恩诺沙星单克隆抗体的制备及其鉴定

采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法合成恩诺沙星的人工抗原,结合比为15∶1。用人工抗原腹腔免疫BALB/c小鼠,有限稀释法筛选获得分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株2H10C2F11,并将该细胞株注射小鼠腹腔获得腹水。纯化后的抗体效价为3.96×10-6,紫外分析方法计算蛋白含量为1.139 mg/mL,琼脂双扩实验表明抗体为IgG1型,SDS-PAGE电泳图谱显示纯化效果理想;经间接ELISA方法测定,抗体的亲和力为1.8×108L/moL。     

恩诺沙星ELISA快速检测方法的建立

采用活酯法合成酶标记半抗原（ENR-HRP），紫外扫描分析和ELISA方法鉴定，结合比为1．6：1。选择ENR-HRP与游离ENR相竞争的模式建立检测ENR残留的ELISA检测方法，其最佳工作条件为：二抗的包被浓度为2μg／mL，抗体工作浓度1：1000，酶标半抗原工作浓度1：500。标准曲线在0．423～1000ng／mL之间线性关系良好，其IC50为33．76ng／mL，回归方程为Y=-0．07769lnx＋0．770801，相关系数r=0．99153，最低检测限0．423ng／mL。单抗对达氟沙星、培氟沙星、麻保沙星有少许交叉，特异性较好。ELISA检测方法批内平均变异系数为5．75％，批间平均变异系数为10．69％，重复性较好。     

杂交粳稻株高的发育遗传效应分析

采用数量性状的加性一显性发育遗传模型，利用3个粳稻BT型不育系和6个粳型恢复系，配制不完全双列杂交组合，分析株高不同发育时期的遗传效应。结果表明：杂交粳稻株高的发育受基因加性和显性效应的共同作用，但以加性效应为主。     

聚醚类抗生素对肉鸡的毒性作用及其合理应用

一、前言 球虫病是集约化养鸡业中最重要的疾病之一。目前肉鸡球虫病的防治仍以药物防治为主。在众多的抗球虫药中，尼卡巴嗪和磺胺类药如磺胺喹恶林（SQ）、磺胺间甲氧嘧啶（SMM）、磺胺氯吡嗪钠Sulfachloropyrazine三字球虫粉主要用作治疗药，但对集约化的养鸡场，球虫病以预防为主，即在肉鸡的整个生长期将抗球虫药混到肉鸡的饲料中。预防肉鸡球虫病的药物有不少，如妥曲珠利（toltrazuril百球清）、地克珠利（diclazuril）、氨丙啉、氯羟吡啶、氯苯胍、二硝托胺（zoalene球痢灵）等是常用的化学合成的抗球虫药，球虫对其…     

二恶英的毒性及其研究进展

闹得全世界沸沸扬扬的比利时二恶英（dioxin）事件始于今年3月，该国一些养鸡场突然出现蛋鸡停止产蛋，肉鸡生长怪异等反常现象。经比利时农业专家的调查发现，9家饲料厂生产的饲料含有过量的致癌物质二恶英。在喂过这些饲料的肉鸡和鸡蛋的样品检测中，发现了超过正常含量8＊一1000倍的二恶英。二恶英是公认的极毒、强致癌物，常以微小的颗粒存在于空气、土壤和水中，主要的污染源是冶金工业、垃圾焚烧，以及生产杀虫剂、除草剂。造纸的企业等。牛、猪、鸡等动物吞食二恶英后，主要分布在肝、脂肪、肾、肌肉组织、乳汁和蛋内，人吃了受污染…     

磺胺类药物多克隆抗体的制备与ELISA检测方法的初步研究

模拟磺胺母核结构合成了3种人工免疫原,免疫新西兰白兔,用间接竞争ELISA方法监测免疫效果。选择抑制效果较好的2组多抗血清建立磺胺类药的ELISA检测方法,绘制竞争标准曲线,并进行添加回收试验。结果表明：A组多克隆抗体对6种常用磺胺药SMD、SMM、SMZ、SDM、SDM、SD的IC10分别为0．010、0．046、0．010、0．100、0．067、0．019μg／mL,低于最高残留限量（0．10μg／mL）;C组多克隆抗体对SMD、SMM、SMZ、SDM、SQ、SD、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪的IC10分别为0．0091、0．051、0．058、0．088、0．020、0．010、0．014、0．011μg／mL,亦低于最高残留限量。2组多克隆抗体对磺胺药的回收率为54．5％～111．8％和54．2％～130．3％,变异系数为3．6％～10．9％和3．7％～5．9％。     

猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立

为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原,两者与一定量的抗pEGF多抗反应。结果表明,理想的包被抗原浓度为0.625μg/mL,抗pEGF工作浓度为1∶64000,酶标二抗工作浓度为1∶20000,可检测的最适范围为0.4ng/mL~32ng/mL,最低检测限为1ng/mL,批内和批间变异系数分别为3.50%和5.22%。得到回归方程y=-34.53x 76.06(R2=0.993)和标准曲线,从而建立了快速定量测定pEGF含量的酶联免疫吸附试验方法。     

液相色谱-质谱联用检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留的确证方法

 【目的】建立牛奶中诺氟沙星、氧氟沙星、麻保沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星等10种氟喹诺酮类药物残留检测的液相色谱-大气压化学电离-离子阱质谱确证方法。【方法】牛奶经三氯乙酸和乙腈沉淀蛋白、聚合物反相Strata-X固相萃取柱净化、ODS2 分离后，用大气压化学电离-离子阱质谱测定。【结果】对诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星等5种药物进行了定量方法学验证：在1.0～100.0 ng•ml-1范围内线性良好（r>0.99）；以1.0、10.0、100.0 ng•ml-1浓度水平的添加回收率为60.6%～101.0%，日内变异系数≤17.5%，日间变异系数≤22.1%；检测限为0.2～0.8 ng•ml-1，定量限为0.8～2.8 ng•ml-1。【结论】此方法为一种检测氟喹诺酮类药物在牛奶中残留的高通量确证分析方法。     

突变型猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达

使用α因子做为信号肽的酵母系统分泌表达猪表皮生长因子(pEGF)时,由于对信号肽末端Glu-Ala氨基酸残基切除不完全,表达产物是Glu-Ala-pEGF和pEGF的混合物.本研究为了获得单一表达的pEGF产物,对pEGF基因进行适当的突变修改,构建缺失Glu-Ala重复基因序列的重组载体.把重组载体pPIC9-pEGF1-48电转化毕赤酵母,用同位素标记随机引物斑点杂交法筛选多拷贝整合转化子,并诱导大量表达.用硫酸铵沉淀及超滤的方法浓缩和纯化蛋白,并用Bradford检测方法对蛋白浓度进行了初步测定.结果表明,构建的重组载体经过BglⅡ线性化后稳定转入毕赤酵母中,转化子表型主要为MutS型;选的多拷贝MutS型转化子经诱导后成功表达约6 000的pEGF1-48蛋白,经检测蛋白表达水平约为34 mg/L.     

基因×环境互作下杂交粳稻剑叶SPAD值遗传效应

利用3个粳稻BT型不育系和6个粳型恢复系,配制不完全双列杂交组合,采用包括基因型×环境互作效应的加性-显性-上位性遗传模型,分析不同发育时期剑叶SPAD值的遗传效应。结果表明：各亲本在不同的发育时期剑叶SPAD值存在着显著差异;同一亲本在不同环境条件下剑叶SPAD值间也存在着差异;剑叶SPAD值的发育在不同阶段主要由基因的显性、加性×加性上位性及其与环境互作效应控制。