牦牛TBC1D7基因克隆、生物信息学及表达分析

为探究西藏牦牛Tre2-Bub2-CDC16结构域家族成员7(TBC1D7)基因的特征及结构,利用RT-PCR克隆了TBC1D7基因的CDS区序列,并对其进行了生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测了TBC1D7基因在牦牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉及脂肪组织的表达水平。结果表明,牦牛TBC1D7基因的CDS区全长为882 bp,共编码293个氨基酸;系统进化树分析结果表明,西藏牦牛与野牦牛的亲缘关系最近,与兔的最远;生物信息学分析结果表明,牦牛TBC1D7蛋白不存在信号肽和跨膜结构,属于亲水性蛋白,主要存在细胞核中,且该蛋白具有24个潜在的磷酸化位点,蛋白的高级结构由α-螺旋（65.53%）、延伸连（3.75%）、β-转角（3.75%）和无规则卷曲（29.96%）构成。qPCR检测结果显示,TBC1D7基因在西藏牦牛脾脏组织中的表达最高,极显著高于其他组织（P <0.01）。     

国内外草莓生产现状与发展趋势

2012年,世界草莓的产量为726.9万t,栽培面积30万hm2,其中中国的产量占1/3。虽然中国的草莓产量最高,但在生产中也存在不少问题,如缺乏安全生产技术、品种退化严重、生产劳动强度大、新技术应用不够等。我国草莓发展的主要趋势为：安全生产是重中之重,培育脱毒大苗是实施高效生产的前提,提高内在品质是占领市场的基础,转变栽培模式,提高生产效率是增加效益的保障,新品种、新模式将带领草莓产业新发展。     

牦牛FASN基因多态性及其与肉质性状的相关性研究

利用PCR-SSCP技术,对甘南牦牛、大通牦牛和天祝白牦牛的FASN基因第3内含子进行SNPs筛选,并将筛选到的突变位点与牦牛部分肉质性状进行相关性分析.结果发现,3个牦牛群体在第3内含子检测到g.5477 C→T的突变,由此产生3种基因型：HH、HG、GG.相关性分析表明,HH基因型和HG基因型个体的脂肪含量显著高于GG基因型个体（P＜0.05）.HH、HG、GG 3种基因型对失水率、熟肉率、pH24值和剪切力的影响差异不显著（P＞0.05）.     

单头肿腿蜂DNA提取方法及多个基因片段PCR反应体系建立

[目的]采用分子生物学技术研究肿腿蜂类天敌昆虫近缘种关系。[方法]利用SDS法和试剂盒法2种方法对8种肿腿蜂的单头个体进行基因组DNA提取。[结果]琼脂糖凝胶电泳结果表明,试剂盒法提取的单头肿腿蜂基因组DNA虽成本较高,但提取总量大、提取成功率高、单位浓度高。且利用试剂盒法提取的基因组DNA进行多个基因片段PCR扩增,均得到正确的扩增产物。[结论]该研究为进一步分析肿腿蜂种类及遗传进化关系奠定基础。     

日粮不同营养水平对牦牛生产性能、屠宰指标和血清生化指标的影响

本试验旨在研究日粮营养水平对牦牛生产性能、屠宰指标和血清生化指标的影响。选择年龄、体重接近的健康公牦牛60头,平均体重（269.75±35.46）kg,随机分成3组,每组20个重复,每个重复1头牛。根据饲粮营养水平分为高营养水平组（HN）、中营养水平组（MN）、低营养水平组（LN）。试验周期105 d,预试期15 d,正试期90 d。正试期（90 d）饲粮的综合净能（NE_mf）分别为5.51、6.22、6.94 MJ·kg^-1,全试验期饲粮粗蛋白质水平各组均为16.98%,育肥试验结束时进行生产性能等指标的测定,每组随机选择8头牛颈静脉采血,迅速分离血清,测定血液生化指标,屠宰后测定每头牛的屠宰性能和肉品质。结果表明,日粮不同营养水平对牦牛平均日增重（ADG）的影响差异不显著（P>0.05）;随着日粮营养水平的增加,HN组血清中葡萄糖含量最高,与LN和MN组相比,分别增加了38.86%和29.69%（P<0.05）。MN组血清中尿素含量最低,较LN组降低了34.31%（P<0.05）,与HN组相比差异不显著。血清中总蛋白的含量随着能量水平的增加而降低（P<0.05）。总胆固醇LN组含量最低,较MN组降低了10.98%。随着能量水平的提高,HN组牦牛的宰前活重、胴体重和眼肌面积极显著高于MN和LN组（P<0.01）;HN组屠宰率显著高于MN和LN组（P<0.05）;肉色L^*值LN组最低（P<0.05）,较MN和HN组分别降低了17.84%和25.65%。能量水平对失水率和蒸煮损失无显著影响（P>0.05）。在本试验条件下,增加饲粮能量对提高舍饲牦牛生长性能和肉品质是可行的,综合生长性能、屠宰性能、肉品质和血清生化指标得出,饲粮综合净能水平在6.94 MJ·kg^-1时的饲粮营养水平是比较适于冷季舍饲育肥牦牛提供优质牦牛肉所需的营养水平。     

管氏肿腿蜂生物防治研究进展

重点阐述了管氏肿腿蜂人工繁殖的寄主及其在生物防治中的应用研究,并提出未来研究展望,可为管氏肿腿蜂的研究及在生物防治领域的应用提供参考。     

蹄氟对环境氟污染的监测与地方性氟病的早期诊断价值

本文对工业氟重污染区放牧的25只山羊、人工投氟的6头毛驴、地方性高氟区的38头黄牛及12匹马的蹄、骨氟进行了相关与回归分析。相关系数分别为0.7568(羊)、0.9910(实验驴)、0.6615(牛)及0.7928(马)。以上结果指出,测定蹄氟是及时监测环境氟污染与早期诊断地方性氟病的一种比较理想的方法。     

牦牛PRKAG3基因部分序列多态性分析

采用PCR-SSCP技术,对甘南牦牛、大通牦牛和天祝白牦牛的PRKAG3基因第3、第9内含子的多态性进行检测.结果表明,牦牛PRKAG3基因在第3、第9内含子中均存在多态位点,2个位点分别存在AA、AB和EE、EF基因型.其中,A和E为优势等位基因,2个位点在3个牦牛群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态.独立性检验结果表明,在1806 bp处天祝白牦牛与甘南牦牛之间差异显著(P＜0.05),大通牦牛与甘南牦牛、天祝白牦牛之间差异不显著(P＞0.05);在4487 bp处大通牦牛和天祝白牦牛、甘南牦牛之间差异极显著(P＜0.01),天祝白牦牛与甘南牦牛之间差异不显著(P＞0.05).     

家畜胚胎干细胞研究进展及应用前景

胚胎干细胞是未分化的多能干细胞,具有无限增殖和分化的潜力,这些特性使之成为目前胚胎学、细胞学、分子生物学及各种生物技术研究的主要内容。现从胚胎干细胞研究的主要家畜类型和应用前景等方面对胚胎干细胞的研究进展做一综述。     

肃南牦牛群体遗传结构、选择信号分析和ROH检测

【目的】试验旨在对肃南牦牛进行群体遗传结构、选择信号分析和连续纯合片段(ROH)检测,挖掘肃南牦牛的种质特性相关基因。【方法】选择肃南牦牛、巴州牦牛、斯布牦牛、九龙牦牛和天祝白牦牛5个牦牛品种共计48头牦牛进行全基因组重测序,采用基因组变异检测流程(GATK)获得高质量的单核苷酸多态性(SNP)标记进行下游分析;对5个牦牛品种的基因型数据进行主成分分析、祖先成分分析和系统进化树分析以确定其群体结构;对5个牦牛群体进行ROH检测以及近交系数计算;采用综合单倍型评分(iHS)方法筛选共有高频ROH区域内受选择位点。【结果】5个牦牛品种共鉴定出15 092 883个SNPs,主要分布于内含子区域。亲缘关系计算结果显示,所有个体均不存在三代以内亲缘关系,满足后续分析要求。主成分分析表明,5个牦牛品种可以显著地分为5个类群,其中肃南牦牛群体内遗传变异较小。群体结构分析显示,肃南牦牛包含其他4种牦牛祖先成分,其中天祝白牦牛祖先成分所占的比例最大。ROH分析显示,5个牦牛品种共检测到8 426个ROHs片段,其中高频ROH区域421个。相比于其他4个牦牛品种,肃南牦牛的ROH片段总长度和数目最多,具有较高的连锁程度,其近交系数远大于其他牦牛群体。在肃南牦牛高频ROH区域上注释得到465个候选基因,主要富集到与机体发育、大脑形态形成、脂肪氧化相关的通路,包括胚胎骨骼系统形态发生、前后模式规范、甲状腺发育通路和Hippo通路,其中与胚胎发育及组织分化过程相关的基因有同源框A3(HOXA3)、HOXA5、HOXD3,与肉品质相关的基因有花生四烯酸12B (ALOX12B)、ALOX15B、ALOXE3,与中脑发育相关的基因为成纤维细胞生长因子8(FGF8)。在7号染色体1个高频ROH区域中(Chr7:12 661 870-13 045 935)鉴定到3个共享基因(核内不均一性核糖核蛋白K (HNRNPK)、驱动蛋白27(KIF27)、G激酶锚定蛋白1(GKAP1))与牦牛共有的高原适应性有关。对共有高频ROH区域内的位点进行iHS分析,鉴定到的受选择基因主要与抗病性、内质网分泌蛋白加工及细胞周期调节相关,包括N-α乙酰转移酶25(NAA25)、内质网分子伴侣29(ERP29)、跨膜蛋白16(TMEM116)、TRAF型锌指结构域蛋白1(TRAFD1)、HECT结构域E3泛素连接酶4(HECTD4)基因。【结论】本研究从全基因组水平系统评估肃南牦牛的遗传多样性和遗传背景,鉴定了肃南牦牛ROH区域内与表型相关的基因,并重点挖掘了与其他牦牛品种共享高频ROH区域内的受选择基因,为肃南牦牛种质资源开发、利用提供了重要理论依据。