金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性与致病性关系试验

金黄色葡萄球菌为临床最常见的病原菌,由于其可以产生多种毒素和酶,在临床上可引起家畜多临床表现的疾病。目前金黄色葡萄球菌的耐药性日益恶化,特别是其对氟喹诺酮类和β-内酰胺类药物呈现超强耐药,给临床治疗带来极大的困难。本试验研究了金黄色葡萄球菌与毒力有关的血浆凝固     

猪链球菌耐药性的检测

采用药敏纸片扩散法、微量稀释法及双纸片扩散法对分离自长春地区的22株猪链球菌进行了耐药性测定。结果表明，82％～100％的菌株对大环内酯-林克酰胺-链阳菌素B(MLSB)类、四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类、氨基糖苷类耐药，但对青霉素和氨苄青霉素不耐药，对利福平的耐药率为5％；82％的菌株为多重耐药(MDR)；91％的菌株为MLSB型耐药，其中构成型耐药占95％。除青霉素外，其他5种抗生素的MIC50和MIC90高度集中(≥128／μg／mL)。     

牛病毒性腹泻病毒梅花鹿分离株E0基因的克隆与表达

利用RT-PCR技术扩增了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)梅花鹿分离株E0基因，并将其克隆到pMD18-T克隆载体和pET28a原核表达载体中，构建了pMD18-T／E0和pET28a／E0重组子，并进行了测序和表达。表达产物分别用12％SDS-PAGE检测和牛抗BVDV阳性血清进行Western-blotting检测，结果表明．BVDV梅花鹿分离株E0基因的核苷酸序列与匈牙利VEDEVAC株的同源性高达98．6％，与C21V标准株的同源性为84．9％，证明构建的重组子是正确的；BVDV梅花鹿分离株E0基因得到了正确表达。     

乌苏里貉巴氏杆菌的分离鉴定

吉林省松原市某养貉场发生疫病,对病死貉进行剖检,见有典型的巴氏杆菌病的症状,然后对细菌进行分离培养和生化鉴定,证实引起貉死亡的是巴氏杆菌病。     

沈阳地区鹿结核病和布鲁菌病的血清学调查

为了解结核病和布鲁菌病在沈阳地区鹿群中的流行传播状况,从沈阳地区随机采集鹿血清样本1 055份,分别用平板凝集法检测鹿布鲁菌病和间接ELISA法检测鹿结核病的血清阳性率.经检测,沈阳地区的鹿群中结核病的血清阳性率为99,24％,鹿布鲁菌病的血清阳性率为20.19％.本次调查结果为沈阳地区鹿结核病和布鲁菌病的防控提供了流...     

从幼鹿顽固性腹泻病料中检出牛病毒性腹泻——粘膜病病毒

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对长春、前郭、伊通、双阳等地区送检的２８份幼鹿顽固性腹泻病料进行了牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）检测。应用电镜对部分ＥＬＩＳＡ阳性和阴性样品进行负染观察,结果６份阳性样品中均见有ＢＶＤＶ粒子,４份阳性样品未观察到ＢＶＤＶ粒子。结果表明,ＢＶＤＶ可能是引起幼鹿顽固性腹泻的重要病因。     

水貂阿留申病病毒VP2截短基因的原核表达

为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进行诱导表达,确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和Western blot分析,表明终浓度为1mmol/L的IPTG诱导6h目的蛋白的表达量最高,分子质量约为53ku。SDS-PAGE分析表明,葡萄糖和乙醇抑制了目的蛋白的表达,而蔗糖、甘油和二甲基亚砜提高了目的蛋白的表达量,获得的目的蛋白具有良好的反应原性。     

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的亚细胞定位研究

为深入研究牛病毒性腹泻病毒E_2蛋白的生物学功能,了解其在哺乳动物细胞中的亚细胞定位情况,采用RT-PCR扩增牛病毒性腹泻病毒Changchun184株E_2基因,将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1/V5His A中,并进行酶切鉴定和测序分析,将构建的重组质粒pc DNA3.1/V5His A-E_2经脂质体介导转染至MDBK细胞。继续培养48h后,在激光共聚焦显微镜下观察E_2蛋白在细胞中的亚细胞定位情况。结果表明,E_2蛋白在细胞核与细胞质中均有表达,且绿色荧光呈点状均匀分布。该研究为进一步研究牛病毒性腹泻病毒E_2蛋白的相关功能奠定了基础。     

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E2基因在卡介苗中的表达

在成功克隆牛病毒性腹泻一黏膜病痛毒Changchun184株E2基因的基础上,将E2基因与表达载体pMV261连接,构建了重组穿梭质粒pMV261-E2,后电转化到卡介苗中,获得了具有卡那霉素抗性的重组卡介苗,并对重组卡介苗进行菌落PCR鏊定.在45℃下热诱导E2基因在重组卡介苗中的表达,并对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Wesern blotting 分析.结果证明,牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E2基因在卡介苗中成功的表达.     

粘膜病病毒感染幼鹿的病原流行病学调查

应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对４个地区幼鹿感染粘膜病病毒（ＭＤＶ）进行了检测,感染率为６０．０％￣８６．７％,表明上述地区幼鹿存在着广泛的ＭＤＶ感染。为今后粘膜病的防治提供了流行病学资料与理论依据。