苗生长生理的影响。结果表明,低浓度胁迫（20 mg·L^-1）对种子萌发有一定的刺激作用,萌发率、根长和根数均大于对照,随着胁迫浓度和时间的增加,种子萌发及幼苗生长受抑制程度逐渐增大,并且茎的生长比根受影响程度更大。与对照相比,幼苗叶片叶绿素、蛋白质和MDA含量均随胁迫浓度的增高而下降,而SOD活性呈先升后降的趋势,POD活性持续增强,CAT则明显下降。综合各指标的变化及相关性分析结果表明,高氯酸钾抑制水稻种子萌发及导致的幼苗生理伤害与活性氧代谢失调有关,其伤害机制尚待进一步探讨。     

利用Y染色体SRY基因分析马鹿的父系起源和遗传多样性

试验旨在从分子水平上研究中国马鹿的父系起源结构和遗传多样性水平,判断各种群间的系统发育关系和亲缘关系远近。通过DNA提取、PCR扩增和直接测序的方法,对天山马鹿、阿尔泰马鹿、塔河马鹿、东北马鹿等11个群体共159头马鹿的SRY基因序列进行了检测和分析,计算碱基组成、核苷酸多样性（Pi）、单倍型多样性（Hd）以评估遗传多样性,构建单倍型网络图;以白唇鹿为外群,用邻接法（NJ）和最大似然法（ML）构建系统进化树,探讨马鹿的聚类及遗传多样性。结果显示,所获序列长度为1 615 bp,在基因中共鉴定出18个SNPs多态性位点,占核苷酸总数的1.11%,根据多态性位点鉴定出14个单倍型,优势单倍型为Hap-1,所占频率35.84%,为天山马鹿、阿尔泰马鹿、阿拉善马鹿、塔河马鹿、东北马鹿、甘肃马鹿、北美马鹿和高产鹿王种群的共有单倍型。其中,阿拉善马鹿、塔河马鹿、甘肃马鹿、川藏马鹿、北美马鹿和高产鹿王均具有独有单倍型。单倍型多样性介于0~0.857,核苷酸多样性介于0~0.00272,各亚种间遗传距离最大的是塔河马鹿与西藏马鹿（0.002406）,最小的是阿拉善马鹿与青海马鹿（0.000124）。基于邻接法和最大似然法构建的系统进化树一致,显示11个野生马鹿种群间共存在3个分支,支系S1包含全部马鹿种群,塔河马鹿、甘肃马鹿、北美马鹿和高产鹿王构成支系S2,北美马鹿构成支系S3,单倍型最小网络图与系统进化树一致。表明各马鹿种群之间的遗传多样性存在差异,塔河马鹿、高产鹿王和甘肃马鹿分别存在2个父系类型,北美马鹿存在3个父系类型,其他马鹿种群只存在1个父系类型,Hap-1在单倍型组S1中处于核心位置,其他单倍型分散分布于其周围,推测Hap-1为马鹿种群中较为原始的单倍型。     

疏剪·短剪·缩剪——谈树桩盆景的修剪技巧

树桩修剪可控制树木生长,保持矮性,促使分枝并使叶片密集,达到大树变小,小中寓大的艺术效果。同时,修剪又是保证桩景植物在盆土少,水肥受盆限制的条件下正常地生长发育、开花结果(指花果盆景)、老而不衰的重要措施。一般落叶树种(如榆树、雀梅、三角枫等)一年四季均可修剪,