EGF和FGF-2对猪皮下脂肪神经嵴干细胞增殖和分化的影响

【目的】探究表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）和成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor 2，FGF-2）对猪皮下脂肪神经嵴干细胞（neural crest stem cells，NCSCs）增殖及分化的影响，以优化猪皮下脂肪神经嵴干细胞的培养条件。【方法】通过体外分离培养原代猪皮下脂肪NCSCs，免疫荧光染色鉴定NCSCs标志物p75 NTR，并用不同浓度的EGF和FGF-2（0和0、10和10、10和20、20和10、20和20、30和30 ng/mL）作用于传代猪皮下脂肪NCSCs，用CCK-8试剂盒测定细胞增殖率，确定细胞生长的最适EGF和FGF-2浓度，将试验分为空白组和最适浓度组，测定两组细胞的生长曲线，成脂化诱导后油红O染色，对比两组细胞的脂滴生成量。【结果】免疫荧光染色结果显示，原代猪皮下脂肪NCSCs经p75 NTR鉴定呈阳性。CCK-8细胞增殖试验结果显示，EGF和FGF-2的浓度均为20 ng/mL时对传代猪皮下脂肪NCSCs的促增殖作用最佳。生长曲线显示，两组细胞均在第5~9天处于对数生长期，第10~15天细胞增殖减缓，逐渐到达停滞期。油红O染色结果显示，最适浓度组胞质内的脂滴生成量远多于对照组。【结论】在培养液中添加20 ng/mL EGF和20 ng/mL FGF-2对猪皮下脂肪NCSCs的增殖和分化有促进作用。