5个品种优质肉用绵羊的超数排卵与胚胎移植

为进一步提高不同优质肉用品种绵羊的超数排卵与胚胎移植效果,本实验采用4种不同的超排方案(CIDR+FSH减量、CIDR+FSH+PMSG、CIDR+FSH+PG、CIDR+FSH等量)对17只绵羊(杜伯、白萨福克、黑萨福克、德克塞尔、美利奴)进行超数排卵处理,选择体况良好的杂交羊87只做受体,并进行胚胎移植实验。结果表明:第1组(CIDR+FSH减量)和第2组(CIDR+FSH+PMSG)方案超排平均可用胚数分别为6.20、6.60枚,显著高于第3组(CIDR+FSH+PG)和第4组(CIDR+FSH等量)方案(P<0.05);白萨福克、德克塞尔、杜伯超排平均可用胚数分别为7.67、6.20枚和6.25枚,显著高于黑萨福克和美利奴(P<0.05)。供体羊全部发情,得到95枚可用胚胎;51只受体新鲜胚胎移植3个月后经B超检查38只受体怀孕,妊娠率74.5%,产羔率88.2%。因此,CIDR+FSH+PMSG是优质肉绵羊超数排卵方案的最佳组合。     

家畜繁殖技术进展及“九五”期间我国奶牛繁殖技术研究的主攻方向

繁殖技术的革新是加快动物繁殖速度、缩短世代间距、巩固和提高优良性状的遗传力，扩大优良品种覆盖面的必要手段，它可代替传统的以人工授精为主的繁殖方式，且不受时间和空间的限制，奶牛繁殖技术研究今后的主攻方向是进一步提高繁殖效率，增加经济效益。     

小鼠桑椹胚简易玻璃化冷冻技术再探讨

本试验继小鼠扩张囊胚玻璃化冷冻保存成功后，在室温（２５℃）下利用不同浓度的ＥＦＳ玻璃化溶液，对小鼠的桑椹胚简易玻璃化冷冻技术进行再探讨。结果是胚胎在１０％ＥＧ溶液中预先处理５分钟，再移入事先配置好含有ＥＦＳ３０的０．２５ｍｌ塑料细管中１分钟平衡后直接投入液氮中冷冻，解冻后获得的发育率最高（９４％）。冻胚移植后妊娠率和产仔率分别为５６％（９／１６）及４２％（４９／１１６）。与对照组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５）     

稀释液中添加维生素E对绵羊冷冻精液品质的影响

采用两步稀释法 ,在绵羊冷冻精液中添加维生素E ,精液稀释平衡后精子活率 ,试验组 (0 .6 35 )高于对照组(0 .5 75 ) ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而解冻后 ,试验组活率 (0 .4 35 )极显著高于对照组 (0 .36 5 ) (P <0 .0 1) ;精子顶体总异常率 ,试验组 (33.72 % )极显著低于对照组 (4 4 .35 % ) (P <0 .0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1.2 8% ,2 3.0 8%与 2 .6 8% ,2 8.96 %。添加维生素E可以降低冷冻对精子顶体的损害程度 ,提高精液品质。试验也证明在解冻后保存 1h内 ,精子活率呈现缓慢下降的趋势 ,但 1h后活率急剧下降 ,因而 ,绵羊冻精颗粒解冻后应在 1h内输精完毕     

对羔羊采用激素诱导的方法生产体外胚胎的研究进展

外源促性腺激素处理幼龄母畜可诱导其卵泡大量发育,并与活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精技术相结合来生产早期胚胎,经移植后可产出后代,这项技术主要应用在犊牛或羔羊上。本文就生产羔羊体外胚胎过程中供体的选择、激素诱导的方法、卵母细胞采集的方式及体外发育培养的条件等进行了综述,并对影响羔羊胚胎生产的因素及存在的问题进行了分析。     

电脉冲与化学激活联合处理对猪卵母细胞孤雌发育的影响

探讨了猪卵母细胞电激活后间隔不同时间用化学药物处理对猪卵母细胞孤雌发育的影响。结果表明 :1)电激活后间隔 0 ,3,4 ,5和 6h再分别用 6 二甲基氨基嘌呤 ( 6 Dimethylaminopurine ,6 DMAP)、放线菌酮 (cyclohex imide ,CHX)处理 6h ,各组卵裂率、囊胚细胞数差异不显著 (P >0 0 5 ) ,但在 6 DMAP组中对照组囊胚率极显著高于其余各组 (P <0 0 1) ,在CHX组中对照组囊胚率极显著高于间隔 5和 6h组 (P <0 0 1) ,而其余各组之间差异不显著 (P >0 0 5 ) ;2 )电激活后间隔 4h再分别用 6 DMAP ,CHX和细胞松弛素B(CytochalasinB ,CB) + 6 DMAP处理 6h ,各组卵裂率差异不显著 (P >0 0 5 ) ,对照组囊胚率极显著高于其余各组 (P <0 0 1) ,其余各组囊胚率显著性均无差异 (P >0 0 5 )。对照组中无单倍体囊胚 ,二倍体囊胚为 88 2 4 % ,但 6 DMAP ,CHX ,CB + 6 DMAP中产生的囊胚大部分是单倍体 ,且三者之间无显著性差异 (P >0 0 5 )。以上结果说明 ,猪卵母细胞电激活后间隔一段时间再用DMAP和CHX激活 ,激活作用随时间的延长而减弱 ;猪卵母细胞电激活后 4h再用 6 DMAP ,CHX ,CB + 6 DMAP激活 ,产生的囊胚大部分为单倍体 ,该方法适于猪卵母细胞ICSI的激活。     

澳洲波尔山羊胚胎3种冷冻方法对其胚胎移植效果的影响

在25℃室温下,采用细管法(一步法、二步法)和OPS法,以不同浓度的EFS、EDFS为玻璃化冷冻液,对澳洲波尔山羊致密桑椹胚和囊胚进行玻璃化冷冻保存。同时利用1.5mol/LEG为抗冻保护剂对胚胎进行常规法冷冻保存。分别将上述3种方法冷冻解冻后的胚胎移植于同期发情后6~7d的云南黑山羊受体。结果表明,细管法胚胎玻璃化冷冻保存效果均以EFS40组为佳,解冻后胚胎移植产羔率分别为40.54%(15/37;一步法)和51.35%(19/37;二步法)。与新鲜胚胎移植产羔率(52.50%,21/40)和常规法冷冻保存的胚胎移植产羔率(45.16%,14/31)相比无显著性差异(P>0.05)。另外,用EDFS30玻璃化溶液,OPS法冷冻解冻后的胚胎移植产羔率高达51.43%(18/35),为整个玻璃化冷冻试验的最佳值。玻璃化冷冻方法简便、迅速,无论是细管法还是OPS法均获得了比较理想的胚胎移植效果。     

乙二醇及二甲基亚砜对小鼠卵母细胞冷冻后纺锤体及孤雌激活后发育能力的影响

试验采用EFS30、DFS30和EDFS30冷冻液对小鼠MⅡ期卵母细胞进行玻璃化冷冻,并对冷冻-解冻后卵母细胞存活率、纺锤体形态正常率、孤雌激活胚胎的发育能力进行研究。结果表明:利用EDFS30冷冻-解冻卵母细胞后的存活率(98.3%)显著高于EFS30组(88.2%)和DFS30组(89.5%)(P0.05);DFS30组纺锤体形态正常率(44.9%)显著低于其他各组;而孤雌激活后EFS30、DFS30、EDFS30和对照组之间卵裂率(59.1%、56.3%、59.3%和60.0%)、囊胚率(52.0%、53.7%、61.2%和62.1%)和囊胚细胞数(49、48、50、50)均无显著性差异(P0.05)。综上所述,3种冷冻液冷冻卵母细胞孤雌激活后均可获得较好的体外发育能力,其中EDFS30较适宜小鼠MⅡ期卵母细胞冷冻保存。     

荧光探针JC-1与PI联合染色法在猪精子线粒体膜电位检测中的应用

目前,对于精子线粒体膜电位(MMP)的检测分析,通常采用JC-1单独染色,这种染色方法可以准确地区分高、低MMP精子,但不能明确区分精子的存活状态。本研究采用JC-1与碘化丙啶(propidium iodide,PI)2种荧光染料联合染色的方法,对6种不同保存条件下的猪精子进行染色,分别使用流式细胞仪与荧光显微镜2种检测手段对猪精子MMP进行检测。结果表明:死亡精子头部呈红色,高MMP精子尾部呈橙红色,低MMP精子尾部为绿色。2种检测手段的结果比较显示,荧光显微镜能够有效地区分出高、低MMP死精子,但对于活精子MMP的高低检测效果不甚理想。相反,流式细胞仪则能够有效地区分活精子MMP的高低,但对于死精子MMP高低的检测仍较困难。因此,对于猪精子线粒体MMP的检测,采用JC-1与PI双染的方法,用流式细胞仪与荧光显微镜进行联合检测,能比较全面的反映出精子线粒体的功能状态。     

供体细胞不同性别和处理方式对异种克隆牦牛胚胎发育的影响

以黄牛(Bos taurus)卵母细胞为受体,牦牛(Bos grummiens)耳成纤维细胞为核供体进行体细胞核移植,研究供体细胞性别、细胞周期同期化处理方式及冷冻对异种克隆牦牛胚胎发育的影响.结果显示,雄性供体细胞的异种克隆牦牛囊胚发育率显著高于雌性供体细胞(56.6% vs 39.5%,P<0.05),但卵裂率和囊胚细胞数差异不显著;血清饥饿和接触抑制提供的供体细胞对异种克隆牦牛胚胎发育率和胚胎质量的影响没有明显差别;供体细胞冷冻-解冻组的克隆胚胎卵裂率明显低于新鲜消化组(54.5% vs 78.2%,P<0.05),但两组之间的囊胚率和囊胚细胞数没有显著差异.说明供体细胞的性别对异种克隆牦牛囊胚发育有影响,而同期化处理和细胞冷冻对异种克隆牦牛囊胚发育影响很小.