9种细菌成分及其代谢产物对鲫鱼免疫功能的影响

将9种细菌细胞成分及其代谢产物分别添加入饵料投喂鲫鱼,连续投喂35 d,每隔7 d检测鲫鱼白细胞吞噬活性(phagocytic activity)、吞噬细胞杀菌活性(bactericidal activity)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismu- tase,SOD)活性、溶菌酶(lysozyme)活性和血清凝集抗体效价(agglutinating antibody titer),以研究这9种细菌细胞成分及其代谢产物对鲫鱼免疫功能的影响。结果表明,蜡状芽孢杆菌蕈状亚种组(Bacilluscereussubsp mycoides)、噬菌蛭弧菌组(Bdellovibro bacteriovorus)、皮杆菌组(Dermabater sp．)和蜂房芽孢杆菌组(Bacillus alvei)鲫鱼白细胞的吞噬活性、吞噬细胞的杀菌活性、SOD酶活性、溶菌酶活性与对照组相比,均呈极显著性差异(P<0．01),这4 种细菌的细胞成分及其代谢产物均能增强鲫鱼的细胞和体液免疫功能。此外,血清凝集抗体效价的测定结果表明, 蜡状芽孢杆菌蕈状亚种组效价最高,为1:256,噬菌蛭弧菌组、皮杆菌组和蜂房芽孢杆菌组最高效价分别为 1:128,1:64和1:64。在以上4种细菌中,除蜂房芽孢杆菌组的血清凝集抗体效价峰值出现在第14天外,其余3 组各项检测指标的峰值均出现在第21天。     

银杏酚酸杀灭鱼类病原菌和指环虫的研究

提取银杏外种皮中的银杏酚酸,测定了其含量,并对其杀灭鱼类病原菌和指环虫的活性进行了研究。结果表明,分离物中银杏酚酸的总含量为867 m g/g,各单体C15∶1,C17∶1,C13∶0,C15∶0,C17∶2的相对含量分别为499,226,201,32和29 m g/g;银杏酚酸对鱼害粘球菌的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(M BC)均为7.81μg/mL,对鳗弧菌、点状产气单胞菌点状亚种、嗜水气单胞菌3株病原菌无明显的抑制效果,其M IC和M BC值均大于1 000μg/mL;银杏酚酸对指环虫的最佳杀虫浓度为1.70 m g/L,48 h杀灭率达95%~100%;其质量浓度为3.5m g/L时试验金鱼开始出现中毒现象,48 h的死亡率为60%。     

灰树花多糖对鲫鱼免疫功能的影响

以灰树花多糖（Polysaccharide of Grifola frondosa，PGF）药饵连续投喂鲫鱼35d，通过测定血清凝集抗体效价、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）活性、离体白细胞吞噬活性（phagocytic activity）、吞噬细胞杀菌活性（bactericidal activity），研究灰树花多糖对水产动物特别是鲫鱼免疫功能的影响。试验设计以不同剂量（分别为250mg／kg鱼体重、400mg／kg鱼体重、500mg／kg鱼体重、600mg／kg鱼体重、1000mg／kg鱼体重）的灰树花多糖药饵饲喂试验鲫鱼，分别于第0、7、14、2l、28、35d用血凝板法、MTT染色法进行免疫学指标测定。结果表明，各添加水平均可增强鲫鱼的免疫功能，其中剂量为400mg／kg、500mg／kg和600mg／kg的吞噬活性及杀菌活性与对照组相比存在极显著性差异（P〈0．01），而剂量为250mg／kg、1000mg／kg时，杀菌活性均与对照组相比存在显著性差异（P〈0．05）；400mg／kg组、500mg／kg和600mg／kg组的SOD活性与对照组相比存在极显著性差异（P〈0．01）；400mg／kg组、500mg／kg和600mg／kg组的血清凝集抗体效价最高为1：256，250mg／kg和1000mg／kg组的血清凝集抗体效价最高为1：32。各项指标的峰值出现在第2～3周。     

酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中的应用研究

研究了酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中应用的可行性。用不同比重的淋巴细胞分离液对鳜外周血中的淋巴细胞进行分离,结果表明比重为1.080的分离液可最大程度地将鳜外周血中的淋巴细胞分离出来。用酸性α-醋酸萘酯酶染色法对分离出的淋巴细胞进行染色,结果显示最佳的染色条件为在pH6.0~6.5的孵育液中37℃孵育90 m in,然后2%甲基绿37℃复染10 m in,酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞胞核被染成绿色而胞浆被染成红色,阴性细胞胞核和胞浆都被绿染。对正常未免疫鳜与嗜水气单胞菌脂多糖和鳜病毒主要衣壳蛋白免疫一周后的鳜外周血淋巴细胞染色计数,结果酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞所占的比例分别为15%~18%、33%~40%和26%~29%,方差分析表明免疫组与对照组阳性率差异极显著,说明α-醋酸萘酯酶染色法可用于鳜细胞免疫水平的检测。     

20味中药对鳗弧菌的药敏试验

鳗弧菌病是养殖及淡、海水水产动物的重要疾病之一。该病在全球范围内广泛发生,目前对该病的防制主要利用化学药品、抗生素或减活、灭活疫苗。通过20种中药对鳗弧菌抑菌、杀菌作用的研究,用2种常用抗生素类药物作为对照。结果表明,黄芩、白头翁、鱼腥草、五倍子、石榴皮4种中药对鳗弧菌的抑菌作用效果显著。     

鲫鱼、草鱼肠道吸收、转运酪氨酸和脯氨酸的研究

采用同位素示踪法和肠道离体灌流模型研究了鲫鱼和草鱼肠道对酪氨酸(Tyr)、脯氨酸(Pro)的吸收量、吸收速率、跨壁运输量与氨基酸灌流时间和灌流浓度的关系。结果表明:随着Tyr、Pro灌流浓度的增加,鲫鱼、草鱼肠道的吸收速率与其浓度均呈正相关关系。但鲫鱼对Tyr、Pro的吸收转运速度明显高于草鱼。随着鲫鱼、草鱼肠道内Tyr、Pro灌流的浓度逐渐下降,留存于其肠道的两种氨基酸的比例也随之下降,而通过肠道转运到肠道外的比例则逐渐增加,但草鱼转运到肠道外的比例极显著低于鲫鱼(P<0.01)。一般,鲫鱼肠道对Tyr、Pro的总吸收率随着灌流氨基酸浓度的下降而下降,草鱼肠道对Tyr总的吸收率随着灌流氨基酸浓度的下降而呈上升趋势。对Pro的总吸收率以5mmol.L-1组(8.14%)最高。且鲫鱼对Tyr、Pro的总吸收率低于草鱼相应的氨基酸浓度组。     

自制“鱼病康—Ⅱ”对美蛙膨气红腿病的防治试验研究

新研制的中西药“鱼病康－Ⅱ”对美国青蛙膨气红腿病病原菌嗜水气单胞菌和假单胞菌有强烈的杀灭作用。其最小抑菌浓度（ＭＩＣ）为０．００２ｍｇ／ｍＬ，最小杀菌浓度（ＭＢＣ）为０．００４ｍｇ／ｍＬ，中药Ａ剂和西药Ｂ剂的ＦＩＣ指数为０．６２２，杀菌时呈显著协同作用效应。给蝌蚪和蛙以１０倍高剂量连续投服“鱼病康－Ⅱ”７ｄ无明显毒副作用。     

第三代喹诺酮类“鱼虾康—Ⅰ”的应用研究

用１种第三代喹诺酮类药物进行４种水产动物病原菌，肠型点状气单胞基本国策 ，荧光假单胞菌，嗜水气单胞菌，鳗弧菌的药效研究和安全性评价。最小抑菌浓度（ＭＩＣ）分别为０．３９，１２．５，０．２，０．２μｇ＝ｍＬ，均为高度敏感。依据该种喹诺酮类的药产学，药动学和这特性，设计出新鱼药“鱼虾康－Ⅰ”，其一般预防剂量为０．１０－０．１５ｇ／（ｋｇ．ｄ），治疗旧为０．２－０．３ｇ／（ｋｇ．ｄ）。     

鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定

从陕西省甘养殖场送检的病鱼中分离到1株革兰氏阴性杆菌，培养特征观察笔生化特性分析结果证实为嗜水气单胞菌；小鼠和金鱼致病性试验证实分离菌具有致病性；药敏试验结果表明该菌对链毒素、万古霉素等高度敏感，对羧苄青霉素、氟哌酸等不敏感。用该菌制成灭活免疫金鱼保护力可达到80％以上。     

17种天然植物提取物杀灭鱼类指环虫研究

以寄生在金鱼鳃部的中型指环虫为指示寄生虫,采用活体感染和活体杀虫的方法,研究了17种天然植物提取物杀灭鱼类指环虫的效果,并对其中杀虫效果最好的3种植物的杀虫活性做了进一步的评价.通过活体杀虫试验表明,重楼、鸦胆子和七叶树种皮提取物效果最好,在浓度36.0、550.0、8.0 mg/L时,48 h平均杀虫率分剐为96.1%、94.0%和94.4%;龙葵和胆南星提取物也具有一定的杀虫效果,其平均杀虫率均在80.0%以上;紫花地丁、南瓜籽、鹤虱、木贼、马鞭草、苍耳、合欢提取物平均杀虫率在50.0%～80.0%之间;姜黄、鹅不食草、射干、香薷、前胡提取物48 h平均杀虫率在20.0%～50.0%之间.3种杀虫效果最好的植物是重楼、鸦胆子和七叶树种皮,对中型指环虫48 h的ED50分别为17.7、402.0、4.7 mg/L.