180日龄文昌鸡和隐性白羽克洛鸡基因结构及SNP分析

采用生物信息学的方法对180日龄文昌鸡和隐性白羽克洛鸡RNA-Seq的94 614 632的Clean Reads进行了单核苷酸多态性(SNP)的查找、可变剪接筛查、基因结构优化和新转录本预测。结果共得到可靠的SNP位点220 308个,可变剪接56 119个,优化了21 633个基因,预测到1 235个新转录本。本研究结果能够进一步完善鸡基因组注释情况并丰富鸡SNP数据库和可变剪切数据库。     

31～80日龄文昌鸡日粮蛋白质适宜需要量研究

为了研究文昌鸡日粮蛋白质的适宜需要量。选取31日龄健康文昌鸡母鸡180只,随机分为4个处理组,每个处理3个重复,每个重复15只。日粮粗蛋白质水平分别设为16.02%(试验Ⅰ组)、17.05%(试验Ⅱ组)、18.01%(试验Ⅲ组)和19.01%(试验Ⅳ组),试验期50 d。结果提示:(1)试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组日增重均显著高于试验Ⅰ组(P<0.05),而料重比都显著低于试验Ⅰ组(P<0.05);(2)试验Ⅱ组能量表观利用率显著高于试验Ⅰ组(P<0.05),而与试验Ⅲ、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05);(3)试验Ⅱ组蛋白质表观利用率高于其他组(P>0.05)。分析表明,本试验条件下,31～80日龄文昌鸡日粮适宜粗蛋白质水平为17.05%。     

鸡柔嫩艾美耳球虫HN株3-1E基因的原核表达与鉴定

根据已报道的柔嫩艾美耳球虫3-1E基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到1条特异片段,将扩增产物克隆至p MD-18T载体,转化感受态菌JM109,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与已发表的国内外相关虫株的3-1E基因序列比较,核苷酸的同源性均在99.2%~99.8%,氨基酸的同源性均在98.2%~100%。然后将重组质粒和表达载体p GEX-4T-1分别用Xho I和EcoR I酶切后构建重组表达载体p GEX-3-1E,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测显示,3-1E基因在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白的分子量为44.7 ku,诱导表达5 h的蛋白表达量可达到30%以上。     

日粮蛋白质水平对0-4周龄海南肉鹅生产性能的影响

本文旨在研究不同日粮蛋白质水平（18％、19％、20％）对0—4周龄海南肉鹅生产性能的影响。选用144只1日龄海南肉鹅，随机分为3个处理组，每个处理组设4个重复，每重复12只鹅。结果表明，18％、19％、20％蛋白质水平日粮对0～4周龄海南肉鹅生产性能的影响未达到显著差异的水平（P〉0．05），而对胸肌率的影响达到了显著差异的水平（P〈0．05）。综合认为，0～4周龄海南肉鹅在日粮能量水平为11．5MJ／kg时，蛋白质水平为20％能使其获得最快的生长速度。     

鸡球虫的药敏试验

试验检测了采自海南省文昌鸡主要养殖地区的7种艾美耳球虫对5种常用抗球虫药的敏感性。根据最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标进行综合判定。结果表明,海南省文昌鸡主要养殖地区的鸡球虫对血球净、球虫净及高效球虫药呈现完全抗药性,而其对百球清和拉沙利药物没有产生抗药性,提示目前在海南省文昌鸡主要养殖地区应交替使用百球清和拉沙利药物,慎用或停用血球净、球虫净及高效球虫药。     

不同鹅品种(系)生长曲线分析

为了研究定安鹅及其杂交后代的生长规律,为其提供更科学的饲养方案,以满足其各阶段不同生长发育需要,发挥最大生产性能,试验选取定安鹅、浙定F1代(浙东白鹅♂×定安鹅♀)、阳定F1代(阳春鹅♂×定安鹅♀)公母鹅各50只,相同饲养管理条件下分别测定其每周体重,并采用Gompertz非线性生长模型对其生长发育曲线进行拟合。结果表明:定安鹅及其杂交后代生长发育曲线与Gompertz模型拟合良好,拟合度在0.99以上;定安鹅与浙东白鹅及阳春鹅的杂交后代生长性能较定安鹅均有较大提升,生长周期也明显缩短。说明用Gompertz模型进行定安鹅及其杂交后代生长发育曲线拟合可作为研究其生长发育规律的参考。     

嘉积鸭生长性能的测定及相关分析

为了掌握嘉积鸭的生长特点和肉用特性,更好地对嘉积鸭进行开发和利用,试验选择90日龄嘉积鸭30只(公、母鸭各半),测定了体重、体尺和屠宰性能指标,并进行了相关性分析。结果表明:嘉积鸭公鸭活体重极显著高于母鸭(P0.01),公鸭体尺性状明显高于母鸭。嘉积鸭母鸭主要屠宰性能指标(如屠体重、全净膛重、半净膛重)与体尺指标中的龙骨长、骨盆宽和胫长相关性较强;公鸭主要屠宰性能指标(如屠体重、全净膛重、半净膛重)与体尺指标中的胸深、骨盆宽和胫围相关性较强。     

miR-21在鸭胚胎期胸肌发育中的功能研究

旨在通过研究鸭miR-21的分子特征、时空表达模式以及对鸭骨骼肌卫星细胞的增殖与分化的影响,为探索骨骼肌发育机制提供支撑。本研究选取180枚(98±5)g鸭蛋,相同条件孵化。从孵化第11天到第27天每天取3枚鸭蛋(分别表示为:E11、E12、E13……E26、E27),无菌状态下逐只采集鸭胚胸肌样品。E27时另取3只鸭胚逐只采集腿肌、心、肝、肾、肌胃、小肠、腹脂和皮脂。混合酶消化法和差速贴壁法分离和纯化骨骼肌卫星细胞,骨骼肌卫星细胞增殖、分化时期分别过表达和干扰miR-21表达,利用荧光定量、蛋白杂交、EdU检测及流式细胞术等检测miR-21对鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。qRT-PCR结果显示,miR-21的表达随着孵化时间的增加而增加,E19天时到达最高,然后逐渐降低;E27时,miR-21在肝中的表达量最高。在增殖的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,荧光定量PCR检测CDK2和CyclinD1基因的mRNA表达量分别显著(P<0.05)和极显著增加(P<0.01),EdU检测阳性细胞数目显著增加(P<0.05),流式细胞仪检测发现G2期细胞数目极显著降低(P<0.01)、S期细胞数量显著增加(P<0.05)。在增殖的骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21表达,所得结果相反。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,qRT-PCR检测MyoG和MyHC基因的mRNA表达量均极显著增加(P<0.01);蛋白杂交(WB)检测结果显示,MyoG蛋白表达显著增加(P<0.05),MyHC蛋白表达极显著增加(P<0.01)。免疫荧光检测发现,MyHC阳性细胞数和10核以上的肌管数都极显著增加(P<0.01)。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21的表达,所得结果相反。结果表明,miR-21具有促进成肌细胞鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的作用。     

鹅细小病毒HN株的分离鉴定及全基因组序列分析

为研究鹅细小病毒(GPV)基因遗传变异特征,采集海南某养鹅场疑似鹅细小病毒感染的病料,将其处理后接种番鸭胚成功分离到一株病毒,经PCR鉴定为鹅细小病毒,命名为HN株,并获得了其全基因组序列,将该序列与GenBank数据库中登录的16条鹅和番鸭细小病毒基因序列进行了比对分析。结果显示,该株病毒基因组全长为5 106bp,由ITR、NS、VP构成,其中ITR为444bp,NS1为1 844bp,VP1为2 199bp;HN株与SHFX1201株的NS1基因和VP1同源性最高,分别达到99.8%和99.7%,与番鸭细小病毒株FM的NS1基因同源性最低,为82.7%;与90-0215株VP1同源性最低,为80.1%。HN株的遗传进化树可以看出,GPV可以分成明显的2个基因亚群,HN株与鹅细小病毒匈牙利株(B)、欧洲疫苗株(VG32/1)和台湾株(82-0321V、82-0321、06-0329)均处在第I亚群,且与安徽分离株Y株以及SHFX1201株同源性最接近,番鸭源匈牙利株FM单独处于第Ⅱ亚群。本研究丰富了GPV的数据资料,为研究GPV分类地位以及遗传进化关系提供了依据,同时也为研究GPV流行趋势和疫苗的开发奠定了基础。     

粤黄“882”肉鸡的园林放养技术

近几年海南省的养禽业发展快,效益高。家禽饲养量和禽肉产量在建省前的1987年分别为2949万只和22442吨,到1994年已分别达10275万只和91500吨,创历史最高水平,其中发展最快,数量最多,效益最好的是园林放养粤黄“882”肉鸡。现将粤黄“882”肉鸡的园林放养技术简介如下。 一、场址选择 选择离村庄和交通要道稍远(1公里以上),地势高燥略倾斜,通风良好,利于排水,地下水源充足,水质干净的砂质或砂壤质土的林区或果