抗丝状支原体丝状亚种单克隆抗体的制备及初步应用

旨在制备抗丝状支原体丝状亚种(Mmm)的特异性单克隆抗体(MAb),为牛传染性胸膜肺炎(CBPP)病原诊断的免疫学方法提供特异性抗体。本研究利用生物信息学技术分析了Mmm国内分离株Ben-1不同传代株的全基因组序列,选取M0071蛋白作为研究对象。将原核表达的可溶性重组蛋白M0071(rM0071)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过有限稀释法和间接ELISA方法筛选得到能稳定分泌抗rM0071蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。进一步制备单抗腹水并纯化,利用Western blot方法对该单抗进行特异性鉴定,同时测定其抗体效价和抗体亚类。随后利用间接免疫荧光试验(IFA)评价该单抗对细胞感染Mmm的检测能力。结果表明成功获得1株单克隆细胞株3C4A1,将其分泌抗体命名为MAb 3C4A1。特异性结果表明,MAb 3C4A1能与Mmm的分离株和标准株发生特异性反应,而不与山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体山羊亚种、牛鼻支原体、无乳支原体、牛支原体、leachii支原体和牛A型巴氏杆菌等发生反应。抗体亚类鉴定MAb 3C4A1属于IgG1亚类、轻链为κ链。经间接ELISA测定其抗体效价为1∶256 000。IFA试验结果表明,MAb 3C4A1仅与感染EBL细胞的Mmm发生绿色荧光反应,而与牛鼻支原体、无乳支原体、牛支原体感染的细胞不发生荧光反应,特异性良好。本研究制备的MAb 3C4A1具有良好的特异性和免疫反应性,可作为CBPP病原免疫学诊断的工具,为进一步研制CBPP病原鉴别诊断试剂盒提供了基础材料。     

加强政风行风建设 树立农机监理形象

<正>农机监理机构是为社会公众提供服务的窗口部门,行业风气的好坏直接关系到政府职能部门在人民群众中的公信力和社会形象,在新的形势下,加强农机监理部门政风、行风建设,是农机监理事业发展所面临的新任务和新课题。一、掌握和吃透政风、行风建设的深刻内涵,是加强农机监理政风行风建设的重要前提。农机监理部门作为执法机关,其工作状况不仅反映着行业的形象,更反映着党和政府的形象,但     

检测与诊断猪圆环病毒PCR技术的建立及病毒的分离鉴定

本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强,可扩增10ng的阳性质粒的DNA,可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测出PCV,并且该方法可以区分PCV1和PCV-2,对其它病原微生物如PPV、PRRSV、SIV以及许多细菌不能检出。应用此方法对6省市的12个猪场的225份病料进行了检测,对阳性病料进行了病毒分离,对分离的病毒进行了电镜观察与序列测定,结果证实分离的病毒为PCV-2。     

孑遗植物中华桫椤2个群体遗传多样性的ISSR分析

为阐明小尺度范围内濒危物种孑遗植物中华桫椤种群的遗传多样性,保护和恢复种质资源,本文采用ISSR分子标记技术对云南屏边大围山的大围山红旗水库和大围山山谷2个中华桫椤种群的遗传多样性进行分析。结果表明用从100个随机引物中筛选出的20个能高产稳定扩增的ISSR引物对2个群体共57个样品进行扩增,共获得132个可分析位点,其中大围山红旗水库的多态性位点83个,占62.87%,而大围山山谷的多态性位点97个,多态位点百分率（P）为73.48%,两者Nei＇s基因多样性分别为0.2614和0.2832,Shannon＇s信息指数分别为0.3762和0.4135,两个种群的遗传分化系数Gst为0.0701,分析结果表明中华桫椤种群内的遗传多样性较高,但两种群间的遗传分化不明显。本研究结果将对中华桫椤自然群体的保育和管理具有重要意义。     

宝鸡市11月上旬水果市场价格

近期市场上的水果价格差距在拉大。深秋初冬时节，正是陕西省宝鸡市柑桔、苹果、甘蔗等水果集中上市期，随着市场供货量的不断增多，市场售价呈不断下降趋势。品相好一点的红富士苹果，市场售价也就5元／kg；秦冠1．60元／kg，菠萝3．60元／kg，甘蔗1元／kg：据一些经销商介绍，一周下来，同样一个水果品种就变更3次价格标签。与此同时，     

降低产品成本途径的探讨

现代企业管理必须关注成本。本文从成本日常管理和成本管理改革两大方面,对如何降低产品成本进行了探讨。     

钙肥对酥梨品质及抗逆性影响试验

钙是果树生长发育中所必须的营养元素之一．对提高果实品质、增强树体抗逆性有重要作用。为了摸清不同钙肥对梨树品质和抗逆性的影响，我们开展了不同钙肥在砀山酥梨树上的对比试验，现将试验结果总结如下。     

动物支原体

支原体亦称霉形体，最早由Nocard和Roux(1898)由牛传染性胸膜肺炎病例中分离到，由于性质难以界定，遂将这一类微生物命名为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-like organisms)，简称PPLO，后归为软膜体纲(Mollicutes)支原体目。支原体目下没一科，支原体科，科内设两属：支原体属(Mycoplasma)，属内有120种；脲原体属(Ureaplasma)，属内有6种，常见的动物支原体属此两属。     

实时荧光定量PCR方法检测大肠杆菌O157:H7

针对大肠杆菌(Escherichia coli )O157:H7的致病基因eae设计了特异性引物，并用荧光染料SYBR GreenⅠ 进行了实时定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）。熔解曲线显示产物特异性较强，无非目的条带和二聚体产生。并对反应程序进行了优化，确定了最佳的反应程序，最终在合适的模板浓度内得出了标准曲线。结果显示Real-time PCR 比普通PCR灵敏1 000倍。