猕猴桃林下套种大豆土壤微生物群落结构分析

【目的】揭示套种大豆对猕猴桃林下微生物群落组成结构的影响,分析猕猴挑林下种植大豆土壤微生物群落结构和未种植大豆的猕猴桃林下土壤微生物群落结构变化,为研究猕猴桃种植土壤微生态改良和绿色种植以及提高偏远山区土地单位面积经济效益提供理论依据和技术支持。【方法】通过高通量测序检测猕猴桃林下不同土壤样品中微生物群落丰度,分析猕猴桃林下土壤样品与套种大豆的土壤样品中微生物群落丰度与结构组成的差异性,探究猕猴桃林下套种大豆对土壤微生物群落结构和多样性的影响。采集种植大豆和未种植大豆的猕猴桃林下土壤样品进行预处理、DNA 提取和 PCR 扩增,再基于 Illumina MiSeq 高通量测序方法对扩增产物进行检测、纯化和定量,建库测序,数据分析,了解不同样本土壤微生物群落分类结构、丰富度和多样性,确定优势菌群。【结果】通过Tags 丰度和 OTU 的质控与统计的结果显示,种植大豆的土壤（EK）扩增微生物群落丰富度和多样性高于未种植大豆土壤（CK）;多样性分析显示,EK 和 CK 的微生物群落构成差异明显;微生物群落结构分析表明,EK 和 CK 在科、属、种水平上占据的比例平均值分别为 27.06% 和 28.11%、32.66% 和 29.33%、0.46% 和 0.37%,EK 土壤微生物群落在属、种水平上均高于 CK;6 个土壤样品共得到 651 883 条有效序列,经聚类后 EK 与 CK 分别获得 4 740 个和 4 551 个 OTU;LEfSe 分析结果显示,CK 有 19 个优势菌群,而 EK 有 41 个优势菌群,其中变形菌门（Proteobacteria）为 EK 的优势门,根瘤菌科剑菌属（Ensifer）的剑菌（Ensifer adhaerens）为 EK 的优势菌。【结论】猕猴桃套种大豆改变了土壤微生物群落结构,增加了土壤微生物群落丰富度和多样性以及土壤优势菌群数和有益菌群。综上,猕猴桃林下套种大豆对改善土壤的有效成分和提高土壤肥力有重要促进作用。     

胡萝卜筛选标记选择及遗传转化

以常用的筛选剂潮霉素(Hyg)、除草剂Basta和卡那霉素(Kan)对胡萝卜愈伤组织进行敏感性试验,结果表明:胡萝卜愈伤组织对潮霉素和除草剂Basta非常敏感,筛选浓度分别以8mg/L和2mg/L较为合适;卡那霉素合适的筛选浓度应为150mg/L.以带bar基因的质粒载体对胡萝卜愈伤组织进行遗传转化,获得抗性愈伤组织和再生植株.     

稀土矿场中土壤植物修复中的胁迫因子分析

稀土矿的开采过程造成了矿区严重的生态系统破坏,使得开采后数十年植被生长不能恢复。为研究稀土矿场中影响植被生长的土壤主要胁迫因子,采用两耳草进行盆栽试验,在盆栽土壤中分别添加水分、大量元素、有机质、园土和鸡粪,比较不同因素对两耳草的叶片理化性质、酶活力和土壤细菌多样性的影响。结果显示,有机质组的两耳草游离脯氨酸含量最高,达到4.75 μg/g;水分组的叶绿素含量最高。叶绿素a和b分别为8.75μg/g和1.82μg;对照组和大量元素组的可溶性蛋白质含量最高,分别达到926.09μg/g和953.73μg/g;各组间可溶性糖含量差异不显著;稀土矿土壤提高了两耳草的过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）的酶活力袁并且稀土矿土壤中添加水分、肥力和有机质等对两耳草酶活力有不同的影响;对处理组的土壤细菌进行细菌总数和相关序列扩增多样性（Sequence-related amplified polymorphism,SRAP）分析,发现鸡粪组的细菌总数最高、达到9.96×10^6CFU/g,菜园土组的土壤细菌多样性最高。因此认为,影响稀土矿场植物生长的主要胁迫因子是稀土矿土壤中的有机质、肥力和水分。     

~(60)Co-γ辐射对紫花苜蓿部分生长及营养指标的影响

将紫花苜蓿(Medicago sativa L.)10个品种种子经2 000 Gy剂量的60Co-γ射线辐射处理,并就辐射处理对其部分生长和营养指标的影响进行了比较分析.结果显示,经60Co-γ射线处理后,10种紫花苜蓿种子的萌发率、株高和营养指标等都发生了不同程度的变化.辐射处理对先行者、WL525、WL903和Adrenalian等紫花苜蓿品种种子萌发率的影响较小,而明显降低了其余大富豪、阿尔冈金、费纳尔、苜蓿王、标杆和WL2321等6个品种的种子萌发率;辐射处理对部分紫花苜蓿品种的生长速度有促进作用     

植物体细胞杂交技术及其在猕猴桃育种中的应用

植物体细胞杂交使远缘杂交不亲和的植物有可能实现遗传物质重组,创造和培养植物新品种.猕猴桃(Actinidia)现有栽培品种存在一定的缺陷,利用体细胞杂交技术对猕猴桃品质特性进行改良具有广阔的应用前景.文章对植物体细胞杂交技术基本概况、猕猴桃原生质体游离与培养情况以及体细胞杂交技术在猕猴桃育种工作中取得的进展进行了综述,并对植物体细胞杂交技术在改良猕猴桃种质方面的发展前景进行了展望.     

分子克隆技术实验课程的改革探索

针对分子克隆技术在国内外开设过程中存在的普遍问题,尝试从该实验课程的实验目的、实验所选取的内容、教学组织形式、成绩评价方法等方面进行改革探索,这些系列改革措施使该课程的实验目的更明确实用,内容更加精炼科学,教学组织形式更有针对性和灵活性,评价方法更具体合理,改革措施实施后取得了很好的教学效果。     

沙门氏菌PCR快速检测技术研究

通过改良热裂解法提取沙门氏菌基因组DNA,设计特异性引物进行PCR扩增,并对热裂解的时间进行了比较试验,对PCR检测的敏感性和所用引物的特异性进行了试验.结果表明,煮沸时间为2 min即可获得满足PCR要求的基因组DNA;设计的引物特异性好,能专一性扩增出约500 bp条带;该引物灵敏度高,能进行有效检测的核酸最低起始量为129 pg.采用热裂解法提取沙门氏菌基因组DNA进行PCR快速检测技术大大缩短了沙门氏菌检测时间.     

水稻丙酮酸脱氢酶激酶1多克隆抗体的制备

水稻丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)基因位于水稻基因组的第7条染色体上,其cDNA全长为1 498 bp,编码有363个氨基酸残基的多肽链,主要在叶片中表达。为进一步研究该基因编码蛋白的生物学功能及其分子作用机制,本研究构建水稻PDK1的原核表达载体,重组质粒转化大肠杆菌诱导表达,得到分子量大概在41 ku的重组蛋白,经纯化后免疫新西兰大白兔成功制备水稻PDK1多克隆抗体。     

生物技术专业实践教学改革探索

仲恺农业工程学院生物技术专业以广东省生物产业发展需要为导向,深化生物技术专业实践教学体系改革.通过对实验、实习、产学研平台等实践教学环节的改革,提高了学生的动手能力、创新能力和综合运用知识的能力.     

猕猴桃基因组DNA提取的研究

[目的]探讨猕猴桃属基因组总DNA的提取方法。[方法]以富含多糖和多酚次生代谢产物的猕猴桃为材料,比较不同品种在不同方法下的基因组DNA抽提效果,并对不同材料部位、抗氧化剂以及DNA纯化方法等对基因组DNA的获得进行研究。[结论]结果表明,以猕猴桃组培苗的茎部为材料,通过CTAB法,在裂解液中加入1％β巯基乙醇,以及在异丙醇沉淀前加入1／2体积的5mol／LNaCl,所得到的猕猴桃基因组DNA的质量较佳。[结论]该研究为今后猕猴桃分子生物学和基因工程研究奠定基础。