2009—2010年河南省小麦白粉菌群体毒性及其遗传多样性分析

利用40个鉴别寄主对河南省5个小麦产区的44个单孢子堆纯化分离的小麦白粉病菌进行毒性鉴定分析,并采用多基因家系法进行了遗传多样性分析。结果显示,供试群体对Pm8、Pm1、Pm3a、Pm3b、Pm3c、Pm3f、Pm3e、Pm5、Pm6、Pm7、Pm17、Pm19、Pm34等抗病基因的毒性频率分别达到90%以上,已不能再作为抗源利用;对Pm12、Pm16、Pm21、Pm18、Pm2、Pm2＋6、Pm2＋MLD、Pm5（Mli）、Pm23、Pm30、Pm4a等基因的毒性频率低于15%,仍可以在抗病育种中加以利用;河南省的小麦白粉病菌存在地理之间的差异,同时病菌在地区之间有自西南向东北/东方向的传播。表明省内群体中存在着丰富的遗传多样性。     

玉米矮花叶病毒特性及受侵叶片的超微结构

对玉米矮花叶病毒的病毒粒子形态、结构及其特性，感病叶片的超微结构进行了初步的研究。提纯病毒研究结果表明，MDMV粒子形态为线状，宽度为14nm，长度不等，完整粒子长度为720～750nm。病毒悬浮液经紫外扫描获得了典型的核蛋白紫外吸收光谱，最高吸收峰在257．5nm，最低峰在243．3nm，O．D280/O．D260约为0．73。在电镜下观察感病叶片的超微结构，可在细胞质内观察到大量的病毒粒子及风轮状、柱状内含体，体现了马铃薯Y病毒组的典型特征。同时，在感病组织内还可看到许多破坏的叶绿体、线粒体等。     

河南烟草马铃薯Y病毒体外特性及其与 CMV,TMV的相互作用研究

用生物学方法研究了河南烟草马铃薯Y病毒(PVY)的体外特性．结果表明，河南PVY的稀释限点为10^-6～10^-7．致死温度为70～75℃，体外存活期为4～6d，在PVY与CMV，TMV相互作用的研究中发现混合侵染的症状比单独侵染严重．且表现症状不同．     

禾谷镰刀菌的酯酶和酸性磷酸酯酶同功酶电泳分析

对来自不同小麦栽培区的38个禾谷镰刀菌菌株进行了酯酶、酸性磷酸酯酶的电泳分析，结果表明，禾谷镰刀菌具有3条标墀性酯酶带，根据其变化特点，供试菌株的酯酶同功酶谱可划分为5种类型，其中类型1为主体型，占总测菌株数的76.3%；其它类型为少数型，分别占总测菌株数的10.5%，2.6%，5.2%；类型5为新出现的谱型，禾谷镰刀菌具有2条标志性酸性磷酸酯酶酶带，以其出现与否划分为供试禾谷镰刀菌菌株为2种酶谱类型，分别占供试菌株总数的36.8%与63.2%。     

小麦条锈菌条中29号生理小种SCAR检测标记的建立

用210条随机引物对中国小麦条锈菌(Pucciniastriiformisf.sp.tritici)5个主要生理小种进行了RAPD分析,寻找到了2个条中29号特异性的RAPD标记。根据其中一个特异片段的测序结果,设计了特异PCR引物,成功获得了条中29号小种专化的SCAR标记。     

半子粒小麦高分子量麦谷蛋白亚基的SDS-PAGE分析方法

对半子粒无胚小麦子粒电泳进行了研究，摸索出了一套适合于小麦半子粒分析的高分子量(HMW)麦谷蛋白亚基的SDS-PAGE方法．对2248份半子粒杂交后代的分析结果表明，该方法结果准确，方便快速，分辨率较高。     

玉米矮花叶病毒株系、寄主范围及辅助成分的研究

对纯化的玉米矮花叶病毒进行株系鉴定，因人工接种约翰逊草不侵染，故定为MDMV-B株系；4科36种植物的接种试验表明。19种禾本科植物可作为其其寄主，以不同病毒汁液进行的蚜虫薄膜饲毒试验表明，存在不同于Con A的一种辅助成分。     

小麦条锈菌MFLP分子标记体系的建立与优化

【目的】建立并优化小麦条锈菌的MFLP技术体系。【方法】以小麦条锈菌混合菌种为材料,通过对DNA提取、限制性内切酶2次酶切、PCR双重扩增等试验因素的选择优化,建立适用于小麦条锈菌的MFLP分析体系。【结果】改良的CTAB/SDS法有较好的破壁效果,所提取的DNA品质良好,完全符合MFLP的操作要求。优化确定的最佳MseⅠ酶切反应时间为4h,预扩增最适退火温度为55℃,选择性扩增使用的模板为预扩增产物的100倍稀释物,其最适退火温度为58℃。【结论】建立的MFLP技术体系可提供清晰、稳定的MFLP指纹图谱,为小麦条锈菌等专性寄生菌的群体遗传学与流行学研究提供了新的技术手段和方法。     

猪紧密连接蛋白1基因克隆及其shRNA片段的筛选

试验旨在筛选有效抑制猪紧密连接蛋白1 (zonula occludens-1,ZO-1)基因表达的shRNA干扰片段,为后期利用RNA干扰技术深入了解ZO-1基因在猪卵母细胞成熟过程中的功能奠定基础。本研究首先克隆了猪ZO-1基因,并构建了其真核表达载体,而后筛选了有效抑制ZO-1基因表达的shRNA干扰片段。结果表明,猪ZO-1基因编码区长度为3 036 bp,多重序列比对结果显示,猪ZO-1基因核苷酸序列与牛、羊、马和人相应序列的同源性分别为88%、88%、87%和85%。构建的pDsRed-N1-ZO-1真核蛋白融合表达载体经脂质体法转染HEK293T细胞后,可观察到清晰的RFP红色荧光蛋白表达。将靶质粒与shRNA干扰质粒共转染HEK293T细胞48 h后,与对照组相比,可观察到红色荧光表达得到抑制。实时荧光定量PCR结果显示,设计合成的2条shRNA对猪ZO-1基因表达均有抑制效果,其中ZO-1 shRNA201的抑制效果显著高于ZO-1 shRNA1276 (77.8%和67.0%,P < 0.05)。     

配方施肥对拱棚辣椒生长发育及光合特性的研究

以新冠龙辣椒为供试材料,研究了不同施肥种类对拱棚辣椒生长发育、产量及光合特性的影响,结果表明：T4辣椒植株的株高、开展度最大,分别为104.3、90.6 cm,T1辣椒单果重、果长、果粗均最大,分别为101.6 g、25.49、4.86 cm。T1辣椒叶片总叶绿素含量最高为66.7 mg/g,根系活力最强为100.6μg/(g·FW·h)。 T5辣椒叶片净光合速率下降幅度最高为6.6μmol/(m2·s),T1、T2辣椒叶片净光合速率下降幅度最低,波动于1.3～2.5μmol/(m2·s)。 T3辣椒叶片气孔导度下降幅度最高为2658.1 mol/(m2·s), T2、T5辣椒叶片气孔导度下降幅度最低,波动于386.7～428.7 mol/(m2·s)。 T1辣椒叶片蒸腾速率下降幅度最高为4.7 mmol/(m2·s),T5辣椒叶片蒸腾速率下降幅度最低为1.1 mmol/(m2·s),辣椒叶片胞间 CO2浓度下降幅度最高为436.8μmol/mol。 T1辣椒的小区产量、产量、效益均最高,分别为340.1 kg、96448.5 kg/hm2、162865.6 Yuan/hm2,T3辣椒的小区产量、产量、效益最低,分别在260.8 kg、74338.5 kg/hm2、124888.5 Yuan/hm2。