玻璃化法超低温保存地黄茎尖

地黄属多年生药用草本植物,其块根是我国著名的"四大怀药"之一.由于地黄属异花授粉,种子不能够用作保种,因而生产上常采用其块根来作保种,但田间繁殖易受气候、栽培条件及病虫害的影响,造成块根感染致使病毒种质退化,甚至优良种质的丢失.     

patatin启动子调控烟草液泡转化酶抑制子在马铃薯抗低温糖化中的作用

为了降低马铃薯(Solanum tuberosum )块茎低温贮藏下还原糖的积累，实验构建了马铃薯块茎特异性启动子（CIPP）调控的烟草液泡转化酶抑制子Nt-VIF基因表达载体pBICNI，并转化马铃薯植株。PCR、Northern杂交和Southern杂交分析结果显示，CIPP调控的Nt-VIF基因全长cDNA成功地导入鄂马铃薯3号（E-3）植株。14个转基因株系块茎分别贮藏在4℃和20℃条件下，贮藏1个月后进行还原糖含量和液泡酸性转化酶（VI）活性测定。结果表明，在20℃条件下转基因株系块茎还原糖（RS）含量与对照相比差异不明显，在4℃条件下RS含量则显著下降，与对照相比下降幅度从34%（株系B-13）至76.8%（株系B-1），说明Nt-VIF cDNA在马铃薯中的表达，成功地抑制了液泡酸性转化酶的活性，导致还原糖含量降低。进一步分析表明，转基因块茎低温贮藏其液泡转化酶活性与还原糖含量呈显著的正直线相关（VI = 0.3084RS + 0.0673）。实验获得的B-1、B-2、B-6、B-9、B-14等5个转基因株系，块茎低温贮藏后能直接满足炸片加工对还原糖含量的要求。     

SSR标记的彩色马铃薯遗传多样性分析及指纹图谱构建

彩色马铃薯(指块茎的皮或肉为红、蓝、紫、橙色等)近年来日益为育种工作者所关注,很多彩色马铃薯品种(系)从形态学上难以鉴定是否为同一基因型,给育种工作带来诸多不便。本研究利用SSR标记对50份彩色马铃薯(Solanum tuberosumL.)材料进行了遗传多样性分析及指纹图谱构建。研究筛选出56对马铃薯SSR引物,对50份材料的基因组DNA进行PCR扩增,共检测出236个等位位点,其中多态性位点230个,多态性比率达97.46%。分析显示,基因型间遗传相似性系数在0.50~1.00之间。UPGMA聚类分析表明,在相似系数0.63处可将全部材料分为3大类。利用5对核心引物构建了50份供试材料的指纹图谱,并证明其属于44个基因型的,为彩色马铃薯资源鉴定和利用提供了依据。     

利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术快速鉴定两个马铃薯晚疫病抗性相关EST片段EL732276和EL732318的功能

马铃薯晚疫病是由致病疫霉[Phytophthora infestans(Mont.)deBary]引起的第一大作物病害,目前已严重限制了全球马铃薯的生产和发展。马铃薯晚疫病抗性分子机理的研究一直是抗病育种中的热点问题。本研究利用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术,在本氏烟草(Nicotina benthamiana)中沉默两个马铃薯晚疫病水平抗性相关的基因片段EL732276和EL732318。目的基因沉默后的烟草接种晚疫病菌P.infestans,根据病斑生长速率LGR(length grow rate)来了解这两个基因是否参与烟草对晚疫病的抗性反应。结果表明,目的基因片段EL732276和EL732318被成功地插入烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体中。利用携带八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturae,PDS)的TRV重组载体病毒接种烟草,感染病毒的烟草植株表现光漂白现象,说明VIGS体系有效。用携带目的片段的重组载体病毒TRV:EL732276和TRV:EL732318感染烟草植株,一个月后,烟草叶片接种晚疫病菌P.infestans,从接种P.infestans的烟草叶片上可以看出,感染TRV空载体的对照烟草叶片上病斑扩展速率非常缓慢,而目的片段EL732276和EL732318沉默后的烟草叶片可见明显的水浸状病斑和少量白色的晚疫病菌菌丝。进一步的分析表明TRV:EL732276重组载体病毒侵染的烟草接种P.infestans后LGR值极显著上升,TRV:EL732318病毒侵染的烟草接种P.infestans后LGR值显著上升,表明EL732276和EL732318同源基因在烟草中沉默后,烟草对P.infestans的抗性显著降低。研究结果认为,病毒诱导的基因沉默技术可在本氏烟草中初步快速鉴定马铃薯抗病相关基因的功能。     

水稻分蘖期耐淹能力评价及不同淹涝强度对重要农艺性状的影响

对不同品种水稻分蘖期耐淹能力及不同淹涝强度对一些农艺性状的影响进行了研究,结果表明:(1)淹后叶片相对成活率和茎蘖耐淹能力评分可作为评价水稻分蘖期耐淹能力的指标,供试品种可划分为耐淹、中性、敏感3种类型;(2)随着淹涝强度的增加,淹后株高一般表现出“矮-高-矮”的变化,始穗期推迟时间为:敏感品种>中性品种>耐淹品种,产量性状受影响程度为:敏感品种>中性品种>耐淹品种。     

马铃薯种薯退化与试管薯应用技术

以生物技术途径生产的马铃薯试管薯不带病原，纯度高，种薯质量好，能工厂化作业，周年生产，就近供应。既可以节约相当于播种面积１０％以上的种薯繁殖田和相当于总产量约２０％的种薯，还要改变传统的马铃薯种植方式，从根本上解决种薯退化问题，最大限度地发挥新品种增产潜力。     

“灭蛾灵”防治小蓑蛾效果好

“灭蛾灵”即苏云金杆菌血清3型H_3—6—11的一种菌株。它的致死机理主要是在害虫取食的过程中,菌体随植物叶组织经口进入害虫体内,在里面分裂繁殖,先破坏中肠肠壁的上皮细胞,并使之与肠壁脱离,由此引起食欲不振,表现拒食现象。细菌在中肠附近繁殖很快,最后穿孔进入血腔,这时伴孢晶体的毒源也在其中     

马铃薯试管块茎诱导过程中mRNA差异显示分析

试验采用DD-PCR技术,对马铃薯试管块茎诱导初期的mRNA表达进行了差异显示分析。结果表明,块茎形成过程中,除了有新的基因表达开启外,还有一些基因表达关闭,同时还伴随着许多基因的表达强度增强,表明块茎形态建成是一系列基因协同作用的结果。     

春秋两季马铃薯微型薯休眠期及发芽特性比较分析

本研究以Favorita和南中552两个早熟品种的微型薯为试验材料,对春秋两季生产的微型薯在4℃和20℃条件下贮藏的休眠期及其发芽动态进行了系统观察。结果表明,两个基因型在20℃和4℃下贮藏,春季微型薯休眠期比秋季分别短30d左右和60d左右,有光贮藏的微型薯打破休眠的时间比黑暗贮藏时分别延长一周和两周。块茎打破休眠后,发芽动态呈"S"曲线,但生产季节、贮藏温度间存在显著差异。春季微型薯发芽持续时间均长于秋季微型薯,低温贮藏使发芽持续时间更加延长。     

马铃薯试管块茎形成机制的研究—暗处理与光照时间对试管块茎形成的…

试验采用“Ｍｉｒａ”、“８７Ｐ４８－６４”两个栽培品种的脱毒苗为材料，在培养温度２０℃、诱导温度１８℃条件下，小苗生长４周后，采用不同天数黑暗处理诱导，再分别转入长日照和短日照条件下培养８周，观察统计不同处理的试管块茎形成能力，试验结果表明，黑暗处理和短日照条件对试管块茎的形成是有利的，试验中以黑暗处理两天，每天光照８小时的处理单株结薯总数最多。