催乳素和神经肽Y基因及基因聚合对白耳鸡产蛋数的遗传效应

采用PCR-SSCP方法检测白耳鸡催乳素(PRL)基因调控区和神经肽Y(NPY)基因转录起始区的多态性,并分析PRL、NPY基因单基因型和聚合基因型与72周龄产蛋数的关联程度。结果表明,PRL基因调控区基因型AA和NPY基因转录起始区基因型CC与72周龄的产蛋数显著相关(P0.05),AA型对产蛋数的加性效应值为3.65,显性效应值为-0.24;CC型的加性效应值为3.22,显性效应值为-0.76。两种有利单基因型的聚合个体AACC型72周龄的产蛋数与其他基因型聚合个体(除ABCD型外)比较,差异显著(P0.05)。但基因效应分析表明,两基因间的互作效应并不显著(P0.05)。     

羊驼垂体催乳素（PRL）基因全长cDNA的克隆及序列分析

[目的]获得并分析羊驼PRL基因cDNA全序列结构,为研究羊驼催乳素（PRL）的各种生物学作用和生产应用提供理论依据。[方法]根据已知的不同哺乳动物的PRL基因cDNA序列,设计羊驼PRL引物,运用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增（RACE）技术获得羊驼PRL基因cDNA全序列。[结果与结论]羊驼PRL基因cDNA序列全长959bp,编码区为687bp,编码229个氨基酸的PRL前体蛋白。预测羊驼PRL蛋白质的空间结构类似人生长激素（GH）,但在81位（成熟肽为51位）为蛋氨酸可能导致蛋白空间结构的不同而影响羊驼PRL的功能;序列比对结果表明,羊驼PRL的 cDNA序列与大多数哺乳动物相似。构建的基因进化树分析结果显示,羊驼PRL与骆驼的亲缘关系最近;同多数哺乳动物一样,羊驼PRL进化速度极缓慢,没有发生人、灵长类、啮齿类、反刍动物的“episodic”式进化。     

王不留行提取物对泌乳中期奶牛血清生化指标、泌乳相关激素及免疫功能的影响

试验旨在研究王不留行提取物对泌乳中期奶牛血清生化指标、泌乳相关激素及免疫功能的影响。选用胎次(2~4胎)、体重、产奶量均相近的泌乳中期中国荷斯坦奶牛32头,随机分为4组,每组8头,分别饲喂王不留行提取物添加水平为0(对照组)、5.7 g/(头·d)(低剂量组)、19 g/(头·d)(中剂量组)、38 g/(头·d)(高剂量组)的试验日粮。预试期7 d,正试期35 d。结果表明,与对照组相比,各剂量组血清中总蛋白、白蛋白含量均无明显变化(P>0.05),其中在第30天时,血糖含量呈升高趋势,甘油三酯、尿素氮含量呈下降趋势,但差异均不显著(P>0.05);与对照组相比,各剂量组血清中催乳素和生长激素水平有一定程度的提高,其中中、高剂量组在第30天时差异显著(P<0.05);与对照组相比,各剂量组血清中IgA、IgG含量呈升高趋势,而IgM含量呈下降趋势,但差异均不显著(P>0.05)。综上所述,日粮中添加王不留行提取物可改善奶牛机体的能量代谢水平及蛋白质的利用率,促进体内脂类代谢,提高产奶量,建议泌乳中期奶牛日粮中王不留行提取物添加量为19~38 g/(头·d)。     

罗非鱼催乳素Ⅰ基因的组织分布及盐胁迫对其表达的影响

采用同源克隆方法从橙色莫桑比克罗非鱼（Oreochromis mossambicus）、荷那龙罗非鱼（O.hornorum）及其正反交子代垂体中克隆了催乳素Ⅰ基因（PRLⅠ）,并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行了比对分析。结果显示,4种罗非鱼的PRLⅠ基因序列长度均为798 bp,ORF长639 bp,共编码212个氨基酸;橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼仅在31号位点存在一个氨基酸残基差异。用q PCR方法分析橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼PRLⅠ基因在不同组织或器官中的表达,结果表明罗非鱼PRLⅠ基因在垂体中的表达量最高,在其他组织中的表达量较低;盐胁迫后4种罗非鱼垂体中的PRLⅠmRNA水平均显著降低,而在其他组织中的表达变化不大。由此可知PRLⅠ基因主要在垂体表达,参与罗非鱼的渗透压调节。     

槟榔江水牛·摩拉水牛和荷斯坦奶牛血清中3种激素含量的测定

[目的]为槟榔江水牛的进一步研究和开发利用积累理论数据。[方法]采用化学发光法对槟榔江水牛血清中3种激素(PRL、INS和GH)的含量进行测定,并与摩拉水牛和荷斯坦奶牛进行比较。[结果]槟榔江水牛血清中GH含量为0.017 9 ng/m L,低于摩拉水牛(0.023 7 ng/m L),略高于荷斯坦奶牛(0.017 8 ng/m L),但差异均不显著(P0.05)。槟榔江水牛血清中PRL含量为0.120 0 ng/m L,与荷斯坦奶牛差异不显著(P0.05),但显著低于摩拉水牛(P0.05)。槟榔江水牛血清中INS含量为0.740 0μU/m L,均低于荷斯坦奶牛和摩拉水牛,其中与荷斯坦奶牛差异显著(P0.05)。[结论]在泌乳方面,槟榔江水牛与摩拉水牛和荷斯坦奶牛有相同的优越性。     

NPY和PRL基因SNP位点对如皋黄鸡产蛋性能的组合效应研究

本研究旨在分析鸡神经肽Y(NPY)和催乳素(PRL)基因的SNP位点对产蛋性能的组合效应。实验采用飞行质谱技术对如皋黄鸡NPY基因内含子2的A+1259G(P7位点)突变和PRL基因内含子1的C+79T(P8位点)突变进行单基因和多基因组合效应分析。结果表明:P7位点GG基因型是多态位点上开产日龄和40周龄总产蛋数的优势基因型,5个测定的产蛋性状在P8位点3种基因型间差异均不显著;在9个组合中,GGTT和GGCT组合基因型为优势组合基因型,其中GGCT型个体的开产日龄和开产体重比组合前P7位点GG基因型和P8位点CT基因型个体的均值分别减少了3.7 d、52.6 g,组合效应显著(P0.05),40周龄总产蛋数比组合前增加了9.9枚(P0.05);2个位点间不存在显著的互作效应(P0.05)。     

具生物活性的重组鸡催乳素的制备

将鸡催乳素(PRL)成熟肽cDNA片段插入原核表达载体pRSETA的NheI和Hind III位点之间,构建重组表达质粒pPRL-SCAU.将此质粒转化大肠杆菌Escherichia coli菌株BL21(DE3),将重组菌在含氨苄青霉素的LB培养基中培养,再经IPTG诱导,可以诱导表达相对分子质量约为24 500的重组鸡PRL.经0.1 mmol/L IPTG诱导4 h后,表达量达到最高,占总菌体蛋白的30%左右.表达的重组鸡PRL含组氨酸标记,以包涵体形式存在,可经50%Ni-NTA树脂分离纯化,然后在透析复性后分离出可溶性部分.将此可溶性重组鸡PRL对3月龄的鸽子在左侧嗉囊处相同位置隔24 h2次皮内注射,能够显著促进嗉囊上皮的增生.与天然鸡催乳素的增生效果相比,所表达的重组鸡PRL的生物学活性为天然催乳素的17%至25%.     

皖西白鹅催乳素基因Exon2克隆及多态性研究

以皖西白鹅为材料,用PCR-SSCP法分析了PRL基因外显子2的多态性。结果表明,PRL基因外显子2存在1个SNP位点。等位基因A频率为0.423 7,B频率为0.576 3。χ^2分析表明,基因型在群体内分布存在极显著差异（P〈0.01）。     

Effects of photoperiod on the secretion of growth hormone and prolactin during nighttime in female goats

The aim of the present study was to clarify the effect of photoperiod on nighttime secretion of growth hormone (GH) in goats. Adult female goats were kept at 20°C with an 8 h or 16 h dark photoperiod, and secretory patterns of GH for 8 h in the dark period were examined with the profile of prolactin (PRL) secretion. GH was secreted in a pulsatile manner in the dark period. There were no significant differences in pulse frequency between the 8‐ and 16‐h dark photoperiods; however, pulse amplitude tended to be greater in the group with the 16‐h dark photoperiod (P = 0.1), and mean GH concentrations were significantly greater in the same photoperiod (P < 0.05). PRL secretion increased quickly after lights off under both photoperiods. The PRL‐releasing responses were weaker in the 8‐h than 16‐h dark photoperiod. The secretory response to photoperiod was more obvious for PRL than GH. The present results show that a long dark photoperiod enhances the nighttime secretion of GH in female goats, although the response is not as obvious as that for PRL.