Biolog-Eco方法检测转cry1Ab粳稻对褐飞虱肠道微生物多样性的影响

利用Biolog-Eco方法对以抗虫转cry1Ab基因粳稻(KMD1/KMD2)及其对照(秀水11)为食的褐飞虱肠道微生物群落多样性进行比较研究,以评价其对该飞虱肠道微生物多样性的影响.室内试验结果表明,褐飞虱以KMD1或KMD2为食持续1、3、5代后,其肠道微生物多样性指数(包括Shannon、Simpson和McIntosh指数)与对照无明显差异,但以KMD1为食时,其微生物群落的平均颜色变化率(AWCD)明显高于KMD2和对照.田间调查结果与室内试验基本相似.综合分析认为,KMD1和KMD2对其非靶标害虫褐飞虱肠道微生物群落多样性无明显的负面影响.     

转cry1Aa基因抗虫棉整合结构解析及转化体特异性检测方法的建立

【目的】cry1Aa基因是2011年本实验室在我国棉花商品种子中发现的1种未经批准的转基因成分,本研究旨在通过整合结构解析,建立特异性检测方法,对市售棉种进行初测,明确该外源基因在我国棉种中的存在情况。【方法】通过Genome walking、长链PCR分离获得了转cry1Aa基因棉花转化体(定名为NN6转化体,简称NN6)的外源基因整合结构,同时基于插入位点基因组及外源DNA连接区,建立了NN6转化体特异性的定性聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法和实时荧光定量PCR方法。【结果】NN6整合结构主要包括cry1Aa、aad和Npt II基因,插入棉花基因组7号染色体37 169 450位,产生91 bp基因组缺失;所构建的定性PCR检测方法能特异、快速地对棉花单株和种子单粒中NN6转化体的纯/杂合状态进行鉴定,实时荧光定量PCR检测限为44拷贝,能满足国内外对转基因标识的需要;对含有cry1Aa基因的3个市售棉种进行检测,其纯合度分别为1.51%,5.21%和21.09%。【结论】本研究解析了NN6的整合结构,并建立特异性检测方法,为我国转基因棉花新品种选育及转基因安全管理提供技术手段。     

转基因产品致敏性评估的规范化

 在转基因产品商业化之前需要对其安全性进行全面评估 ,其中包括对潜在致敏性的评价。介绍了多个国际组织对致敏性的评估程序 ,并对致敏性测试的某些环节进行了论述。随着中国加入WTO以及在国际贸易中转基因产品数量和品种的增加 ,我国对转基因产品食用安全性中致敏性的评估程序及评估技术与国际接轨日益重要。笔者建议尽早建立一套适合中国国情的科学而又全面的转基因产品潜在致敏性评估体系     

转Bt基因水稻生长期几种重要成分含量的变化研究

 对Bt水稻汕优63及其非转基因亲本汕优63不同生长期几种重要成分的含量进行了分析，以期为转Bt基因水稻的生态学和安全性评价提供基础代谢方面的依据。结果表明，在抽穗期，Bt水稻和非Bt水稻茎秆和叶片中大部分氨基酸的含量差异显著或极显著；在大部分生长期，Bt水稻和非Bt水稻氮、磷和硅的含量差异显著或极显著，但它们的变化趋势基本一致，氮和磷的含量在拔节期之后均呈下降趋势，而硅的含量则随水稻的生长发育呈上升趋势；在水稻生长前期，Bt水稻可溶性糖和还原糖的含量比非Bt水稻低，但在后期比非Bt水稻高，且差异均显著或极显著。     

一种快速、简便提取大豆油DNA的方法及转基因大豆油的检测

【目的】DNA的提取是GMO（Genetically modified organism）作物检测中重要步骤，DNA的质量关系到GMO检测的成败。【方法】本研究以大豆油为材料，探索出一种快速、简便的提取大豆油DNA的方法。【结果】该方法能从10 ml大豆油中提取0.4 μg高纯度DNA，可用于PCR检测。提取市场上出售的十几种精练大豆油的DNA, 针对 35S、Nos、EPSPS和Lectin 基因进行了PCR检测，分别扩增出不同的目的片段。【结论】大豆油中有残存的DNA碎片，在转基因大豆油中能扩增出外源基因的片段。本研究为大豆油的外源基因的检测提供了可行方法。     

转cry1Ac/CpTI双价抗虫水稻CrylAc杀虫蛋白的表达特性及其对二化螟的毒杀效果

CrylAc杀虫蛋白基因在转crylIAc／CpTI双价抗虫水稻(Oryza sativa L.)各部位中均得到了表达。不同水稻生育期及不同部位中CrylAc杀虫蛋白的表达量均有所不同。总的趋势是生育前期的表达量较生育后期高。在时间上，主茎叶片中的杀虫蛋白在拔节期最高，孕穗期开始下降，在扬花期和和灌浆期达到最低，到成熟期略有回升；主茎中的杀虫蛋白在苗期、拔节期和扬花期较高，种子中含量很低。不同生育期转基因水稻主茎顶叶对二化螟(Chilo suppressalis)初孵幼虫表现出了很强的抗虫性。在灌浆期前，取食转基因水稻顶叶的二化螟幼虫校正死亡率均90％左右，灌浆期后抗虫性有所下降，校正死亡率在60％左右。活体成株测定法评价结果表明，转crylAc／CpTI双价抗虫水稻对二化螟表现高抗。     

转cry1Ab基因抗虫籼稻对非靶标害虫白背飞虱发育与繁殖的影响

为了比较2个转cry1Ab基因抗虫籼稻品系B1和B6对其非靶标害虫白背飞虱敏感性与其非转基因亲本对照嘉早935的差异，采用历期测定和产卵行为电子记录等方法分别测定了白背飞虱于B1和B6及嘉早935上的发育历期、产卵行为及繁殖力。结果表明，该飞虱以B1和B6为食时，其雌雄若虫总发育历期均显著长于对照，其中在B1上各延长了1．3和1．5天，B6延长了2．0和1．4天。产卵行为的电子记录结果表明，该飞虱在B1和B6上的产卵频次、一次产卵时间及总产卵时间与对照相比均无显著差异。在寄主植株可选择时，该飞虱有偏爱于B1上产卵，其上的产卵痕数、卵块数和总产卵量明显多于对照；而不嗜好于B6上产卵，其上的卵块及其卵粒数、总产卵量明显少于对照。然而，在寄主植株不可选择时，则未观察到这种差异。就卵孵化率而言，不论在寄主可选择还是不可选择时，与对照相比B1和B6对其均无显著的不利影响。     

多粘芽孢菌B48菌株抑菌作用

应用高效无毒和性能稳定的菌株是保证病害生物防治获得成功的先决条件。本实验室自１９８７年以来开展了定期采集小麦等作物根样进行细菌分离鉴定和抑病性、安全性、稳定性，以及与植物亲和性检测工作。多粘芽孢菌（Ｂａｃｉｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａ）Ｂ４８菌株是１９９１...     

转基因耐除草剂作物的全球开发与利用及在我国的发展前景和策略

农田杂草防治是农作物稳产高产的一个重要环节。化学除草剂以其高效、简便、经济的优势,一跃而成为我国现代农业中杂草治理的重要手段,但与此同时也带来了药害（对作物不安全）和抗药性问题。转基因技术的发展为培育耐除草剂作物品种提供了有力的手段。至今,全世界已培育出大量转基因耐除草剂作物品种。转基因耐除草剂作物的利用为拓宽除草剂的使用范围、减少作物药害带来了新的希望。本文在对国际上转基因耐除草剂作物的研发和商业化应用情况进行概述和分析的基础上,结合我国农作物生产的实际情况和小农户、多种作物混合种植的模式,提出转基因耐除草剂植物在我国开发利用的前景和相应的发展策略,以期为转基因耐除草剂作物的研究、开发和推广管理提供科学依据。     

转crylAb／vip3H基因水稻对非靶标害虫褐飞连续多代生长发育与繁殖的影响

实验室条件下,转crylAb／vip3H基因水稻G6H1对褐飞虱Nilaparvatalugens生长发育与繁殖的继代效应评价结果表明,不论是在苗期或是成株期,在各水稻品种上连续饲喂褐飞虱4代后,该虫各代的生长发育和繁殖参数都没有受到水稻品种的显著影响,即不论是在第1代、第2代还是第4代,取食G6Hl与取食其非转基因亲本Xiushui110相比,褐飞虱若虫的发育时间、成虫寿命和产卵量都没有显著差异。同时,2008年和2009年的田间调查结果表明,G6H1和Xiushui110稻田间褐飞虱的若虫、成虫和成若虫总密度均无显著差异。