重组大肠杆菌不耐热肠毒素的表达及对小鼠胚胎稳定性的影响

为研究大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）对小鼠胚胎稳定性的影响,运用大肠杆菌表达系统制备了具有生物活性的重组大肠杆菌LT,用重组LT通过腹腔注射处理妊娠小鼠,分析了LT对小鼠胚胎稳定性的影响。首先采用PCR方法从产毒大肠杆菌菌株44815基因组中扩增LT的A、B亚基基因,将其插入到pET-20b（＋）原核表达载体pelB信号肽的下游,分别构建成LTA和LTB分泌型表达载体;将载体分别转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,在IPTG的诱导下进行表达,利用Ni-NTA琼脂糖凝胶从细菌周质释放液中提取和纯化重组LTA和LTB蛋白;利用细胞毒性试验检测重组蛋白的生物活性。然后用制备的重组LT注射妊娠6d的小鼠,连续注射3d后,统计小鼠的胚胎存活率。同时用ELISA方法检测小鼠血清中与胚胎稳定性密切相关的Th1型细胞因子（IFN-γ、IL-2）和Th2型细胞因子（IL-4、IL-10）及IL-β的表达水平。结果表明,采用分泌性表达策略实现了重组LT在大肠杆菌中的高效分泌表达,LTA和LTB的表达量分别达68、62mg/L。表达的重组LT具有明显的细胞毒性作用;用LT处理妊娠小鼠,胚胎的存活率为32%,明显低于对照组;小鼠血清中Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的含量明显高于对照组（P〈0.01）,分别为对照组的2、3倍。同时细胞因子IL-1β为对照组的2倍（P〈0.01）,而稳定胚胎发育的Th2型细胞因子IL-4、IL-10没有明显变化（P〉0.05）。据此推测,LT可能与大肠杆菌性肠炎引起妊娠家畜流产有关,LT对胚胎稳定性的影响除与LT的直接毒性有关外,可能还与LT介导的免疫调节异常有关。     

香瓜茄的养生保健价值分析

在广泛文献检索基础上,对香瓜茄的种属、成分、养生价值、代表性膳食和食用注意事项进行了概述,为全民养生保健提供科学资料。     

人身触电责任界定中易混淆的几个问题

近年来,随着改革的逐步深入,供电企业与社会各方面的关系日趋复杂,电力纠纷特别是人身触电伤害案件日渐增多。一些人身触电案件发生后,有些责任在法律上界定不清,分歧较大,给法院的正确判决、调解造成很大困难。     

四川召开2010情人节花礼推广研讨会

<正>本刊讯1月6日,四川时代花木职业学校在成都召开2010情人节花束、礼盒推广研讨会,80多名花店业者和花艺爱好者围绕"怎样做好情人节的宣传策划"、"如何把握情人节的谈单技巧     

介绍一种简易捕虫器

在用黑光灯诱杀昆虫的实践中,我们设置了一种简易捕虫器。用这种简易捕虫器在诱杀昆虫的同时,可以得到完整的昆虫标本,是一举两得的事情。一、简易捕虫器的结构简易捕虫器如图所示。圈用8号铁丝制成,将塑料布(或油毛毡)缝在圈上,即成漏斗。容虫器用铁皮制作,大小决定于捕获昆虫数量的多少,上下口径一致,形如铁桶。容虫器中装有分虫器,分虫器上的隔层用薄板制成,上面钻有小孔。最上一个格层小孔     

青海湖以北地区草原退化的主要原因及其治理措施

1自然概况 调查地系青海湖以北那仁草原上的青海省三角城种羊场，该场是农业部确定的国家级重点种畜场，是国家重点牧草种子建设项目“中旱生禾本科牧草种子繁育基地”，其气候、地理、草地资源状况等在青海湖以北地区具有广泛的代表性，地处青海湖北岸，     

禽呼肠孤病毒鸡源分离株的鉴定与人工感染试验

从临床患病鸡关节病料中分离到一株病毒，在电镜下观察到病毒粒子无囊膜，有双层衣壳，外衣壳直径约75nm，内核约50nm；分离病毒株对酸、热有较强的抵抗力，对乙醚不敏感；病毒感染鸡胚成纤维细胞上能产生以融合细胞为特征的CPE；爪垫接种1日龄雏鸡表现出明显的病毒性关节炎临床症状，并伴有吸收障碍型和坏死型的病理变化；血清中和交叉试验表明，该病毒分离株与国内的2株番鸭源呼肠孤病毒（YH和YB）分离株和国外S1133呈不同程度的交叉反应。通过对分离病毒株进行电镜观察、理化特性试验、病毒感染力测定、致病性试验、血清学试验，可以确定该分离病毒为禽呼肠孤病毒。     

乌骨绵羊和黑色素的研究进展

黑色素在生物体内起着重要的作用,本文从黑色素的分类、生物合成机制、分析方法、结构、理化性质和功能、分布、沉积等方面进行了阐述,并对新近在云南发现的乌骨绵羊乌质性状形成相关的黑色素的生成的基因进行了描述。     

血浆蛋白粉的特点及在断奶仔猪上的应用

作者从血浆蛋白粉的特点、分类、应用效果、作用机制、生物安全和适宜添加量等方面进行了阐述,并着重对血浆蛋白粉可能的作用机制从提供丰富免疫球蛋白、刺激生长激素分泌、改善消化系统功能等方面进行了探讨性的阐述,从而能进一步阐明血浆蛋白粉在断奶仔猪上的作用。希望能对血浆蛋白粉的进一步研究积累资料。