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AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
利用杆状病毒表达系统对Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VPl基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白功能及建立Asia Ⅰ型FMDV血清学诊断方法奠定基础.采用PCR方法从pGEM-T-Easy-Asia Ⅰ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BaeHTA-VPl再转入DH10Bae感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Baemid-VPl,然后转染Sf9昆虫细胞.PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Baemid-VP1,SDS-PAGE和West-ern-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白.将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出Asia Ⅰ型口蹄疫病毒阳性血清.Asia Ⅰ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础. 相似文献
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Word平台题库卷库系统一改传统的数据库设计,MicrosoftWord文档作为题库、卷库、试卷的载体。题库、卷库、试卷的编辑均在MicrosoftWord中进行,做到了真正意义上的图文并茂。试题指标简洁、组卷方便,受到普通教师的欢迎。 相似文献
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我国刑法没有规定残害、虐待珍贵、濒危野生动物罪,而在现实生活中,残害、虐待珍贵、濒危野生动物的案件时常发生,有的案件在社会上还造成严重后果,引起人们强烈反响。笔者认为,应当尽快在我国刑法中增设残害、虐待珍贵、濒危野生动物罪,以适应目前生态建设和环境保护的形势。本文拟在罪状表述、法定刑配置方面提出以下几点设想: 相似文献
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20 0 2年 4月微山县夏镇某养鸭户饲养的 40 0 0只蛋雏鸭 ,于 6d龄时发生一种急性、高死亡率、有角弓反张等神经症状的疾病 ,3天共死亡 2 36只 ,用抗菌素药物治疗无效来我局门诊部就诊。经临诊检查和实验室检验 ,确认为鸭病毒性肝炎并发大肠杆菌病。采取综合性防治后 ,病情得到了控制。1 临诊症状雏鸭突然发病 ,精神萎糜 ,食欲减少或废绝 ,行动迟缓 ,眼半闭呈昏睡状态。缩颈拱背、翅下垂 ,大多排绿色稀粪。不久病鸭出现神经症状 ,运动失调 ,全身性抽搐 ,死前头颈后仰 ,脚腿伸直 ,呈角弓反张状。2 剖检变化肝肿大、质脆、外观色暗淡或发黄 ,… 相似文献
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本文主要从化学课程的价值,化学教学内容和方法上来谈论中等农业职业学校中,如何进行化学课程的教学改革,从而来适应现代中国农业职业教育的发展。 相似文献
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禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定 总被引:5,自引:1,他引:4
参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物,经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段,再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中,转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明,融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应,而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。 相似文献