条件性敲除D1133L基因的重组非洲猪瘟病毒的构建及增殖特性

前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示：本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重...     

北京规模化养殖场畜禽粪便中养分、重金属和抗生素含量分析

旨在研究因畜牧业集约化不断提高导致畜禽粪便急剧增加而造成的环境污染程度。试验采用分光光度法、电感耦合等离子体法、串联质谱法等,测定了北京地区规模化养殖场猪粪(n=9)、鸡粪(n=12)、牛粪(n=30)中养分、重金属以及抗生素的含量,为畜禽粪便的农田利用提供数据支撑。结果表明：畜禽粪便中养分含量分布差异较大,表现为鸡粪中全氮和全钾含量最高,而猪粪中全磷和有机质含量最高,查阅相关研究发现,北京市规模化养殖场的猪粪、鸡粪和牛粪中全氮、全磷、全钾和有机质的含量变化较小。重金属含量整体呈现出锌(Zn)>铬(Cr)>铜(Cu)>铅(Pb)>砷(As)>汞(Hg)的趋势,其中猪粪Zn、Cu平均含量为327.44 mg/kg和49.23 mg/kg,显著高于鸡粪和牛粪;牛粪中Pb、Cr平均含量为9.82 mg/kg和107.96 mg/kg,显著高于猪粪和鸡粪;鸡粪中As平均含量最高,为18.06 mg/kg。与《农用污泥污染物控制标准》(GB 4284—2018)最低限度要求相比,牛粪、猪粪、鸡粪中分别有Cr、As、As超标的问题。所有样品中未检测到磺胺类抗生素,但四...     

大中型沼气池结构设计应考虑温度的影响

温度和沼气发酵紧密相关,也是沼气池池体结构设计的一个不可忽视的重要因素。温度变化引起的热胀冷缩导致池体裂缝破坏现象并不罕见,这就涉及到温度应力问题。我们认为在大中型沼气池设计时应该考虑温度应力的影响,使池体在强度、刚度和抗裂度诸方面符合规范要求。下面结合我们的一个工程设计来探讨这个问题。我市建湖县蒋营生态场新设计的一个80m~3贮气柜,采用圆柱形地上池,池壁高3.5m,直径为5.5m,池壁、池底厚15cm,选用双层配筋的钢筋混凝土结构。由荷载分析     

二段式疲劳损伤累积规律及寿命估算

通过对大量疲劳损伤试验数据分析和理论研究,提出了不同加载顺序下的损伤折线拐点坐标公式及二段式疲劳损伤累积规律。本文提出的损伤折线比Miner损伤线更接近试验数据,疲劳寿命估算方法能用于各种加载情况。试验验证表明,本文方法估算寿命误差比Miner法显著降低。     

牦牛干巴和黄牛干巴挥发性风味特征与差异分析

为分析和鉴定牦牛干巴和黄牛干巴中的特征性风味成分,采用电子鼻和固相微萃取(SPME)/气相色谱-嗅闻-质谱联用(GC-O-MS)方法分析了其中的挥发性风味成分。电子鼻检测结果表明,2组样品之间的风味差异显著(p0.05)。2组样品中共鉴定出54种挥发性化合物,其中,牦牛干巴和黄牛干巴中分别鉴定出42种和50种。2组样品中共有成分38种,包括12种烃类、7种醛类、8种醇类、3种酮类、2种呋喃类、1种酯类和5种其他类,其中,13种成分含量差异显著(p0.05)。烃类在牦牛干巴的风味组成中含量最高,而醛类在黄牛干巴的组成中含量最高。二氢化茚、十六烷、乙酸乙酯、乙酸-2-乙基己酯4种成分是牦牛干巴中的特有成分,3-甲基丁醛、反-2-辛烯醛、反式-2-壬烯醛、4-乙基苯甲醛、3-甲基丁醇、反式-2-癸烯醇、反式-2-辛烯醇、1-壬醇、苯乙醇、醋酸乙烯基酯、己酸乙酯、草蒿脑12种成分是黄牛干巴中的特有成分,这些物质是2组产品的主要差异性物质。脂肪氧化、氨基酸的Strecker降解及微生物代谢是牛干巴产品风味形成的主要来源。本研究将为牛干巴风味品质评价、生产工艺的控制、产品的标准化等提供理论依据。     

集约化猪场粪便污水沼气发酵综合处理系统的生产试验

随着禽畜养殖业集约化生产的发展,每个养殖场日排放数以百吨计的粪水。它们与大农业生产体系脱离,损失了宝贵的粪水资源,又对环境造成严重污染。这是国际上正在研究解决的严重环境和生态问题之一。它先期出现在发达国家,近期随着“菜篮子工程”计划的实施和外向性农牧业的发展,它危害许多城镇郊区的环境,同时成为阻碍养殖业继续稳定发展的重要因素之一,现在,猪场粪水的治理问题已列入中国机械化养猪协会急待解决的难题。由农业部成都沼气科     

高寒地区冬春茬番茄高效栽培技术

选择有代表性的高寒地区冬春茬番茄,从不同生长期总结冬春茬番茄高效栽培技术。     

荔浦芋“避雨栽培”预防芋疫病效果试验

芋疫病是荔浦芋的主要病害,它破坏绿叶面积,造成芋头烂叶或全叶枯死而影响产量。通过搭棚,构建"避雨栽培"环境,阻隔风雨对芋疫病病原物的传播,减轻该病的发生危害。结果表明,荔浦芋实行"避雨栽培"对芋疫病的发生危害具有明显的预防作用,且植株生长旺盛,茎粗叶大,能显著提高产量,为生产上预防该病的发生和危害提供参考。