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41.
应用三重聚合酶链反应同时检测鉴别鸡3种病毒性呼吸道传染病的研究 总被引:18,自引:1,他引:17
根据鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)和鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的基因文库,设计了3对分别与NDV、IBV和ILTV某段基因序列互补的引物。用这3对引物对同一样品中的NDV、IBV、ILTV核酸模板进行三重PCR扩增,结果均同时得到了3条与设计相符的310bp(NDV)、1720bp(IBV)和647bp(ILTV)三重PCR扩增带,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该三重PCR技术能检出10pg的IBV、1pg的NDV RNA模板和10pg的ILTV DNA模板。 相似文献
42.
应用多重PCR检测人工感染鸡呼吸道疾病的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文报道了IBV,NDV,ILTV,MG人工感染4周龄SPF鸡和非免疫鸡后,用多重PCR检测试验鸡的咽喉棉拭子和器官组织样品,并与传统的病原分离鉴定,血清学方法进行比较,多重PCR无论是对单一感染病原,还是对两种以上混合感染病原,其敏感性和检测速度都优于传统的鉴别诊断方法,具有较高的实用价值,可以直接应用于临床检测,服务于生产。 相似文献
43.
44.
百毒杀稀释至含有效成份5ppm时能迅速杀灭大肠杆菌、巴氏杆菌、溶血性链球菌、金色葡萄球菌和沙门氏菌,10ppm时能有效杀灭绿脓杆菌,25ppm时能快速杀灭鸭肝炎病毒,100ppm时能灭活新城疫强毒,消毒效果迅速而显著。 相似文献
45.
46.
20%铝胶生理盐水稀释B_(26)—T_(1200)禽霍乱弱毒冻干菌,在?7℃的环境中,活菌死亡最迅速,放置6小时4/4组苗菌存率(活菌数)都下降到30.3%~13.6%之间,12小时4/4组苗菌存率都低于10%,24小时菌存率4/4组都已低于1%。22℃温度中,活菌减少速度有所减慢,放置6小时4/4组菌存率都在56.5%~88.1%之间,12小时4/4组菌存率都低于40%,24小时4/4组菌存率都低于13.7%。4℃冰箱放置菌液,活菌死亡速度相对最慢,6小时4/4组菌存率都高于82.5%,24小时4/4组菌存率仍在51.4%~75.3%之间。活菌存活率取决于菌液保存温度和时间。 相似文献
47.
某鸡场一群26周龄。未免疫过EDS疫苗本地三黄鸡种鸡,发生一种短期内产蛋量突然急剧下降,并伴有大量软壳蛋和畸形蛋为主要特征的疾病,经临床观察和实验室检查,综合判定该鸡群流行的疫病为产蛋下降综合症。 相似文献
48.
应用一步法反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测禽呼肠孤病毒(ARV)在人工感染SPF雏鸡体内的动态分布情况。结果3日龄感染ARVS1133毒株后,12h就可以从关节、肝、脾等组织中检出病毒的RNA,感染后3—7天为检出的高峰期,至感染后27天还可从附关节组织检测到:在11种不同绀织中.均不同程度地检测到病原的核酸,其中以关节组织检出率最高(80.9%),其次为肝(67.6%)、脾(55.9%)、肾(50.0%),肛门棉拭子的检出率最低(13.2%),显示了ARV在感染机体内的动态分布情况。 相似文献
49.
【目的】建立一种鉴别I群禽腺病毒(FAVI)灭活苗免疫和野毒感染的检测方法,为FAVI的防控与净化提供技术支撑。【方法】以FAVI 33K重组蛋白为包被抗原,筛选和优化间接ELISA的条件,建立FAVI抗体的间接33K-ELISA检测方法,检验其特异性、敏感性和重复性,并鉴别检测FAVI活病毒感染血清和灭活苗免疫血清各50份。【结果】33K重组抗原最佳包被浓度6.0 μg/mL,包被条件为37℃孵育1 h后4℃过夜,最佳封闭液为5%脱脂奶,封闭时间1.0 h;待检血清稀释度1∶100,抗原抗体最佳作用时间1.0 h;酶标二抗最佳稀释度1∶3000,作用时间45 min。优化后的间接33K-ELISA的阴、阳性临界值为0.316。其特异性、敏感性、重复性试验及鉴别检测结果表明,优化后的间接33K-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,且能成功鉴别FAVI感染与灭活疫苗接种。【结论】间接33K-ELISA操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、适于批量检测,可有效鉴别FAVI感染和灭活苗免疫接种,利于挑选出FAVI感染动物,为FAVI的防控与净化提供了新思路和新方法。 相似文献
50.
[目的]建立贝类折光马尔太虫荧光定量PCR检测方法。[方法]根据基因库中折光马尔太虫的基因保守序列,设计合成了一对引物和一条TaqMan探针,建立检测折光马尔太虫的荧光定量PCR方法,将建立的荧光定量PCR检测方法与常规PCR检测对比。[结果]所建立的荧光定量PCR方法灵敏度可达40个拷贝/μl,比常规PCR灵敏度高100倍,对派琴虫、单孢子虫、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、河弧菌和拟态弧菌等病原体的检测结果为阴性。[结论]研究建立的折光马尔太虫荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床上折光马尔太虫感染的检测。 相似文献