用SRAP标记构建松树良种指纹图谱方法的研究

利用相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记对三种松树各16个样本进行检测,旨在构建三个树种的指纹图谱,为松树品种鉴定提供依据。采用5个引物组合对样本进行了SRAP扩增,在湿加松、火加松和马尾松上分别检测到46、53和44个多态性位点,平均每对引物多态性位点分别为9.2、10.6和8.6个。根据扩增产物的电泳条带进行赋值,把SRAP图谱转换为由1和0组成的数字指纹图谱,仅用2个或3个引物组合就可以把同一树种的不同单株完全鉴别出来,为松树优良品系的鉴定提供了一种可行的方法。     

桉树微芽繁殖有效芽长度与继代周期的选择

以速生桉树品系为材料,比较研究了继代培养过程中不同长度有效芽的增殖率和扩繁效果,结果表明无性系GU1和DH33-9采用1～3 mm的有效芽,分别以21 d和28 d为继代周期进行培养,可以获得较高的增殖率和扩繁速度.采用小规格的有效芽继代扩繁能够充分利用材料,节约生产成本,提高桉树微芽繁殖体系建立初期的生产效率,使优良无性系的生产量迅速满足生产推广的需求,但适合小芽扩繁培养的生产技术还需要进一步探讨.     

诃子果核处理对发芽的影响试验

采用不同方法处理诃子果核并作发芽试验,结果表明:去内果皮种子的发芽效果最好,其室内发芽率达到82.4%,平均发芽时间为4.6d,发芽历时10d,发芽盛期为第4d;苗圃发芽率为59.2%,平均发芽时间为9.7d,发芽历时30d,发芽盛期为第7d;而带内果皮的各种处理方法的发芽效果均不理想。本文还对诃子去内果皮技术和芽苗移植技术进行探讨。     

火炬松生长和松脂性状相关候选基因的单核苷酸多样性分析

【目的】对火炬松Pinus taeda生长和松脂产量相关功能基因单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）位点进行筛选与分析,为分子标记辅助育种提供技术基础。【方法】利用生物信息学对火炬松cDNA文库进行整理、比对、剪接、注释,挑选出与生长素、赤霉素、细胞分裂素及蒎烯合成相关的非重复序列基因（Unigene）作为候选基因片段,利用MEGA5.0和DnaSP4.0软件对火炬松36个单株的8个候选基因片段进行序列比对和分析。【结果】 所测序列总长为5 177 bp,检测到184个SNP位点,平均36.9 bp的基因序列中出现1个SNP位点,其中123个为非同义突变、61个为同义突变SNP位点。核苷酸多态性π_a和θ_w分别为0.020和0.016。对8个候选基因片段内SNP位点进行的连锁不平衡分析显示,随着核苷酸序列长度的延伸,SNP位点的连锁不平衡在基因内部迅速衰退（R²≤0.2）。【结论】在火炬松中,基于候选基因内SNP位点间的连锁不平衡作图是可行的。     

杂种松SRAP-PCR反应体系的优化

通过单因素试验,对杂种松SRAP-PCR反应体系的各主要影响因子（Mg^2＋浓度、dNTP浓度、引物浓度以及Taq DNA聚合酶用量）进行了优化筛选,最终得出杂种松SRAP-PCR反应的最佳体系为：25μL体系中含有Mg^2＋2.0 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、Taq酶1.0 U,引物0.4μmol/L,模板DNA 30-50 ng以及1%体积的DMSO。采用该优化体系,对两种杂种松（火加松、湿加松）基因组DNA进行SRAP扩增,表明大部分引物对扩增出来的带清晰可辨、背景较少,完全满足分子标记的要求,为杂种松SRAP标记的相关研究奠定了基础。     

麻风树EST-SSR的筛选和分析

[目的]开发麻风树EST-SSR标记,为遗传多样性分析、种质资源鉴定等研究提供理论依据。[方法]以麻风树EST序列为材料,运用CAP3软件对EST序列进行组装后,再运用SSRIT软件进行EST-SSR标记的预测。[结果]麻风树13193条EST序列经组装后获得6281个UniGene,其中1367个Contig,4914个Singleton。利用SSRIT在线软件对UniGene分析得到206条EST-SSR。拼接后的Unigene含有SSR位点的频率为3.28%,麻风树EST-SSR的发生频率为1/29kb。这些EST重复基元中,三核苷酸重复和二核苷酸重复最多,分别占24.76%和21.84%;五、六核苷酸重复次之,分别占16.50%、20.39%;单、四核苷酸的重复基序最少,分别占9.71%和6.80%。在所有的核苷酸重复基序中,二核苷酸重复序列AG所占比例最高,约占12.62%;三核苷酸重复序列中,所占比例最高的是AAT和AAG,各占6.80%、6.31%。[结论]上述结果对于开展麻风树分子辅助育种研究具有一定的指导意义。     

林学实验教学模式的探索与实践

分析传统验证性实验教学中存在的问题和不足,对实验教学模式的设置进行探索,并对其实践效果进行评价,最后提出:将实验课从理论教学课程中分离出来、设置综合性实验和"一体化"实验、形成独立的实践课程、以科研项目为龙头带动实验教学等建议。     

林木生物技术实验课程教学改革初探

分析了林木生物技术传统验证性实验教学存在的问题和不足,就林木生物技术综合性实验的必要性、实验教学方案、实施效果等方面进行了探讨,结果表明:综合性实验能充分调动学生的学习积极性,有效提高实习课程的教学质量,并有利于培养学生的综合分析能力、创新意识、合作精神和集体主义精神。     

基于SSR对火炬松×加勒比松杂种形质性状的QLT定位分析

对火炬松×加勒比松杂种部分形质性状的QTL进行定位分析,为杂种育种和株型培育提供借鉴。以火炬松1.5代种子园优良单株T1为母本,加勒比松第一代种子园优良单株C1为父本,杂交产生F₁代113个单株。使用JoinMap? 3.0作图软件构建火炬松母本和加勒比松父本的SSR 标记遗传图谱,并用MapQTL4.0^?作图软件对形质性状的QTL进行定位。火炬松母本图谱总长度293.9 cM,标记间距范围为3.7~ 47.9 cM,标记平均间距15.5 cM。加勒比松父本图谱总长度245.5 cM,标记间距范围为6.8~ 49.8 cM,标记平均间距13.6 cM。检测到4个与形质性状有关的QTL位点,其中有2个QTL定位于火炬松染色体LG4上。4个形质性状的QTLs解释方差为8.6%～13.6%,可以利用这些QTLs进行特定株型的培育,如分枝角度的控制培育。     

火炬松种子园无性系花粉产量变异研究

为探讨火炬松(Pinus taeda)无性系花粉产量的变异,在火炬松1.5代种子园选出20个无性系,每无性系5株,共100株火炬松作为研究材料,调查胸径、树高、冠幅和花粉量,通过对比单株花粉量、单位面积花粉量和单位面积有效花粉量来筛选高花粉产量的无性系.结果表明,单株花粉量与冠幅呈显著正相关(P<0.05),单株花粉量最高的是243无性系,为1302.55 g;单位面积花粉产量最高的是201无性系,为36.70 g/m2;单位面积有效花粉量最高的是243无性系,为34.14 g/m2;花粉活力最大的是298无性系,为100%.火炬松种子园的花粉产量变异主要来源于无性系间,最终筛选出243、201和298无性系3个优良无性系.