影响动物微生态制剂应用效果的因素及解决方法

<正>影响微生态制剂发挥其功效的因素很多,包括制剂的制备方法、贮藏条件、污染(如杂菌)、不正确的产品菌种组合方式、肠内菌群的状态、使用剂量和使用次数、动物(宿主)的年龄、菌群在肠道中的存活率、饲料成分的变化等,可归纳为3大类因素:①菌种因素;②宿主因素;③外界因素。了解这些因素对微生态制剂功效的影响是非常重要的。     

微生态制剂对奶牛产奶量和乳品质与肠道菌群的影响

通过在奶牛饲粮中添加微生态制剂,研究其对奶牛产奶量、乳品质和肠道菌群的影响。试验从200头成年产奶牛中,选取20头年龄、胎次、泌乳月份、妊娠期、产奶量、体重基本相似且身体健康的荷斯坦奶牛,分为试验组和对照组,试验期为35 d。其中对照组按照常规方式饲养,试验组在精料中按1‰的比例加入复合微生态制剂。结果表明:对照组奶牛平均产奶量降低,每头日均产奶量减少0.36 kg(P>0.05),而试验组每头日均产奶量比对照组增加1.81 kg,增产16.97%,差异极显著(P<0.01);与对照组相比,试验组蛋白质、乳糖和非脂乳固体增加,但差异不显著(P>0.05),脂肪降低(P<0.05);最后采用PCR-DGGE技术分析奶牛肠道菌群,结果试验组肠道菌群多样性明显高于对照组,且相似性达到97%,证实微生态制剂具有调节奶牛肠道菌群平衡的作用。     

乳酸菌和大肠杆菌对固定化犬肠道黏蛋白模型的黏附性

采用固定黏蛋白模型,结合细菌同位素γ-32P-ATP标记法,探讨犬源肠球菌E01和E16、犬源大肠杆菌DE、鸡源德氏乳酸杆菌德氏亚种N11及猪源约氏乳杆菌JJB3和致病性大肠杆菌ATCC25922和CVCC2060对本地犬各肠段黏蛋白的黏附能力;肠球菌E16和大肠杆菌DE各自的黏附机制;2株犬源肠球菌以3种作用方式（排斥、竞争、取代）对2株致病性大肠杆菌的黏附抑制作用。结果表明,各测试菌株在犬各肠段黏蛋白模型上的黏附值均不同;2株犬源肠球菌和1株猪源乳酸菌的黏附性能显著优于犬源大肠杆菌DE和2株致病性大肠杆菌;乳酸肠球菌E16表面的碳水化合物结构和糖蛋白参与了黏附过程,大肠杆菌菌体蛋白在黏附过程中发挥一定作用;乳酸肠球菌的黏附受体对高碘酸钠和胰蛋白酶处理不敏感,大肠杆菌DE的黏附受体具有碳水化合物结构,可能为糖蛋白类物质;在肠球菌与病源菌的3种作用方式中,取代和排斥方式对病原菌黏附抑制效果较好。这表明2株犬源肠球菌具开发为益生菌的潜力。     

林下放养固始鸡和草蛋鸡在产蛋前期生产性能和养殖效益对比试验

本试验旨在探讨林下放养条件下,固始鸡和草蛋鸡两种不同肉蛋兼用地方鸡在产蛋前期生产性能和养殖效益进行比较。试验采用单因子试验设计,选取125日龄的固始鸡和草蛋鸡,按品种分到2个处理组圈舍。采用玉米-豆粕型饲粮,试验期80天(125-205日龄)。试验结果表明产蛋前期固始鸡死淘率相对较低,产蛋率相对更为稳定,平均产蛋率更高,综合产蛋性能优于草蛋鸡;单位养殖效益固始鸡高于草蛋鸡。     

丁酸梭菌CBM01的碳、氮源优化及其对胃肠道耐受性的研究

本试验旨在探究丁酸梭菌CBM01的最佳碳、氮源及其对胃肠道的耐受性。采用控制变量的方法,以梭菌增菌培养基为基础,对丁酸梭菌CBM01的碳、氮源进行优化,同时对其胃肠道耐受性进行研究。结果显示:1)丁酸梭菌CBM01的最佳碳源和最佳氮源分别为葡萄糖和蛋白胨;2)丁酸梭菌CBM01在人工胃液和人工肠液中作用3 h后,存活率分别为90.33%和92.09%;3)丁酸梭菌CBM 01可耐受的最高胆盐浓度为0.40%。由此可见,丁酸梭菌CBM 01对胃肠道环境具有良好的耐受性,是一株开发潜力巨大、应用前景广阔的益生菌。     

采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳技术分析小熊猫胃肠道菌群的多样性

本试验旨在研究小熊猫胃肠道菌群多样性。采用聚合酶链式反应(PCR)-变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术结合条带的克隆测序、聚类分析和主成分分析(PCA)检测小熊猫胃肠道菌群结构及多样性。结果表明:1)PCR-DGGE图谱显示小熊猫胃肠道中有大量菌群,且不同部位的菌群结构存在一定的差异,相邻肠段菌群结构具有一定的相似性。结肠和粪便样品的菌群多样性较高,其次为胃和直肠样品,而空肠和回肠样品菌群多样性较低。2)小熊猫胃肠道菌群PCR-DGGE图谱中测序的条带大多数归为厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroides)、变形菌门(Proteobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia),共性条带主要是未培养拟杆菌门细菌(uncultured Bacteroidetes bacterium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、未培养梭状芽孢杆菌(uncultured Clostridium sp.)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)和食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria),其中厚壁菌门为优势菌群;特异性条带主要是丛毛单胞菌(Comamonas sp.)、梭菌属(Clostridium sp.)和Akkermansia。由此可见,小熊猫胃肠道中栖息着大量菌群,且其多样性按照胃肠道由前至后的顺序呈现高-低-高的趋势。     

地衣芽孢杆菌H2对坏死性肠炎肉鸡生长性能及肠道菌群的影响

为研究地衣芽孢杆菌H2对坏死性肠炎肉鸡生长性能及肠道菌群的影响,选取240只1日龄科宝-500肉鸡,随机分为Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(造模组)、Ⅲ组(球虫+鱼粉组)和Ⅳ组(地衣芽孢杆菌防治组)。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组从14日龄起饲喂添加30%鱼粉的日粮并于15日龄灌喂球虫,Ⅱ组和Ⅳ组18~20日龄连续灌喂产气荚膜梭菌(2.2×108 cfu/mL)1mL,其余各组灌喂同等剂量的生理盐水,试验期总共为22d。结果表明:坏死性肠炎的发生会显著降低肉鸡体增重升高料重比(P0.05),地衣芽孢杆菌的添加能提高坏死性肠炎肉鸡体增重。DGGE图谱聚类结果显示,肉鸡回肠内容物菌群主要聚为两簇,Ⅳ组和Ⅰ组聚为一簇,Ⅱ组和Ⅲ组聚为一簇,相似性为0.70。此外,与Ⅱ组相比,Ⅰ组和Ⅳ组回肠内容物中乳杆菌属数量显著增加(P0.05),Ⅰ组肠杆菌科数量显著降低(P0.05),Ⅳ组肠杆菌科数量降低且与Ⅰ组无显著差异(P0.05)。综上所述,在日粮中添加地衣芽孢杆菌能改善坏死性肠炎肉鸡生长性能,调节由坏死性肠炎导致的菌群失调。     

玉米提取物对4株猪源乳酸杆菌耐酸能力的影响

采用模拟胃酸环境,探讨玉米提取物对4株猪源乳酸杆菌耐酸性能的影响。结果表明:在pH2.5模拟胃酸环境中处理3h,约氏乳酸杆菌(L.johnsonii)JJB3、SNZ10,罗伊氏乳酸杆菌(L.reutert)MNZ8、KNZ4分别经90min、30min、60min、30min完全失活;添加玉米提取物后,4株乳酸杆菌在pH2.5模拟胃酸环境中处理3h后,活菌数均未有显著变化,成活率达97.37%～100%。进一步的单因子分析表明,葡萄糖浓度增加可显著提高乳酸杆菌的耐酸性,游离氨基氮含量对乳酸杆菌成活率几乎无影响。结果证明,玉米提取物对4株乳酸杆菌耐受模拟胃酸环境具有很好的保护作用,可用作提高乳酸杆菌制剂成活率的过胃保护剂。     

宿主共生细菌及抗生素肽的相互作用

人体内和体表栖生着种类繁多、数量巨大的正常微生物, 目前仅在人肠道内就已经鉴定出500多种正常肠道微生物, 其数量高达1014,微生物细胞以细菌为主体,也就是通常说的共生细菌.     

枯草芽胞杆菌和三肽囊素对肉鸡生长性能、血液生化和抗氧化指标的影响

选取144只1日龄科宝-500肉鸡,随机分为4组,每组3个重复,每个重复12只。对照组(Ⅰ)和三肽囊素组(Ⅱ)饲喂基础饲料,枯草芽胞杆菌组(Ⅲ)和枯草芽胞杆菌加三肽囊素复合组(Ⅳ)在基础饲料中添加枯草芽胞杆菌1.0×106cfu/g,Ⅱ、Ⅳ组在4日龄和7日龄注射0.01 mg/kg的三肽囊素,试验期为42 d,探讨枯草芽胞杆菌与三肽囊素对肉鸡生长性能、血液生化和抗氧化指标的影响。结果表明:与对照组相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组试验前期和全期日增质量显著提高(P0.05),Ⅳ组料重比最低,较对照组降低4.37%(P0.05);21日龄时,Ⅲ、Ⅳ组血清总蛋白含量分别比对照组提高19.60%、27.68%(P0.05),白蛋白含量分别比对照组提高16.72%、18.03%(P0.05);21日龄的Ⅲ组和42日龄的Ⅳ组的CAT、GSH-Px酶活力显著高于对照组(P0.05),42日龄时试验组血清MDA显著低于对照组。由此可见,添加枯草芽胞杆菌及其与三肽囊素联合应用能改善肉鸡生长性能,提高血清总蛋白和白蛋白含量,增加CAT和GSH-Px的酶活力。