外源水杨酸诱导的部分甜瓜自毒作用相关基因的表达分析

以甜瓜(Cucumis melo)品种‘新银辉’为材料,采取根灌法,以水杨酸(10μmol/L)处理甜瓜幼苗,通过Real-Time PCR对叶片中部分自毒作用相关基因的表达量进行定量分析,以探究外源水杨酸诱导对甜瓜自毒作用的影响。结果显示,经外源水杨酸诱导后:(1)在催化苯丙烷类代谢途径的3个初始反应的蛋白酶编码基因中,PAL和C4H随处理后时间增加,呈逐渐上调趋势,但PAL比C4H更快响应胁迫,而4CL转录水平没有显著变化;(2)在类黄酮生物合成的3个关键酶的基因中,CHI、F3H均显示出不同程度的下调,CHS于处理后1 d略微上调,然后恢复至处理前水平;(3)两个转录因子基因WD40、R2R3-MYB分别在不同处理时间后显著下调;(4)WD40与CHI的表达相关性较高。据上述结果 ,水杨酸诱导后:(Ⅰ)CHI表达可能与转录因子WD40蛋白相关;(Ⅱ)WD40、R2R3-MYB与PAL、C4H、4CL、CHS间不存在简单、明确的调控关系;(Ⅲ)柚皮苷、表儿茶素、芦丁等甜瓜主要化感物质合成减少。     

应用SSR标记鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度

为建立一套高效、准确、成本低的室内流星翡翠杂交种种子纯度检测技术体系,以甜瓜杂交种流星翡翠及其亲本为材料,通过124对简单重复序列标记(SSR标记)引物筛选出流星翡翠及其父母本材料间多态性引物共3对,分别为GCM90、GCM92和GCM119。利用这3对多态性标记引物进行甜瓜杂交种种子纯度的快速鉴定,鉴定结果为99.65%,表明本研究筛选的3对SSR标记可以快速鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度。     

大棚樱桃番茄-甜瓜轮作栽培模式

为了充分利用大棚资源,经过多年的探索实践,总结出台州地区大棚樱桃番茄、甜瓜栽培模式。本文从品种选择、播种育苗、田间管理、病虫防治等方面介绍大棚樱桃番茄和甜瓜的栽培技术,以及2种作物的茬口安排,为该模式的推广提供科学依据。     

甜瓜种皮颜色控制基因CmSC1的精细定位及候选基因分析

【目的】通过对甜瓜种皮颜色进行遗传分析及基因精细定位,并推测其候选基因和开发特异分子标记,为下一步该基因的功能研究及合理利用奠定基础。【方法】利用白色种皮材料HP22和黄色种皮材料B8、B150分别配制杂交组合,获得后代遗传分离群体并进行种皮颜色的表型调查及遗传分析,通过基因图位克隆方法完成基因的精细定位。通过对定位区间内注释基因进行编码区序列和功能分析确定关键候选目的基因。【结果】甜瓜白色种皮对黄色种皮为显性,由单显性基因CmSC1控制并表现延迟遗传效应。利用368个黄色种皮F₂单株最终将CmSC1精细定位于第5号染色体分子标记S27和S28之间物理距离约95 kb区间内,共包含12个注释基因。其中一个为拟南芥AtTT8同源的编码bHLH转录因子蛋白的MELO3C014406,经序列变异位点分析,黄色种皮材料B8和B150分别在该基因ATG下游第47位碱基处插入碱基A以及在第260位碱基处缺失14 bp导致翻译蛋白提前终止,致使后面功能结构域完全缺失,进而通过开发特异分子标记YS及序列分析,发现65份黄色种皮材料均发生这两种突变形式中的一种,推测MELO3C014406即为控制种皮颜色CmSC1的目的基因。【结论】本研究将控制种皮颜色的CmSC1精细定位于第5染色体95 kb区间内,推测MELO3C014406为最终目的基因,并开发了特异分子标记YS。     

瓜类褪绿黄化病毒及其系统进化分析

【目的】检测新疆南疆7个县/市瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus, CCYV),进行系统发育分析,为新疆南疆CCYV预警和防控提供参考。【方法】于2019年,从中国新疆南疆7个县/市采集带有黄化特征的51份甜瓜叶片样品,RT-PCR进行CCYV的检测,进行特异性片段的克隆、测序和系统发育分析。【结果】中国新疆巴楚县、阿克苏市、莎车县、伽师县、疏勒县、疏附县均未检测到CCYV,而洛浦县的13份样本中,8份检出为CCYV阳性,检出率为61.53%,洛浦县CCYV特异性片段克隆测序获得了685 bp的核酸序列,与GenBank中的CCYV分离物外壳蛋白(Coat protein, CP)的一致性达到100%。所得序列与中国新疆(吐鲁番)、中国其他省、苏丹、日本、塞浦路斯、黎巴嫩的CP基因聚在I组(Group),沙特阿拉伯的分离物聚在Ⅱ组,伊朗的分离物聚在Ⅲ组。【结论】CCYV在中国新疆南疆洛浦县甜瓜产区发生,与中国新疆吐鲁番、中国其他省及周围国家的CCYV分离物亲缘关系很近,且群体遗传变异很小。     

‘珍珠蜜’网纹甜瓜优质栽培技术探讨

‘珍珠蜜’网纹甜瓜是当前我国的高档优质果品,以其果大肉厚、耐贮运及独特的风味,深受人们喜爱。近年来,在北京、上海等大中城市十分畅销,产值极高。开展合理栽培对提高‘珍珠蜜’网纹甜瓜的产量、改善品质、降低成本、提高市场竞争力、促进主产区的经济发展、增加农民收入等具有十分重要的意义。     

介绍三个杂交一代薄皮甜瓜

我国厚皮甜瓜早已实现杂种化,而薄皮甜瓜杂交种市场占有率不到5％,各地销售的“杂交一代”、“一代交配”薄皮甜瓜品种,95％以上都是常规品种,严重影响薄皮甜瓜生产。针对我国薄皮甜瓜缺乏优良杂交一代品种的状况,吉林省长春市一间堡蜜世界甜瓜研究所与吉林省公主岭市绿野农业技术开发研究所合作,用13年时间选育出真美丽等杂交一代薄皮甜瓜新品种,近几年在山东、辽宁、内蒙古、河北、天津、山西、陕西、河南等地大面积生产推广,迅速取代当地主栽品种。现介绍如下。     

薄皮甜瓜子叶组织培养的研究

以薄皮甜瓜品种“懒瓜王”子叶为材料,设置了15种激素组合的诱导芽分化培养基,进行了甜瓜子叶外植体诱导生芽试验和生根试验。结果表明,BA是甜瓜再生分化的关键物质,以BA浓度为4 .0mg/L(毫克/升)时,最有利于子叶外植体的分化生芽,在MS BA4 .0mg/L IAA0 .3mg/L(毫克/升)培养基中,甜瓜子叶的诱导生芽率高达93.75 %。不定芽经过伸长和生根获得了再生植株。同时又对子叶进行了横纵切的对照试验,以及芽的着生位置和形态的观察与研究。     

甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65μmol·L^-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7。实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测。     

分子标记辅助离体叶片接种鉴定甜瓜蔓枯病极端抗感单株

为了构建抗感基因池,快速准确筛选抗感单株,进行抗蔓枯病基因的精细定位,加速育种进程,采用分子标记辅助离体叶片接种鉴定,筛选极端抗感单株。研究结果表明,利用甜瓜F_2群体的96株植株,接种5 d后快速准确筛选到抗感单株分别为17株和15株,抗感植株的离体叶片接种鉴定与分子标记筛选的相关系数分别达0.85和0.68。