三倍体毛白杨PtDRG02基因启动子的瞬时表达分析

本研究利用PCR技术从三倍体毛白杨（（Populus tomentosaxP．bolleana）xP．tomentosa）基因组DNA中扩增获得抗病相关PtDRG02基因的一个启动子区（包括其下游5’端非编码区序列）,命名为Ptp01。以β-葡萄糖苷酸酶（舢）基因为报告基因,构建了PtDRG02基因启动子植物表达载体Ptp01／gus。以根癌农杆菌EHA105及LBA4404感受态细胞为受体,转化植物表达载体Ptp01／gus进行瞬时表达,并对启动子进行了功能活性分析,结果表明该启动子能够驱动gus报告基因在毛白杨叶片组织中表达,但表达强度弱于花椰菜花叶病毒（CaMV）35S启动子。     

表达豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因杨树的蛋白检测

对转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因的三倍体毛白杨杂种 [(毛新杨×毛白杨 )×毛白杨 ]的可溶性总蛋白和胰蛋白酶抑制剂蛋白的含量进行测定 .结果发现 ,与未转基因植株相比 ,所有供试转基因株系叶片中的总可溶性蛋白含量明显增加 ,但老叶的含量高于嫩叶 ,这表明转基因株系可溶性总蛋白含量增加可能是CpTI基因表达的结果或由于外源基因导入后引起杨树基因组中某些自身基因的表达所致 .转基因株系叶片中有较高含量CpTI,而对照叶片则检测不到CpTI,这进一步证实了CpTI基因已在转基因株系中得到稳定表达 .进一步比较发现 ,在供试的 5个无性系中 ,TG0 7、TG0 4和TG71在总蛋白含量和CpTI含量增加较为明显 .另外 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳胶分析发现 ,与未转基因植株相比 ,在所有供试转基因株系叶片中均出现一条分子量为 11.3kD的清晰蛋白带     

运用基因组和EST数据库进行电子克隆分离杨树功能基因的策略

杨树是重要的造林绿化树种,也是主要的工业用材树种,还是高大林木的模式树种.进行杨树功能基因的挖掘、克隆和功能的研究,是当前杨树基因组学的首要任务之一,不仅可为杨树品种改良和基因资源的有效利用奠定基础,而且对探讨林木的生理及遗传特性分子机制也具有重要的理论意义.电子克隆是近年来伴随着基因组计划和EST计划发展起来的基因克隆新方法,具有成本低、速度快、技术要求低和针对性强等优点.丰富的杨树EST数据和公布的杨树基因组序列框架图,使得利用电子克隆技术开展杨树功能基因的分离和鉴定已经成为可能.本文阐述了电子克隆分离杨树功能基因的基本方法、相关的生物信息资源,并讨论了电子克隆技术存在的问题和未来发展.     

CaCl2在毛白杨幼苗抗冻性低温诱导中的作用

不同浓度的CaCl2 处理对毛白杨幼苗抗冻性的提高效应是不同的 ,其中 10mmol·L-1CaCl2 处理更有利于幼苗抗冻性的提高 ,而且处理最适宜时间为 5天 .低温锻炼不仅提高了毛白杨幼苗叶片和枝条中钙调素含量 ,同时也提高了幼苗抗冻性 .CaCl2 处理对低温锻炼的作用有加强效果 ,而钙离子螯合剂EGTA、钙离子通道阻断剂LaCl3 或钙调素拮抗剂CPZ处理则减弱低温锻炼效应 ,表现出CaM含量和幼苗抗冻性明显降低 .这表明Ca2 + CaM可能参与了幼苗抗冻性的诱导     

表达豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因杨树的虫试试验

将转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因的三倍体毛白杨回交杂种 [(毛新杨×毛白杨 )×毛白杨 ]]于春季萌发前截干 .用萌条上的树叶对 3种主要杨树害虫 :天幕毛虫 (Malacosomadisstria)、舞毒蛾 (Lymant riadisparL .)和杨雪毒蛾 (StilpnotiacandidaStaudinger)进行离体虫试试验 ,年底测量各转基因株系萌条树高和地径 ,以衡量其生长性状 .结果发现 ,与对照相比 ,转基因株系的树高和地径没有显著降低 ,说明外源基因的导入没有影响转基因杨树的速生特性 ,相反 ,TG0 4的树高和地径较对照有明显的提高 ,这可能是外源导入后促进转基因杨树生长的结果 ;转基因植株均能显著提高害虫的死亡率 ,降低幼虫的排粪量、蛹重、体重增加量和成虫的产卵量 ;其中 ,TG0 7、TG0 8和TG713个转基因株系的抗虫特性较为突出 ,表明CpTI基因在它们的树体内表达较为活跃和稳定     

低温锻炼对香蕉幼苗能量代谢和抗冷性效应的研究

以不同品种及同一品种不同苗龄的香蕉幼苗为材料,以６－磷酸葡萄糖脱氢酶（Ｇ６ＰＤＨａｓｅ）和腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性的动态变化为依据,研究３℃低温锻炼对香蕉幼苗代谢途径改变和能量变化与抗冷性的效应。结果表明,低温锻炼提高了各种香蕉幼苗的Ｇ６ＰＤＨａｓｅ和ＡＴＰａｓｅ活性,但不同品种及相同品种不同苗龄苗提高程度不同,抗冷性较强的品种（巴西）提高幅度较小,苗龄较小的瓶苗提高程度大于苗龄较大的袋苗。进一步分析发现,上述２种酶活性变化与幼苗抗冷性提高密切相关。      

“生物化学实验”课程开展思想政治教育的探索

立德树人是高校人才培养的中心环节。落实课程思政理念是高校构建“三全”育人目标的重要举措。“生物化学实验”课程是北京林业大学食品科学与工程专业的一门必修的学科基础课程，课程内容涉及面广、实践应用性强，是培养学生理论联系实际，科研创新能力和科研思维的重要实践课程。然而，传统的实验课程教学仍多以教师为主导、采用灌输式、形式化的教学模式，注重知识的传授与实验技能的培训，忽视了实验课程与思想政治教育的深度融合。因此，针对北京林业大学创新型高素质食品专业人才培养目标，依据“生物化学实验”课程教学特点和课程内容，分析了在“生物化学实验”课程中开展思想政治教育的必要性，从育人教学目标制定、思政教育资源挖掘、教学环节设计以及开放性实验管理和量化式成绩评价体系建立等方面构建了专业教育与思想政治教育相融合的课程教学体系，并在课程实验环节进行了具体实践，实现了知识传授、能力培养与价值引领的同步效应，极大地促进了学生综合素质和科学创新能力的提升，能有效地服务于一流本科建设和一流人才培养。