中国美利奴羊(新疆军垦型)同期发情处理前后外周血生殖激素的变化

研究同期发情处理中国美利奴羊(新疆军垦型)的外周血生殖激素含量变化与发情时间的关系,探讨中国美利奴羊(新疆军垦型)最佳人工输精时间。分别采集经孕酮海绵栓+PMSG肌注法处理母羊在埋栓前1 d、埋栓后7 d、埋栓后13 d(撤栓0 h)和撤栓/PMSG肌注48 h的外周血,应用ELISA方法检测外周血中雌二醇(E_2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)的质量浓度,分析试验母羊在同期发情处理前后外周血中生殖激素含量变化,统计分析生殖激素质量浓度的相关性和4个时间点的差异显著性。研究结果,对孕酮海绵栓+PMSG肌注法处理前后试验母羊外周血生殖激素的ELISA检测,与埋栓前1 d、埋栓后7 d、埋栓后13 d(撤栓0 h)相比,撤栓/PMSG肌注48 h试验羊外周血中E_2、FSH、LH含量显著升高(P0.05),P含量显著下降(P0.05),且不同个体间不同激素含量的波动范围明显减小,达到相对一致水平,与该时间点的中国美利奴羊(新疆军垦型)集中发情现象相吻合。结果表明,孕酮阴道海绵栓+PMSG处理后的48 h是中国美利奴羊(新疆军垦型)集中发情的高峰时间,也是最佳输精时间。     

EGF和β-巯基乙醇对羔羊卵母细胞体外受精和体外发育的影响

[目的]为优化幼畜卵母细胞体外培养体系提供理论基础。[方法]研究在成熟液中添加EGF和β-巯基乙醇对绵羔羊卵母细胞受精和卵裂、囊胚情况的影响,并与成年绵羊卵母细胞进行比较。[结果]在成熟液中添加不同浓度的EGF对羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率无显著影响(P0.05)。添加不同浓度的β-巯基乙醇可以提高羔羊卵母细胞囊胚率,其中添加100μmol/Lβ-巯基乙醇有显著影响(P0.05),但对卵裂率影响不显著(P0.05)。羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率均显著低于成年羊(P0.05)。添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞正常受精率(P0.05),且与成年羊卵母细胞受精率差异不显著(P0.05)。未添加β-巯基乙醇多精入卵率显著高于成年羊(P0.05),而添加100μmol/L的β-巯基乙醇多精入卵率与成年羊差异不显著(P0.05)。成熟液中不添加β-巯基乙醇时未受精率(20.0%)高于成年羊组(12.3%)和β-巯基乙醇(13.5%),但差异不显著(P0.05)。[结论]添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞发育能力,提高正常受精的比例并减少多精子受精的发生,但羔羊卵母细胞发育能力仍显著低于成年羊。     

绵羊应用腹腔内窥镜冻胚移植试验

2005年10～l1月在新疆兵团79团使用PMSG和氟孕酮阴道海绵栓处理哈萨克羊和细毛羊母羊131只,进行腹腔内窥镜冻胚移植试验.结果表明,哈萨克羊同期发情率为90.62%,细毛羊同期发情率为84.7%,哈萨克羊同期发情率显著高于细毛羊(P＜0.05);借助腹腔镜观察母羊排卵情况,哈萨克羊与细毛羊排卵率分别为94.28%、95.08%,排卵率差异不显著(P＞0.05);利用腹腔内窥镜进行冻胚移植,结果为哈萨克羊产羔率44.89%(22/49),细毛羊产羔率38.63%(17/44),产羔率哈萨克羊与细毛羊间差异极显著(P＜0.01).     

牛妊娠相关糖蛋白6基因密码子优化及其在HEK293细胞中的表达

[目的]解决天然牛妊娠相关糖蛋白(bPAG)不易分离纯化的问题,获得高效异源表达且具有良好免疫反应性的bPAG6,为国产bPAG检测产品的研发提供技术支持.[方法]根据宿主细胞对密码子的偏好性,利用MaxCodonTM在不改变氨基酸序列的前提下,对bPAG6基因密码子进行优化,采用全基因合成技术扩增优化后的bPAG6基因,构建proEM-bPAG6重组载体,并转染至HEK293细胞中进行高效表达;然后通过SDS-PAGE电泳、Western blotting和ELISA检测重组蛋白的表达效果及免疫反应性,并利用在线生物信息学分析软件对重组蛋白的结构及功能进行预测.[结果]优化后bPAG6基因的密码子适用指数(CAI)由0.80提高到0.96,G+C含量由49.4%提高到58.8%,其蛋白编码区(CDS)长度为1137 bp,共编码379个氨基酸残基.将全基因合成技术扩增获得的bPAG6基因插入proEM载体构建proEM-bPAG6重组载体,经EcoR I和Hind III双酶切鉴定可获得2条与预期结果相符的片段[proEM载体(4369 bp)和bPAG6基因(1176 bp)],测序结果也显示其碱基序列与优化后的bPAG6基因完全一致.proEM-bPAG6重组载体转染HEK293细胞表达获得的重组蛋白bPAG6分子量约46 kD.重组蛋白bPAG6可被抗bPAG6抗体识别,即具有良好的免疫反应性.重组蛋白bPAG6信号肽由N端的前15个氨基酸残基组成;存在5个N-糖基化位点,其N-糖基化修饰主要位于57Asn、73Asn、102Asn、124Asn和181Asn位点处;重组蛋白bPAG6为分泌性蛋白,无跨膜螺旋区,其二级结构由无规则卷曲(42.74%)、延伸链(31.93%)、α-螺旋(19.26%)和β-转角(6.07%)组成.[结论]通过基因优化及真核表达获得的重组蛋白bPAG6具有良好免疫反应性,可作为抗原应用于牛早期妊娠快速诊断产品的研发.     

应用MOET技术培育“U”系羊新类群的研究

采用澳大利亚进口FSH、LH、PMSG、氟孕酮阴道海绵栓等激素 ,进行超数排卵、人工授精、手术采卵、同期发情、胚胎移植、B超妊娠检查等技术 ,处理优秀美利奴母羊 2 10只 ,获得可用胚 15 0 8枚 ,平均 7.18枚 (15 0 8/2 10 ) ,移植受体 945只 ,产羔母羊 42 8只 ,受孕率 45 .2 9(4 2 8/ 945 ) ,产羔数 6 46只 ,产羔率 15 0 .94% (6 46 / 4 2 8)。其中公羔 310只 ,母羔 336只。“U”系羊新类群初生公羔平均重 4.84kg ,母羔平均重 4.91kg。断奶公羔平均重39.42kg ,母羔平均 34 .6 9kg。 12月龄公羊平均体重 80 .31kg ,母羊 6 3.18kg。周岁公羊毛长平均 11.97cm ,剪毛量平均 13.14kg ,母羊毛长平均 11.74cm ,剪毛量平均 10 .2 0kg。平均净毛率达 70 %以上。 2岁公羊体重平均116kg ,毛长平均 11.5cm ,剪毛量平均 14.5kg ,净毛率 70 .2 %。 2岁母羊平均体重 78kg ,毛长平均 11.5cm ,剪毛量平均 11.2kg ,净毛率 71.4%。羊毛纤维平均细度 19.45 μm ,羊毛大弯曲占 84% ,羊毛油汗白色占 92 % ,腹毛呈良好的毛丛结构。 3岁公羊最大体重 148kg ,母羊最大体重达 10 3kg。     

发情羊血清、肝素对绵羊卵母细胞体外受精的影响

绵羊卵母细胞体外成熟后 ,在含 5 %、10 %和 2 0 %发情羊血清的受精液中进行体外受精 ,其分裂率分别是 73 79%、73 2 5 %和 77 61%,显著高于不含发情羊血清的受精液 (0 %,P <0 0 1)。用含 5 %发情羊血清的受精液为基础液 ,添加 5u/ml和 10u/ml的肝素 ,受精后的分裂率分别为 86 63 %和 75 5 3 %,5u/ml肝素组的分裂率与不加肝素组 (86 64 %)差异不显著 ,而 10u/ml高浓度肝素组的分裂率则显著低于其他两组 (P <0 0 1)。     

利用航片采样进行森林资源调查小班面积量算

本文探讨了利用航片采样进行森林资源调查小班面积量算的原理、设备工艺,全面分析了量算成果的精度,说明该技术是可以实现和满足实用要求的。     

中国美利奴羊非繁殖季节同期发情及冻胚移植试

利用相同来源相同质量的冷冻胚胎，对中国美利奴羊进行了春季非繁殖季节和秋季繁殖季节的同期发情和胚胎移植试验。其中非繁殖季节2～3月同期处理受体母羊189只，发情101只，同期率53.4%，移植受体85只，受胎17只，受胎率20%。繁殖季节9～10月，同期处理受体羊205只，发情137只，同期率66.82%。移植121只，受胎67只，受胎率55.37%。结果表明，中国美利奴母羊在繁殖季节的同期率和胚胎移植的受胎率明显高于非繁殖季节，差异非常显著（P＜0.01）。     

中国美利奴(细毛型)胚胎冷冻移植试验

中国美利奴（细毛型）羊属于单胎繁殖家畜，双胎很少，仅占８％～１０％，母羊正常繁殖年龄一般在７～８岁，终生仅能繁殖后代６～８只。为充分发挥中国美利奴（细毛型）优秀母羊的繁殖潜能，迅速增加其后代的数量，采用外源激素，超数排卵、人工授精、手术采卵、同期发情...     

奶牛活体采卵的影响因素分析

针对活体生物材料缺乏,活体采卵技术(Ovum pick-up)应运而生,因其具有系谱清楚适于科学研究而成为获取卵母细胞的主要途径之一。因此,研究活体采卵影响因素具有重要意义。就活体采卵在采卵间隔周期、超排处理、高产牛所处年龄段、患繁殖疾病与否及连续采卵进行试验,研究其采卵效率及对卵巢生理机能的影响。结果显示,①采卵间隔时间不同,以每周2次采卵所获卵母细胞数要多于每周1次的,差异不显著,但每周2次的优质卵母细胞率高于每周1次,且差异显著;②经超排处理后获卵母细胞数显著高于对照组,优质卵母细胞率有所提高,差异不显著;③青年牛和成年牛的平均获卵数和优质卵母细胞率差异均不显著;④健康牛平均获卵数显著高于患有繁殖疾病的牛只,优质卵母细胞率也显著高于患牛;⑤奶牛连续采卵和1次采卵的平均获卵率和优质卵母细胞率差异均不显著。综上,奶牛活体采卵受很多因素的影响,上述5方面的因素为主要影响因素。