农杆菌介导CBF1基因转化安祖花的研究

[目的]为获得耐低温安祖花奠定基础。[方法]利用农杆菌介导CBF1基因侵染安祖花,并研究不同浓度乙酰丁香酮(AS)和侵染时间对转化后安祖花抗性愈伤组织的存活率和抗性芽分化率的影响。[结果]以重组质粒pBI121-CBF1为模板,利用CBF1cDNA全长的引物序列进行PCR扩增,获得约650bp的片段,表明重组质粒构建成功。在抗性培养基上筛选12周后,部分愈伤组织褐化死亡。用100μmol/LAS作为诱导物质时,抗性愈伤组织存活率和抗性芽的分化率较高。农杆菌侵染时间对转化后愈伤组织存活率和抗性芽分化率有一定影响。[结论]当AS浓度为100μmol/L、侵染时间为10min时,抗性愈伤组织的存活率及分化率最高,分别为48.6%和11.46%。     

鹅鸭疫里默氏杆菌感染的诊断与治疗

2006年5月,海安县某养鹅大户所养肉鹅出现急性死亡。患病鹅的临诊症状、病理变化符合鸭疫里默氏杆菌感染的特点。通过细菌的分离培养获得了1株细菌的纯培养物;涂片染色镜检、血清学试验、动物试验的结果表明所分离的细菌为1型鸭疫里默氏杆菌。选用23种抗生素进行药敏试验,确定所分离的鸭疫里默氏杆菌对羟氨苄青霉素、林可霉素高度敏感,对头孢拉定、头孢氨苄、强力霉素和环丙沙星中度敏感,对其他药物低敏或耐药。选择高敏药物进行治疗,并结合消毒以及紧急免疫接种,有效地控制了疫情的发展和传播。     

木麻黄根瘤内生菌分离培养和宿主范围的研究

从普通木麻黄、细枝木麻黄和粗枝木麻黄根瘤上分离到具典型孢囊和泡囊特征的放线菌Ｆｒａｎｋｉａｓｐ．菌株１８株,均获得纯培养。ＢＡＰ是木麻黄根瘤内生菌生长的适宜培养基。同一木麻黄根瘤中有不同形态特征与侵染特性的内生菌共存;木麻黄根瘤内生菌在木麻黄不同种内可交叉侵染,还可侵染杨梅、四川木岂木。     

影响黑胫病菌侵染试管烟苗的几个因素分析

 黑胫病或赤星病菌接种到试管烟苗基部进行培养,定期观察病情,结果表明:(1)高抗黑胫病而高感赤星病品种G140的幼嫩试管苗能被黑胫病菌侵染,接种病原菌30天病指100;但赤星病却与烟苗共生,病指为0。(2)接种黑胫病菌后,高感品种小黄金1025较G140凋萎死亡迅速,二者差7~10天;同一品种内单倍体较二倍体凋萎死亡迅速。(3)试管烟苗继代后7天内,极易遭黑胫病菌侵染,抗感品种间无差异;继代后10天,抗感品种间差异显著;继代后时间继续延长,烟苗抗病性有增加趋势。(4)28℃左右黑胫病菌侵染能力强而稳定,15℃能够侵染,8℃以下失去侵染能力。     

胞外多糖对野油菜黄单胞菌野油菜致病变种气孔入侵能力的影响

利用 Tn5gus A5插入诱变和标记置换等分子遗传学方法 ,构建了野油菜黄单胞菌野油菜致病变种 ( Xanthomonas campestris pv.campestris) 80 0 4菌株的系列突变体。其中有 6个突变体的胞外多糖产量显著降低。将它们喷雾接种寄主植物萝卜时 ,有 2个突变体仍具有一定的致病性 ,4个突变体无致病性。结合扫描电镜观察 ,我们认为胞外多糖产量影响着该病菌气孔入侵能力     

抗砧系列砧木抗葡萄根瘤蚜特性鉴定

采用室内离体根和田间盆栽接种鉴定法对新选育的4份葡萄砧木品种进行葡萄根瘤蚜抗性鉴定。结果表明,抗砧3号、抗砧5号抗性与SO4、5BB相近,表现为高抗,接种后根瘤蚜迅速死亡或停滞在1龄阶段,盆栽鉴定未发现有根瘤及蚜虫存在;抗砧1号在盆栽鉴定中未受蚜虫侵染,但室内鉴定中种群增殖2.4倍,侵染率达46.0%,抗性等级为2级,表现为低抗;抗砧6号室内鉴定中受害程度超过易感品种巨峰,盆栽鉴定中与巨峰相当,表现为易感。     

不同Ⅱd亚型微小隐孢子虫对BALB/c小鼠的感染性

为比较微小隐孢子虫不同亚型对小鼠的感染性,分别从河南和宁夏的犊牛体内获得两株微小隐孢子虫,利用分子方法进行基因亚型鉴定后,分别感染提前免疫抑制的3~6周的BALB/c小鼠,对感染前后小鼠粪样进行显微观察和PCR检测。结果显示,2个微小隐孢子虫分离株的亚型分别为ⅡdA19G1和ⅡdA15G2R1;2个亚型均可感染BALB/c小鼠,其中ⅡdA15G2R1感染小鼠后2d和3d可在显微镜下观察到卵囊,而感染ⅡdA19G1的小鼠在任何时间均未在显微镜下观察到卵囊;PCR检测发现2个亚型的小鼠排卵囊周期分别为18d和20d。该研究结果为微小隐孢子虫感染小鼠模型的建立提供一定理论依据。     

中国半散养与野生麋鹿繁殖期肠道寄生虫感染流行病学调查

肠道寄生虫不仅显著影响宿主的健康状况和生存状态，而且也潜在影响着宿主种群的发展。为了监测我国半散养和野生麋鹿的健康状态，研究麋鹿肠道寄生虫感染状况，本研究于2019年夏季，采用非损伤性采样方法，采集北京南海子麋鹿苑半散养和我国三大野生麋鹿种群新鲜粪便487份，分析麋鹿对寄生虫的感染情况。根据麦克马斯特计数法，对麋鹿种群粪便中寄生虫卵进行镜检计数。结果表明：麋鹿感染的肠道寄生虫主要为圆线虫类、艾美尔球虫、莫尼茨绦虫及毛首鞭形线虫。湖南岳阳东洞庭湖国家级自然保护区圆线虫类及莫尼茨绦虫感染率及感染丰度均比其他地点严重，并且这两种寄生虫的聚集度都比其他地点低，表明宿主-寄生虫的动态稳定平衡存在失衡的危机，存在寄生虫爆发的可能。建议东洞庭湖保护区管理人员对洞庭种群投入更多的监控与管护，预防寄生虫的爆发。本研究为我国麋鹿种群的科学管护及潜在野生栖息地选择提供数据参考。     

大菱鲆热休克蛋白90基因cDNA的克隆及其表达特征

从大菱鲆脾脏cDNA文库中筛选到HSP90,采用基因克隆方法获得含有1个97bp的5’UTR、2190bp的开放阅读框和501bp的3’UTR的全长cDNA序列。整个开放阅读框编码729个氨基酸,包含HSP90家族5个保守信号区。与其他物种已知序列同源比对的结果显示,此编码氨基酸更接近于热休克蛋白90β亚型(HSP90β),与牙鲆HSP90β的同源性高达96.6%。RT-PCR分析表明,在胚胎发育初期就能检测到HSP90,其表达量伴随着胚胎发育,先增加后减少,在尾芽期达到最高。HSP90在健康大菱鲆各供试组织中均有表达。经鳗弧菌感染处理后,在胚胎细胞中也有HSP90的强烈表达。结果显示,大菱鲆HSP90cDNA序列为HSP90β,是一种组成型表达的基因,其在维持正常生理机能、胚胎发育和应激中发挥重要的作用。     

肺炎支原体感染猪模型的建立及相关指标分析

旨在建立肺炎支原体感染猪模型。选取姜曲海猪和杜洛克猪的杂交一代为试验动物,随机分成感染组和对照组,人工接种猪肺炎支原体,试验期40 d,期间观察猪群临床症状,称体质量,检测血清抗体和IgG水平,屠宰后检查肺组织病变,并采用qRT-PCR检测免疫相关分子基因的表达。结果显示,试验16 d后感染组出现支原体肺炎临床症状;试验30 d后,感染组的体质量极显著低于对照组;试验20 d后,感染组血清肺炎支原体抗体阳性,IgG质量浓度极显著高于对照组;试验40 d时屠宰,病理检查发现,感染组表现严重的肺组织病变,脾和肺组织的 IL-1β、 TLR4、 IL-4、 IL-2基因表达显著高于对照组。结果表明,感染组表现出典型支原体肺炎临床表现和病理变化,成功建立肺炎支原体感染猪模型。