禽流感病毒快速检测中的纳米磁珠分离器设计及试验

为实现禽流感病毒快速检测中的纳米级免疫磁珠分离,该文设计了一种便携式环形六孔纳米磁珠分离器,通过瓦型钕铁硼永磁体的合理布局,采用高导磁率的坡莫合金制作导磁片并贴合离心试管外壁锥度,实现了满足试验要求的6个局部强磁场区域,实测分离器分离空间磁感应强度达1166.2 mT,最大磁场梯度达152.7 T/m。为考核磁分离器分离效率,分别开展了多点磁感应强度测量、磁珠分离效率初步观察、透射电镜辅助观察等定性试验,并从定性和定量角度分别采用灭活的禽流感H5N1病毒和大肠杆菌E.coli O157:H7,结合Dot-ELISA和平板菌落计数方法进行了30、100和180 nm磁珠分离效率考核试验。试验结果表明:对于30、100和180 nm磁珠,当分离时间分别大于等于60min、60和40s时,磁珠分离器对3种磁珠捕获效率均在96.5%以上,分离上清液中均无残留磁珠,磁分离系统稳定可靠。     

猪流感疫苗研究进展

猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性高度传染性疾病,可引起病猪高热、食欲不振、呼吸困难、孕猪流产、延迟出栏等,同时该病常继发其他细菌病感染,严重危害养猪业的发展.由于该病具有重要的公共卫生意义,因此研制安全有效的疫苗尤其重要.目前对猪流感疫苗的研究热点主要集中在表位疫苗和利用反向遗传构建弱毒疫苗.论文针对国内外猪流感疫苗的研究情况做了系统描述,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、DNA疫苗、载体疫苗等,旨在为新型疫苗的研制提供参考.     

鸭RIG-1基因的PCR扩增及其序列分析

维甲酸诱导基因1(RIG-1)是细胞质中侦测病原相关分子模式的识别受体。论文旨在扩增北京鸭RIG-1编码基因,并对其进行序列分析。通过PCR方法,从北京鸭脾脏中扩增得到RIG-1基因cDNA,并使用LaserGene分子生物学分析软件进行序列分析。结果发现北京鸭的RIG-1基因cDNA开放阅读框全长2 802bp,编码933个氨基酸。结构预测发现鸭RIG-1结构与哺乳动物类似,N端有两个串联CARD区,中间为DExD/H解旋酶区,C端为抑制区,各功能区起重要作用的氨基酸较为保守。同源性及进化树分析发现鸭RIG-1与鹅和斑马鱼的同源性最高分别为93.7%、78.4%,与哺乳动物同源性高于50%,与其他鱼类的同源性低于50%。成功扩增出北京鸭RIG-1基因cDNA编码序列,为鸭RIG-1的深入研究奠定了基础。     

六种牛口腔糜烂性传染病的鉴别诊断

在我们临床出诊过程中,经常遇到一些口腔症状相似的易混淆的牛的传染病。为了正确诊断出结果,准确地进行防治,特列举六种常见的极易混淆的口腔糜烂性牛传染病加以鉴别,以备各位兽医工作者参考之用。 1.牛口蹄疫 闭口流涎,呈牵丝状或泡沫状;上下唇内面、齿龈、舌面粘膜发生核桃或蚕豆大小的水疱,破溃后形成边缘不齐的糜烂,而后深入形成溃疡,最后结痂愈合,病牛多取良性经过。此病发病率新疫区可达100％,老疫区可达50％以上;病死率成年牛     

H5N1亚型AIV NS1基因在大肠杆菌中的表达

根据已测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列,设计并合成一对特异性引物NS1U/NS1L,利用RT-PCR方法扩增出该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a( )上,通过酶切分析及序列测定,鉴定出了NS1基因片段的阳性重组子。转化BL21大肠杆菌感受态细胞后,经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,成功表达出大小约45.0kD的NS1融合蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。用West-ern-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别。     

我国近阶段禽流感的流行特点分析与防控对策建议

文章在分析H5亚型、H9亚型、H6亚型及H7亚型禽流感形势的基础上,研判了我国禽流感的流行趋势,并提出了防控对策.     

基于鸡头特征的病鸡识别方法研究

健康黄羽鸡鸡冠鲜红、纹理均匀,鸡眼圆润有神,病鸡鸡冠萎缩变色、鸡眼半闭或全闭。本文提出了一种基于鸡冠及鸡眼构成的鸡头特征信息的病鸡识别方法。首先通过R、G、B分量色差信息去除背景,分析鸡身和鸡冠样本区域H分量分布特点,提取H分量分割阈值分割黄羽鸡。再利用H分量进行阈值分割得到黄羽鸡和鸡冠鸡垂。提出一种利用鸡冠和鸡垂轮廓上两点距离小于阈值的鸡头合并算法,再通过修正算法识别鸡头。在鸡头中,分别提取鸡眼瞳孔轮廓并获取形状几何特征,提取鸡冠的H分量共生矩阵特征,构成基于鸡头特征,采用ARA特征选择算法获得病鸡特征向量,采用支持向量机(SVM)分类器进行训练分类。实验结果表明,病鸡识别正确率为92.5%,表明利用机器视觉获取鸡头特征进行病鸡识别具有可行性和研究价值。     

基于HPAIV实验活动的实验室生物风险分析方法的建立

高致病禽流感病毒(HPAIV)的实验活动必须在生物安全三级(BSL-3)实验室开展,对HPAIV开展生物风险分析,是保证实验室生物安全工作的前提。结合相关标准和华南农业大学兽医学院的工作实际,建立了针对HPAIV实验活动的实验室生物风险分析方法。     

2008年禽流感发生情况及2009年流行趋势与防控对策建议

1 2008年禽流感发生情况2008年，我国继续实施以灭活疫苗免疫为主的预控措施，H5亚型高致病性禽流感的疫情基本有效控制，流行态势较平稳。与往年相比，疫情有以下特点：（1）与2007年相比，2008年H5亚型高致病性禽流感疫情数量有所攀升（表1）。全年报告和公布9起疫情，发病家禽4万多只，死亡家禽1万多只，扑杀家禽70万只。其中，7起疫情集中发生于上半年，     

一株鸭源H3N6亚型禽流感病毒遗传进化分析

从活禽交易市场健康鸭体内分离到一株H3N6亚型禽流感病毒,命名为A/Duck/Guangdong/E9/2012(H3N6),这是该亚型禽流感病毒在我国广东地区的首次分离报道.为分析其遗传进化特征,对该病毒全基因组序列进行了测定,进行了遗传进化分析.结果显示,其HA裂解位点附近的氨基酸序列为PEKQTR↓ GLF,只含有1个碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒的HA裂解位点氨基酸序列的分子特征;其HA基因与2011年蒙古国分离的鸭源A/Duck/Mongolia/OIE-7457/2011(H3N5)禽流感病毒的HA基因同源性最高,其NA基因与2011年蒙古国分离的鸭源A/Duck/Mongolia/OIE-7438/2011(H4N6)禽流感病毒的NA基因同源性最高.全基因组分子遗传进化分析结果显示,其8个基因均属于欧亚谱系的禽源进化分支.