鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株的选育

【目的】将鸭坦布苏病毒BZ_2010株在SPF鸡胚上进行连续传代致弱,旨在选育安全性高、免疫原性好的活疫苗候选毒株。【方法】以SPF鸡胚为增殖宿主,将BZ_2010株连续传代,直至第120代,以1日龄雏鸭和30周龄的产蛋种鸭为试验对象,对第120代次毒株（命名为VC2）的安全性进行评价;以1d雏鸭为试验对象,对VC2株的返强情况进行评价;以18周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的中和抗体进行监测;以25周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的保护效果进行评价;利用RT-PCR方法分别扩增BZ_2010株和VC2株的E基因和NS4A基因,进行测序分析。【结果】传代病毒对鸡胚的平均死亡时间逐渐缩短,而病毒毒价有逐渐提高的趋势,ELD50由第20代的10^-5.3/0.1mL提高到第120代的10^-5.8/0.1mL,而且第80代之前提高较快,后期基本稳定。将VC2株通过颈部皮下接种1d雏鸭和肌肉接种30周龄产蛋种鸭,接种后试验鸭无异常临床表现,肝脏也无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的安全性。将VC2在1d雏鸭进行连续5次传代,未发现试验鸭有任何异常症状,将第5代组织悬液接种1d雏鸭,采集肝脏进行病理切片观察,发现无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的稳定性。基因测序分析结果显示,VC2株 E蛋白的第86、157、189、301和312位氨基酸发生改变,而NS4A蛋白只有一个氨基酸发生突变,即第54位氨基酸由F变为L。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,第4周即可达到高峰,并且维持较长时间;VC2免疫后于第2周和第50周利用强毒株进行攻毒试验,结果VC2免疫组在攻毒后未出现异常症状,粪便正常,产蛋率保持正常,这说明VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。【结论】本研究通过鸡胚连续传代成功获得了一株安全性高、免疫原性好的鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,可维持较长时间。攻毒试验结果表明,VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。     

诺达一号、二号复方中药制剂对人工感染鸡球虫病防治作用观察

鸡球虫病是由艾美耳科艾美耳属的球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种危害极为严重的全球性寄生虫病,主要侵害10-40日龄的雏鸡。集约化养鸡场成为球虫病爆发的最适宜场所,其发病率30％-100％,死亡率20％-80％,甚至更高,严重威胁着养鸡业的发展。目前,临床上主要依靠抗球虫药物来控制该病的发生,但药物的毒性、动物性食品残留和耐药性等不良反应限制了其应用。中药作为天然药物,在抗鸡球虫病方面有其独特的优点,如价格低廉、来源广、抗药性和药物残留少、对动物体兼有药物性与营养性的双重作用等,成为很多学者研究球虫病防治的一个热点。为探讨“诺达一号”和“诺达二号”复方中药制剂对人工感染鸡球虫病的防治效果,进行了以下试验。     

不同运输条件下液态木聚糖酶的稳定牲研究

实验室中模拟温度(-20～55℃)、时长(24～72 h)的运输条件,以4℃冷藏酶液为对照,通过比较处理前后的酶活变化来评价运输对液态木聚糖酶稳定性的影响,结果表明:-20～15℃环境下,时长72 h内的运输对液态木聚糖酶的酶活测定值无明显影响,也不会造成明显的酶活损失;25～55℃环境下.时长24～72 h的运输对液态木聚糖酶的稳定性有明显影响,温度升高(或时长增加)除导致酶活损失加快外,还会引起酶活测定值与4℃存储后测定值的明显差异.     

国外提高蛋鸡产蛋量的几种方法

1 饲料中添加不同的营养成份法 1.1 维生素C 俄罗斯研究结果表明:鸡舍在17.8～44.4℃气温下,用每千克添加40mg维生素C的饲料喂产蛋鸡,3个月可增产约6%的鸡蛋.     

荷兰养猪经验浅谈

2009年5月,笔者与同事到荷兰参观考察了12家托佩克种猪场,对占据荷兰85％种猪市场的托佩克种猪有了更深的了解,同时对荷兰的养猪业发展现状有了直观认识,针对荷兰养猪现状,笔者认为有些可以借鉴的地方,以供国内养猪者参考。     

螺旋藻多糖酶解辅助超声波提取工艺的优化

研究了螺旋藻多糖的酶解辅助超声波提取工艺,并对其提取工艺条件进行优化。在提取温度60℃、液固比16倍、提取次数1次条件下,酶解辅助超声波提取法最适工艺条件为:提取时间15min,超声波功率200W,组合酶量为0.10g。酶解辅助超声波提取具有迅速、节能、操作简便、提取率高等优点,是一种较好的螺旋藻多糖提取的工艺。     

光镊拉曼光谱在南极细菌低温降解石油烃中的应用

光镊拉曼光谱技术（LTRS）是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技术相结合,用同一束光来实现囚禁单个悬浮细胞并激发细胞分子的拉曼光谱。利用LTKS系统,可以实现对单个南极石油烃降解嗜冷菌细胞内的生化代谢过程的实时监测,了解其参与石油烃分解代谢的过程,获知单个细胞内部生化分子变化与环境变化的相互关系,更好的了解其降解机制。     

利用ITS核酸序列分析鉴定海洋青霉菌

[目的]利用ITS核酸序列对6株根据形态学特征初步鉴定为青霉菌的海洋真菌进行鉴定。[方法]采用分子生物学技术,对6株样品的ITS序列进行克隆,并利用ClustalX1．83软件对结果进行系统发育分析。[结果]通过PCR克隆获得了6株样品的ITS序列,将结果与GenBank中已登陆的其他序列进行系统发育分析,确定了6株菌株均属于青霉菌属。[结论]该6株菌株均属于青霉菌属。     

应用不同纯病毒制剂防治美国白蛾试验

通过应用2种新型核型多角体病毒对不同世代的美国白蛾幼虫进行防治药效试验。结果表明:2种病毒杀虫效果最高达到80.0%以上,为今后病毒试剂的生产提供了重要依据。     

胶州湾东岸表层沉积物中多氯联苯的分布特征及风险评价

分别于2009年春季(4月)、夏季(8月)、秋季(10月)、冬季(2010年1月)采集胶州湾东岸海域12个站位表层沉积物样品,参照美国EPA标准方法及采用气相色谱质谱联用(GC/MS)技术对表层沉积物中多氯联苯含量进行分析测定,同时对沉积物中多氯联苯的污染程度、年度分布特征、污染来源进行了研究.结果表明,胶州湾东岸表层沉积物中多氯联苯总量年度平均值较低,在10.39～22.26ng·g-1之间,但各站点含量变化幅度较大,在1.84～l05.22 ng·g-1之间;不同监测季节多氯联苯含量有明显差别,各海域总体含量为夏季＞秋季＞冬季＞春季,整体上呈现出由北向南逐渐降低的趋势,各调查海域含量是李村河＞海泊河＞石老人浴场.生态风险值、效应含量标准法以及毒性当量法评价结果表明,胶州湾东岸表层沉积物总体潜在风险不高,未对生态造成严重影响,但是李村河表层沉积物处于中度污染水平,应当引起关注.