根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展

 农杆菌介导遗传转化成为真菌实现菌种改良、新基因标记及目的基因的筛选、分离和克隆的重要方法之一。该方法操作简单、受体范围广、转化效率高、单拷贝率高及突变体遗传稳定,解决了传统转化方法的瓶颈。利用该方法成功实现了多种真菌大容量高质量突变体库的构建,且在各类真菌突变体库构建的基础上,相关基因的筛选和功能基因的验证工作成为下一步的研究热点,进而为各类病原菌致病机理的深入研究提供依据,为抗病育种等亟待解决的问题奠定基础。     

棉花黄萎病菌T DNA插入突变体库的构建及变异性状的分析

利用农杆菌介导遗传转化(ATMT)的方法,成功构建含2 000个转化子的棉花黄萎病菌强毒菌株Vd080的突变体库。200μmol/L乙酰丁香酮(AS)作诱导剂,25℃共培养48h,棉花黄萎病菌孢子量为106 mL-1,其转化效率达150～540个转化子。进一步研究发现,供试突变体的T-DNA成功插入Vd080基因组,且均为单拷贝插入,转化子的潮霉素B基因能够稳定遗传。309个突变体中,53.7%的突变体菌落形态与初始菌株Vd080相同,均产生黑色的微菌核,不产生黑色素微菌核的菌丝型仅占17.5%。与初始菌株相比,随机选取的85个突变体,产孢量、生长速率、粗毒素分泌量及致病力发生显著变异的菌株分别占36.4%、12.9%、50.6%和29.4%,四者之间不存在明显的相关性。     

棉花黄萎病菌致病力测定及评价方法研究

 棉花黄萎病菌致病力测定及评价是抗病育种及病害综合防治的基础。本文以我国三大棉区的167个黄萎菌菌株为对象,研究致病力测定及评价中不同批次之间病情指数的校准及致病力类型划分标准等关键技术环节。结果表明,以中等致病力类型菌株Vd076为校正菌株,以感病性稳定的冀棉11为校正鉴别寄主,以校正菌株在校正鉴别寄主上病情指数达到50.0±5.0时的调查结果进行各菌株的致病力评价,可获得较好的校正效果,使不同批次试验数据具有可比性;依据聚类分析结果,制定了致病力类型划分标准,强、中、弱3种致病力类型的平均校正病指分别为﹥40.0、20.1~40.0和20.0;通过对不同鉴别寄主组合的分析,推荐陆地棉中棉所41号、豫棉21、鲁棉研28、中棉所35号、中棉所8号、冀棉11作为鉴别寄主。该研究为棉花黄萎病菌致病力变异等相关研究工作提供了技术支撑。     

高效降解棉酚菌种的筛选及棉饼脱毒参数的研究

通过对6个微生物菌种利用棉酚能力的比较分析,筛选出对棉子饼中棉酚具有较强脱毒能力的酵母菌菌株JM-3,该菌株可降解棉子饼中80%以上的游离棉酚。研究表明JM-3的发酵适宜温度为25C,加水量与发酵底物的适宜比值为0．81(含水量45％),适宜发酵时间为36 h。该菌种的最大优点是抗杂菌污染能力强,生长速度快,仅需36 h的发酵,就可使棉子饼粕中的棉酚含量降至0．03％以下,蛋白含量提高3个百分点以上。     

Cry2Ab 蛋白对棉花黄萎病菌、枯萎病菌和红腐病菌的影响

研究Cry2Ab蛋白对棉花黄萎病菌、枯萎病菌和红腐病菌生长速率及对黄萎病菌分生孢子产量、分生孢子大小和粗毒素分泌量的影响。结果发现,当Cry2Ab蛋白质量浓度为1.0 μg·mL^－1时,显著降低黄萎病菌分生孢子的大小;当其质量浓度大于5.0 μg·mL^－1时,显著抑制棉花黄萎病菌、枯萎病菌和红腐病菌在PDA培养基上生长及黄萎病菌分生孢子的大小,促进黄萎病菌产孢和粗毒素分泌。     

杀菌剂对棉花种子活力的影响

通过对9种杀菌种子处理的幼苗生长测定比较，不同杀菌剂对棉花种子活力的影响存在明显差异。大多数杀菌剂对种子的发芽势、苗鲜重、苗高有促进作用，对发芽率有抑制作用。大部分杀菌剂处理的种子活力提高。     

钾肥与棉花枯黄萎病的关系

钾肥与棉花枯黄萎病的关系宋美珍，朱荷琴中国农科院棉花所安阳４５５１１２试验在本所病圃进行。５月份选用抗枯萎病品种中棉所１２和感枯萎病品种邯郸１４；９月份选用中棉所１２和感枯萎病品种徐州１４２；黄萎病试验采用无底纸钵定量接菌法和大田成株期同时进行，选用...     

棉花黄萎病病原菌安阳菌系致病力分化研究初报

棉花黄萎病病原菌安阳菌系致病力分化研究初报ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＲｅｐｏｒｔｏｎＩｎｆｅｃｔｉｏｎＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＡｎｙａｎｇＬｉｎｅｏｆＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅＫｌｅｂｏｎＣｏｔｔｏｎ棉花黄萎病（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉ...     

不同年代大丽轮枝菌菌株的生物学特性和ISSR分析

 为了探究不同年代的大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)菌株生物学特性和遗传多样性方面的差异,本文以我国黄河流域和长江流域主产棉区6个省的不同年代大丽轮枝菌菌株为研究对象,观察培养性状,测定致病类型(致病力、落叶型),同时采用ISSR指纹图谱分析其遗传多样性。结果显示,不同年代大丽轮枝菌之间菌丝生长速率无显著差异,但菌核型菌株所占比例有减少趋势;2007~2009年和2017年的菌株全部为落叶型菌株,而1983~2000年的菌株中落叶型菌株仅占28.6%,表明随着年代的推移,黄河流域和长江流域的落叶型菌株所占比例呈上升趋势;不同年代菌株之间致病力存在显著差异,1983~2000年、2007~2009年和2017年的菌株中强致病力类型菌株分别占21.4%、25.0%和38.9%,仅有的5株弱致病力类型菌株均为1983~2000年的菌株;与2000年后的菌株相比,1983~2000年的菌株,Nei′s基因多样性指数为0.205 1,Shannon信息指数为0.299 0,表现出更丰富的多样性,利用NTSYS软件和Structure软件对ISSR指纹图谱进行聚类分析,两种方法均将所有供试菌株分为4个类群,且聚类结果与致病力和不同年代之间均具有一定的相关性,与地理来源无明显相关性。本研究结果表明,过去30年间我国黄河流域和长江流域棉田黄萎病菌落叶型和强致病力类型菌株所占比例逐渐升高,且不同年代和不同致病力的菌株在遗传上有差异,为进一步探究大丽轮枝菌的遗传与进化奠定了基础。