食用菌属间原生质体融合研究初报

范雷法等进行试验，首先确定潮霉素浓度对香菇和平菇菌丝及其原生质体再生的影响；其次进行了温度和时间对平菇原生质体灭活效果的研究；然后利用香菇和平菇再生原生质体对潮霉素抗性的差异，结合平菇原生质体灭活为融合子筛选依据，在融合剂诱导下获得4株融合子。     

草菇原生质体制备、再生及转化研究

用酶解法对草菇原生质体制备及再生条件进行了研究.结果表明: 液体静置培养4 d的菌丝,以0.6 mol/L的甘露醇作渗透压稳定剂,溶壁酶质量浓度15 mg/mL,34 ℃下酶解3 h,原生质体制备率最高;草菇原生质体预培养16 h后涂布在再生培养基上,再生率最高.同时,采用PEG法将潮霉素抗性基因转入草菇的原生质体中,经过抗性筛选,得到了具有潮霉素抗性的草菇转化子.     

转Cry1A(b)基因抗虫水稻的获得及鉴定

利用农杆菌混合液介导的共转化法,研究不同浓度的农杆菌混合液浸染5种水稻品种的愈伤组织,进而获得共转化再生植株。对转基因植株进行叶片潮霉素抗性检测和螟虫田间抗性鉴定的结果表明,农杆菌混合液浓度OD600为0.6左右时,其浸染能力较强;5个品种中以浙粳27的再生效率最高。转基因植株叶片经潮霉素抗性检测,潮霉素阳性率为78.13%,经PCR检测转基因植株Cry1A(b)基因阳性率为15.11%。自然抗性鉴定结果表明:Cry1A(b)基因阳性的转基因植株对稻纵卷叶螟具有很好的抗性。基因分离的鉴定结果表明:HPT基因与Cry1A(b)基因在共转化转基因植株的后代中发生了分离。     

卡那霉素和潮霉素对芦竹不定芽诱导与生长的影响

[目的]研究组培条件下芦竹（Arundo donax Linn.）对植物基因工程常用抗生素卡那霉素和潮霉素的敏感性,为芦竹基因工程载体构建及转基因植株筛选奠定基础。[方法]芦竹外植体预培养3 d后接种于添加不同浓度卡那霉素或潮霉素的不定芽诱导培养基中培养,研究2种抗生素对芦竹外植体不定芽诱导及生长的影响。[结果]2种抗生素在一定浓度下对芦竹外植体不定芽诱导和生长都有影响。潮霉素浓度在5～50 mg/L时,随着浓度增大,对芦竹不定芽诱导及生长的抑制作用均增强;浓度达到50～100 mg/L时,外植体生长、分化逐渐停止直至死亡。卡那霉素浓度在5～100 mg/L时,对不定芽诱导产生促进作用。[结论]潮霉素在较低浓度下对芦竹外植体不定芽诱导和生长产生抑制作用,适合作为芦竹转基因选择标记。     

沈水湾公园典型植物群落结构调查与研究

以沈水湾公园内的20个样地为对象进行植物群落结构的调查与研究。分析了样地内植物的组成、群落的层次结构特征和季相特征。结果表明,沈水湾公园植物群落的物种组成过于集中,相同物种规格相近;水平结构为片状组合,混交性较差;垂直结构为乔灌草3个层次,其中乔木层的优势最明显,灌木层和草本层的优势较差;季相上虽在栽植时考虑到了四季有景,但常绿树种的数量仍十分有限。通过沈阳地区最常见的自然植物群落--油松栎林的结构特征对沈水湾公园植物群落提出了优化对策。     

潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达

以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传代稳定,潮霉素抗性有了较大的提高,从100μg/mL提高到了400μg/mL以上,而产纤维素能力只略有下降。     

杨树对潮霉素的敏感性研究

以山新杨、欧美杨、小黑杨无菌苗的幼叶、叶片分化的不定芽、茎段为外植体,研究了其对潮霉素的敏感性。结果表明:叶片分化时山新杨和欧美杨的潮霉素敏感性为2.0 mg/L,小黑杨为3.0 mg/L;不定芽生长和生根时山新杨和小黑杨的敏感性为2.0 mg/L,欧美杨为1.0 mg/L;茎段生长和生根时山新杨和小黑杨的敏感性为6.0 mg/L,欧美杨为2.0 mg/L。     

大豆子叶节对潮霉素敏感性研究

标记基因的利用是筛选和鉴定转基因植株的有效方法,使用潮霉素能抑制植物的生长.选用3个基因型大豆为材料,以褐化率、分化率为指标,研究了不同质量浓度潮霉素对大豆子叶节分化和丛生芽生根的影响.结果表明不同基因型大豆对潮霉素的敏感性不同,潮霉素对大豆子叶节适宜筛选浓度黑农35为6 mg·L-1、合丰35和合丰25为4 mg·L-1;丛生芽生根筛选浓度黑农35为2 mg·L-1、合丰35和合丰25为1 mg·L-1.     

鸡爪槭金陵丹枫组培再生体系的建立

鸡爪槭新品种金陵丹枫叶色绚烂,是优质的彩叶树种.以金陵丹枫带芽茎段为外植体,75％乙醇40 s+0.1％氯化汞20 min消毒效果最佳.以NN69为基本培养基,筛选获得最适宜的启动培养基为NN69+0.1 mg/L IBA,增殖培养基为NN69+0.4 mg/L KT+0.1 mg/L IBA,生根培养基为NN69+0.3 mg/LIBA.探讨了金陵丹枫不定芽对羧苄青霉素和潮霉素的敏感性,筛选获得羧苄青霉素的临界值为300～400 mg/L,潮霉素的临界值为2.5 mg/L.