饲养方式对略阳乌鸡肌肉和脂肪相关基因mRNA表达水平的影响

为研究饲养方式对略阳乌鸡肌肉发育和脂肪形成的影响,分别检测笼养和散养方式下60日龄、120日龄略阳乌鸡肌肉组织中相关基因的表达水平。结果发现:散养方式可提高肌肉嫩度,降低其硬度;笼养方式可提高肌肉产量和肌内脂肪(IMF)含量;60日龄散养鸡肌肉组织中慢肌标志基因碳酸酐酶Ⅲ(CAⅢ)的表达量显著低于笼养鸡,而快肌标志基因肌球蛋白碱性轻链2(MYL2)、肌球蛋白碱性轻链3(MYL3)和肌内脂肪形成候选基因脂蛋白脂肪酶(LPL)、瘦素受体基因(LEPR)的表达水平显著高于笼养鸡;120日龄时,散养鸡CAⅢ表达量显著升高,而钙/钙调素依赖性蛋白激酶(Ca MK)、MYL2、MYL3、LPL、LEPR和和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的表达量明显降低;随着日龄增加,笼养鸡骨骼肌中肌肉生长抑制素基因(MSTN)和腹脂沉积相关的甲状腺激素应答基因(THRSP)表达量显著升高,而散养鸡明显降低。综上所述,散养方式可提高略阳乌鸡骨骼肌中慢肌纤维相关基因表达水平,笼养方式促进骨骼肌中脂肪相关基因的表达,有利于肌内脂肪形成。     

抗肿瘤抗生素研究进展

对烯二炔类、糖肽类、蒽环类、苯并二吡咯类、核苷类、β-内酰胺类、苯醌类等7类抗肿瘤抗生素的研 究开发、作用机制、药效及临床应用现状进行了综述,提出今后抗肿瘤抗生素的研究应在新的分子靶点寻找、前药 研究、多药耐药性克服等方面有所加强。     

雷氏盐沉淀法对豆类丝核菌菌丝体中有机物的分离提取

采用雷氏盐沉淀法对豆类丝核菌菌丝体中有机物进行了分离提取。经熔点测定仪及GC-MS初步鉴定得到5种物质,蒲公英甾醇、α-香树脂醇、大狼毒素以及两种未知化合物,均是首次从豆类丝核菌菌丝体中得到。     

金龟子绿僵菌发酵代谢产物中苦马豆素的初步研究

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)经过发酵培养,采用气相色谱法对发酵代谢产物中的苦马豆素(Swainsonine SW)进行了定性和定量分析;同时用正丁醇萃取法对发酵液进行了初步的分离提取及薄层层析法检测。结果表明,金龟子绿僵菌发酵代谢产物中含有苦马豆素,且含量为10.2 131 mg/L;正丁醇萃取法是从发酵液中提取苦马豆素的有效方法。     

略阳乌鸡体尺性状指标与体质量的主成分分析

为研究略阳乌鸡体尺性状和体质量之间的内在关联性,在统一饲养条件下,对120只成年略阳乌鸡的体尺性状和体质量7个指标进行测定,选择累计贡献率达92.183 4%的5个主成分进行分析。结果表明:成年公鸡的体质量、体斜长、胸骨长、胫长、胸角均显著高于母鸡(P<0.05)。体尺指标胸宽、胸深、胫长及体质量在略阳乌鸡群体中的变异系数较大,选育潜力大。体质量与体斜长、胸宽、胸骨长、胫长呈极正显著相关(P<0.01),与胸深、胸角呈显著相关(P<0.05),其他性状间存在不同程度的相关性。主成分分析结果表明,各主成分的特征根分布较广,经统计计算入选的5个主成分所占信息的侧重各不相同,分别在一定程度上反映了略阳乌鸡的体型特征及今后选育的方向和重点。     

乌鸡肌卫星细胞的分离培养与鉴定

通过建立一种有效的乌鸡肌卫星细胞分离、培养及鉴定体系,为体外探讨家禽骨骼肌生长发育调控机制及骨骼肌损伤后修复的研究奠定基础。选取10日胚龄的乌鸡鸡胚为材料,采用Ⅰ型胶原酶和胰酶联合消化,差速贴壁法分离鸡肌卫星细胞,通过形态学识别和检测肌卫星细胞标志基因的表达等方法鉴定分离获得的细胞,并在低浓度血清培养基中诱导细胞成肌分化。结果显示:分离获得的细胞形态与肌卫星细胞相似;实时荧光定量PCR(q PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卫星细胞特异基因Paired protein box 7(Pax7)呈高水平表达;经成肌诱导分化后,细胞融合形成肌管,细胞免疫荧光法检测成肌分化标志基因肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,My HC)呈阳性表达。研究成功从鸡胚中分离获得肌卫星细胞,并具有良好的体外增殖和分化能力,为肌肉的发育和损伤修复研究提供良好的细胞模型。     

贵州马4个微卫星位点遗传多态性研究

用4个微卫星标记对20匹贵州马进行遗传多样性分析.结果表明在4个微卫星位点上存在遗传多态性,各位点平均有效等位基因数5.20、平均多态信息含量为0.745,平均杂合度0.825.表明贵州马保持了较为纯净的原始基因库.     

略阳乌鸡METTL21C基因克隆及超表达载体构建

旨在克隆略阳乌鸡 METTL21C基因,构建其超表达载体。采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测 METTL21C基因在略阳乌鸡7种组织中的表达,通过PCR扩增技术克隆 METTL21C基因完整的CDS区序列,分析其核苷酸序列及不同物种序列进化关系,将 METTL21C基因片段连接至pCD513B载体,构建其超表达载体并转染至293T细胞。结果显示: METTL21C基因在略阳乌鸡心肌中表达量最高,骨骼肌次之;克隆获得略阳乌鸡 METTL21C基因完整编码区序列,共747 bp,编码249个氨基酸残基,与原鸡的相应序列具有很高的同源性;构建的 METTL21C超表达载体能转染293T细胞并成功表达,可直接用于后续 METTL21C基因功能探索的研究。     

秦巴地区乌头类群的遗传多样性分析

采用随机扩增多态性（RAPD）标记技术对秦巴地区的3个乌头群体的遗传多样性水平进行了检测,在筛选的9条引物中检测出564个多态位点,各类群的多态位点百分率为24．95％（JP）、50．63％（YY）、50．46％（YC）。类群间的遗传一致度和遗传距离存在较大的差异,聚类分析发现野生圆头与家培类群前缘关系较近。Shannon多样度指数结果表明乌头群体遗传多态性丰,也说明本研究所选的引物用于乌头种质鉴定是可行的,这为乌头的遗传资源评价和鉴定提供了新的方法和理论基础。     

阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制 猪骨骼肌卫星细胞分化

【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1-3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。 待细胞汇合至70%-80%时,将培养基换成含50 nmol•L-1 渥曼青霉素（wortmannin,WM）的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8 天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化（P＞0.05）,非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组（P＜0.05）,而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降（P＜0.05）。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。