胸膜肺炎放线杆菌APXⅢA基因的克隆及原核表达

胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneumon- iae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎(porcine infec- tious pleuropneumonia)的病原菌。该菌为革兰阴性菌,根据其生长是否需要Ⅴ因子(NAD,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸)可将其分为2个生物型,即生物Ⅰ型和生物Ⅱ型。生物Ⅰ型具有致病性。根据可溶性荚     

丝状霉形体山羊亚种巢式PCR检测方法的建立

根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列，设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR，建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种（Mycoplasma mycoides subsp．capri，Mmc）的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示，该方法只能对Mmc扩增出195bp的片段，而对其他病原菌不能扩增出任何条带，它最低能够检测出10Pg的Mmc DNA，说明该方法具有良好的特异性和很高的敏感性。田间试验结果显示，对4株霉形体分离株及其病料均可扩增出Mmc特异性片段，表明，该巢式PCR方法可用于Mmc快速鉴定和流行病学调查。     

鸡舍有害气体简易检测方法

提出了用容积40L左右的干燥器收集鸡舍气体，经硼酸溶液吸收氨气，NaOH溶液吸收二氧化碳，最后通过滴定测定来监测鸡舍中氨气和二氧化碳的新方法。该方法成本低，简单，易操作，并可应用于其它环境的氨气和二氧化碳监测。     

黄土峁状丘陵生态环境建设模式及关键技术研究

针对黄土高原峁状丘陵区之特点,以流域为单元将治理区土地资源划分为川坝地、≤15°坡地梯田、15～25°旱梯田及25°以上陡坡地4种类型,并提出不同的治理方法,解决了本区粮食基本自给及坡地高效治理与合理利用问题,使治理区林草覆盖率达到46.1%,人均纯收入2056.5元,比对照分别提高了29%及42.7%,土壤侵蚀模数下降到1638.4t/（km²·a）,比对照下降了92.5%,实现了生态环境的初步好转。     

安徽省部分地区Gl(a)sser氏病的流行病学调查

为了明确安徽省Gl(a)sser氏病的流行情况,通过间接血凝检测方法对安徽省部分猪场的Gl(a)sser氏病的流行情况进行了调查研究.结果表明,该地区总阳性率为7.69%,范围为2.38%～9.53%,其中母猪阳性率偏高,表明该地区猪场有副猪嗜血杆菌不同程度的感染.     

水热耦合作用下尿素转化为铵态氮的动力学模型

在4种温度、5种土壤含水量共20种处理的室内控制条件下,研究了土壤含水量、温度及其耦合作用与尿素转化为铵态氮的关系,探讨水热耦合作用下尿素转化为铵态氮的动力学过程,以及旱地农田尿素利用率。研究结果看出,在本试验条件下,提高土壤温度和土壤含水量均可以促进尿素向铵态氮的转化,且在尿素转化为铵态氮的过程中,土壤温度和土壤含水量存在着交互效应。同时建立了土壤中尿素转化中铵态氮含量变化的动力学模型(Y=a+bt+c／t),模型分析表明,土壤温度和水分对a值存在负交互效应,而对b、c值却存在正交互效应。此外,通过对试验各温区比温值的分析,发现施用尿素后铵态氮产生的最敏感温区及最敏感湿度,并针对施肥方法提出了一些建议。     

绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位基因(pdha)的克隆、表达及其免疫学活性测定

丙酮酸脱氢酶α-亚单位(PDHA)在病原体丙酮酸脱氢酶的催化过程中发挥着重要作用。为表达绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)PDHA蛋白并测定其免疫学活性,应用PCR方法扩增出绵羊肺炎支原体pdha基因并对其序列进行分析,将pdha基因中色氨酸密码子TGA优化为TGG后进行全基因合成,插入到pET32-a(+)载体上,构建了pET32-a(+)-pdha重组质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中诱导表达PDHA蛋白,并通过免疫印迹及小鼠(Mus musculus)免疫试验对其免疫学活性进行测定。结果pdha基因全长1125bp,编码375aa,(G+C)%为34.76%,第304~306位、379~381位、586~588位、592~594位、625~627位、811~813位、889~891位及964~966位TGA在支原体中编码色氨酸而不是作为终止密码子;基因序列比对及进化树分析显示,绵羊肺炎支原体pdha基因与10种支原体的pdha基因序列同源性为32.6%~85.3%,氨基酸序列同源性为39.3%~90.6%,基因序列和氨基酸序列均与猪肺炎支原体(M.hyopneumoniae)有同源性,分别为85.3%和90.6%;绵羊肺炎支原体pdha基因在33℃、IPTG0.25mmol/L诱导6h的表达条件下,表达量最高;重组的PDHA蛋白可与绵羊肺炎支原体高免血清具有免疫印迹条带,在免疫小鼠后血清抗体效价与对照组相比,均显著升高(P<0.05)。本实验首次成功克隆表达了绵羊肺炎支原体pdha基因,并证明其重组PDHA蛋白具有较好的免疫学活性。为绵羊支原体肺炎基因工程疫苗及诊断研究提供候选靶标。     

山羊传染性胸膜肺炎病原的检测

湖北某地羊场发生严重呼吸道疾病,经初步诊断为疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)。将患病山羊肺组织提取基因组DNA,以此为模板根据OIE推荐的PCR-REA方法和Mccp-specificPCR方法进行检测,结果这两种方法都得到了预期的片段。说明送检山羊肺组织中存在山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp),也证实了国内Mccp的流行。     

青海省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查研究

通过间接血凝检测方法对青海省部分猪场的猪传染性胸膜肺炎的流行情况进行了调查研究,研究结果表明本地区总阳性率为26.13%,其中母猪阳性率偏高。     

从山羊中检测山羊支原体山羊肺炎亚种

山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumonia,Mccp)最早由MacOwan 和Minette于1976年分离,是引起山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleruopneumonia,CCPP)的病原体.~([1-2]).