防止组织培养外植体接种后褐化的方法

防止组织培养外植体接种后褐化的方法组织培养外植体初始接种遇到最严重的问题是伤口酚类物质氧化变褐，而酚类物质及其氧化物对植物组织有害，因此必须去除。试用了四个苹果品种：ＧｒａｎｎｙＳｍｉｔｈ、Ｊｕｌｙｒｅｄ、Ｍｕｔｓｕ及短枝型金冠。研究表明下列方法可有...     

抗H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及初步鉴定

禽流感(A vian Influenza,AI)是由禽流感病毒(A vian Influenza Virus,A IV)引起的禽的烈性传染病,我国于1992年首次报道有A I存在。2003年12月以来,亚洲10余个国家和地区接连发生禽流感,上千万只鸡病死或被杀,越南和泰国犤2犦还出现了人感染禽流感而死亡的病例。关于禽流感病毒的诊断方法已有大量报道。虽然病毒的分离鉴定是诊断禽流感的一种可靠方法,但由于试验周期长,难以满足对高致病性禽流感快速诊断的需要。因此,建立禽流感快速诊断技术,预防和控制高致病性禽流感的扩散和侵入已成为当务之急。单克隆抗体具有对各个抗原决定簇的…     

蚓激酶成熟肽的原核表达及纯化

应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因，并按相应的阅读框架克隆入表达载体pGEX-4T中谷胱甘肽S-转移酶（GST）的下游。重组质粒转化大肠杆菌Rosetta株，分别在1．0mmol／LIPTG、37℃和0．1mmol／L IPTG、28℃条件下诱导，蚓激酶成熟肽-GST融合蛋白获得了高效表达，且后者得到了可溶性蛋白。经SDS-PAGE证实所表达的融合蛋白产物相对分子量与预期的53kD相符。并且以等电点和亲和层析的方法对表达出的可溶性蛋白进行了纯化。     

鸡贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备

鸡贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体，它广泛存在于世界各地，成为危害养禽业的主要病原之一。鸡贫血病毒基因组含有3个开放阅读框架，分别编码分子量为51.6kDa（VP1）、24kDa（VP2）和13．6kDa（VP3）的3种蛋白质。本文将克隆化VP2基因亚克隆到PET-32a（＋）载体上并进行原核表达，用PET-32a（＋）表达的VP2融合蛋白免疫Balb/c小鼠，经过杂交瘤细胞的建立、融合细胞的筛选和克隆化培养，获得一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为3C5。腹水单克隆抗体的ELISA效价为1：409600，经Western—blotting证明单抗3C5为针对VP2融合蛋白的单抗。为VP2融合蛋白的纯化和鸡贫血病毒的检测、鉴定和奠定了基础。     

鹿巴氏杆菌病的诊断

某市野生动物园一只年仅3个月的长颈鹿突然发病死亡。死前没有明显的临床症状,呼吸困难,有背脖反应。剖检发现主要以败血症变化为主。肺部淤血、水肿,出现虾肉样变,支气管内充满泡沫样液体;肝脏呈暗褐色,肾脏质脆,结构十分清晰;胃黏膜肿胀充血,也有点状出血点,肠黏膜有出血点;脾脏不肿大。心冠脂肪大面积点状出血,左右心室静脉有出血点。作者采用病料涂片、染色镜检、细菌分离培养、生化试验、动物试验和药敏试验等方法对该病病原进行了研究。通过一系列的实验室检验,结合本病的临床症状和病理变化,鉴定该病原为多杀性巴氏杆菌。     

反义技术及其选择性应用研究进展

反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合，通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译，从而抑制目的基因的表达，包括反义寡核苷酸技术、核酶技术和小干扰RNA技术。与基因敲除等功能缺失性研究方法相比，反义技术具有投入少、周期短、操作简单等优点，因此受到了广泛的关注。文中介绍了反义RNA技术、核酶技术和反义寡核苷酸技术等反义核酸技术的原理及其主要应用，对几种常用反义技术的选择性应用及存在的问题进行概述。     

EIAV主要基因的分子生物学研究

马传染性贫血病毒(EIAV)属反转录病毒科慢病毒属。EIAV的RNA基因组是慢病毒基因组中最短最简单的,除了编码结构蛋白gag、pol和env外,EIAV基因组还含有三个开放阅读框架,编码慢病毒中常有的Tat和Rev蛋白及S2蛋白。EIAV最吸引人的特点在于大多数受其感染的动物最终会抑制病毒复制而形成长期的隐性持续性感染,而正是由于慢病毒复杂的分子组成机制导致与其相关的慢病毒基因组中病毒蛋白的差异表达。因此,对EIAV主要基因的分子生物学研究对于其他慢病毒疫苗的研制具有重大的意义。     

疙瘩皮肤病概述

疙瘩皮肤病(LSD)又称结节性皮炎或块状皮肤病,是国际兽医局(OIE)规定的A类疲病之一。LSD是由LSDV引起的牛发热,皮肤、粘膜、器官表面广泛性结节,消瘦,淋巴结肿大,皮肤水肿为特征,严重时会引起死亡。此病能大幅度降低产乳量,并且损坏皮张,所以常带来较大的经济损失。目前,此病在非洲、以色列等国家和地区发生流行,我国还没有发生此类疲病。但了解其现状和预防措施是十分必要和重要的,本文仅就疙瘩皮肤病的病原、流行病学,临床与病理、诊断(病毒分离培养与实验室诊断),预防及控制等方面予以综述。     

司帕沙星在雏鸡体内药代动力学及残留的研究

选用30日龄健康海兰鸡65只,按5mg／kg体重口服给予司帕沙星,定期采样,以高效液相色谱法测定血浆、肝、肾、心、肺和肌肉中司帕沙星的含量,研究司帕沙星在鸡体内的药动学与残留。结果表明:司帕沙星在血液中经时过程符合一级吸收二室开放模型,其主要动力学参数如下:t1／2α0.9585h,t1／2β11.7447h,tmax0,6514 h,Cmax0.5271 μg／ml,AUC1.7908mg／L／h。肾脏、心脏的药时数据符合一级吸收二项指数方程,其主要动力学参数分别为:t1/2Ka0.3733 h、0.1530h,t1／2k1.3007 h、2.1013h,tmax1.01420h、0.6239 h,Cmax2.1104μg／ml、1.6721 μg／ml,AUC6.51764 mg／L／h、6.2286mg／L／h。司帕沙星在肝脏、肺脏、肌肉中的经时过程符合一级吸收三项指数方程,主要动力学参数分别为t1/2α0.3672 h、0.6156 h、1.5835 h,t1/2β3.9998 h、15.0271 h、12.0103h,tmax0.7458 h、0.7322 h、1.3726 h,Cmax4.4709μg／ml、2.5267μg／ml、0.9760μg／ml,AUC20.893 mg／L／h,27.242 mg／L／h、9.7943mg/L/h。建议司帕沙星在鸡体内的休药期为7d。