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31.
利用特异性PCR方法从病山羊组织病料中分别扩增山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段,继而将扩增的特异性片段克隆、测序,并与GenBank上相应的基因序列进行比对、绘制系统进化树,进行流行病学分析。结果表明,从病山羊中可同时扩增出山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段,并通过基因序列比对分析确证了PCR检测结果,首次证实我国存在山羊痘、羊口疮及山羊传染性胸膜肺炎的混合感染,为我国现阶段羊病的流行病学和有效防制措施的制定提供了参考依据。 相似文献
32.
为研究羊痘病毒结构蛋白的功能,本研究将羊痘病毒的ORF57、ORF95和ORF117分别克隆至pGEX4T-1原核表达载体后转染到大肠杆菌中。重组表达菌经1 mmol/L的IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得有效表达。表达产物经western blot分析,羊痘病毒特异性血清只能识别融合蛋白ORF57和ORF95,不能识别ORF117。本研究为重组诊断抗原的筛选和亚单位疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
33.
针对以往长江防护林建设效益评价指标过于单一,缺乏全面、系统评估的问题,基于龙泉市14年长防林建设数据,分析了龙泉市长防林工程的建设成效与营造效益,结果表明:(1)在建设成效上,龙泉市累计完成建设面积178543.5亩,其中人工造林94290.5亩,封山育林84253亩;有林地面积增加了99200.8亩,林分总蓄积增加了942770立方米;建设林种以水土保持林与水源涵养林为主,建设树种以针阔混交林为主。(2)在营造效益上,通过实施长防林工程,龙泉市实现以木材资源为主的经济效益为3.37亿元,实现以固碳释氧、涵养水源、固土保肥为主的生态效益为5.63亿元。该研究为林业部门保护森林生态环境、转变林业生产管理方式提供决策依据。 相似文献
34.
35.
为研究小尾寒羊绵羊白细胞抗原Ⅰ(Ovis aries leukocyte antigen classⅠ,OLAⅠ)轻链四聚体前体链β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2m)的结构和功能,根据GenBank中公布的绵羊β2m基因设计特异性引物,提取小尾寒羊全血中的RNA并运用RT-PCR方法扩增绵羊β2m基因,将扩增的绵羊β2m基因克隆到pMD18-T载体,筛选出阳性克隆菌pMD18T-OLAⅠ-β2m,经双酶切后与表达载体pET-28a(+)连接,再转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中构建pET-28a(+)-OLAⅠ-β2m重组表达菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白大小及表达情况;运用SOMPA在线软件预测OLAⅠ-β2m蛋白的二级结构。PCR扩增结果显示,目的基因大小为357 bp,与理论值相符,扩增片段成功克隆到pMD18-T载体,经EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切筛选及测序,成功获得阳性克隆菌株pMD18-T-OLAⅠ-β2m,插入的目的片段大小为357 bp。阳性克隆菌株与表达载体pET-28a(+)经EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后获得pET-28a(+)-OLAⅠ-β2m重组表达菌,经IPTG诱导表达,Western blotting检测目的蛋白大小为17.3 ku,目的蛋白在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达,经洗涤、变性、纯化、初步获得SDS-PAGE纯化的OLAⅠ-β2m蛋白;PORTER在线软件预测OLAⅠ-β2m蛋白的二级结构元件α-螺旋(Hh)、β-折叠(Ee)和无规则卷曲(Cc)分别占22.03%、22.03%和55.93%。本研究成功构建了小尾寒羊β2m基因的pET-28a(+)重组表达体系,运用SOMPA在线软件预测OLAⅠ-β2m的二级结构,为下一步绵羊OLAⅠ类分子四聚体的构建奠定基础。 相似文献
36.
一、创新观念,提高土地流转的积极性.家庭承包经营制度的农户小规模经营与现代农业集约化经营的矛盾,有关部门要立足为民办实事,加强土地流转工作的引导,把它列入重要的议事日程,结合实际,多形式、多渠道、积极稳妥地开展土地流转工作,把土地流转与农业产业结构调整有机结合起来,促进资源的合理配置,推动农业产业化发展. 相似文献
37.
【目的】对绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger蛋白的基因进行克隆,表达以及序列分析,初步探究绵羊痘病毒RING finger蛋白是否具有E3泛素连接酶活性,为阐明其在绵羊痘病毒感染过程中对泛素蛋白酶体系统的调控作用奠定基础.【方法】以绵羊痘病毒甘肃古浪株DNA为模板,通过PCR扩增RING finger基因.利用Pfam数据库、DNAstar等软件进行序列及遗传进化分析;将RING finger基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-SPPVRFP重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并进行SDS-PAGA和Western-blot分析.【结果】绵羊痘病毒RING finger基因由723个核苷酸组成,编码的240个氨基酸的分子量约为28.5 ku,具有RING finger结构域.不同羊痘病毒株间RING finger基因核苷酸序列同源性高达99.2%,氨基酸序列同源性高达98.3%.不同的RING finger蛋白都含有8个保守的半胱氨酸和组氨酸.SDS-PAGA分析显示,重组SPPVRFP大小约为55 ku,Western-blot分析显示,重组SPPVRFP不能与绵羊痘病毒阳性血清反应.【结论】成功克隆、表达并纯化了绵羊痘病毒RING finger基因,对SPPV GS-GL株RING-finger蛋白进行序列分析,推测其可能具有E3泛素连接酶活性. 相似文献
38.
[目的]分析一字竹象甲在丽水地区的为害情况及在毛竹笋上的产卵规律,研究"笋尖套袋结合饵笋诱杀防治技术"的防治效果,为一字竹象甲的防治提供技术参考。[方法]以丽水地区龙泉市、庆元县、遂昌县为研究区域,统计丽水地区一字竹象甲的为害面积及为害程度;设置试验样地,统计虫害笋上不同区间内一字竹象甲的产卵数量;设置处理样地与对照样地,统计样地的虫株率及竹笋单位虫孔数量。[结果]2010—2014年,丽水地区一字竹象甲平均每年发生面积为3 127.6 hm~2,呈现增长的趋势;一字竹象甲在竹笋的产卵部位主要集中在笋尖以下30~40 cm、40~50 cm、50~60 cm三个中部区间内,其产卵量显著高于其他区间;采用笋尖套袋结合饵笋诱杀防治,处理样地的虫株率比对照样地小27.1百分点,单位虫孔数量诱饵笋比对照样地竹笋多15.35个,差异均为极显著。[结论]丽水地区的一字竹象甲防控形势较为严峻;塑料薄膜套袋的长度至少应在60 cm以上;笋尖套袋结合饵笋诱杀防治技术对一字竹象甲的防治效果十分显著。 相似文献
39.
为将我省鄱阳湖区建设得更加美丽富饶,发挥其“鱼库”、“粮仓”之优势,省人民政府从一九八二年起,成立了鄱阳湖综合考察办公室。省政府在组织大批专家、学者深入鄱阳湖区进行科学考察的基础上,规划和制订了治理开发鄱阳湖的科学研究课题。 相似文献
40.
随着社会主义市场经济体制的逐步建立和完善,农村经济日趋繁荣,农民对农业机械的投入比例不断增大,农业机械化的发展速度呈不断加快之势.到1999年底,全省农机总动力达到233万千瓦,拖拉机保有量15.5万台,其中大型拖拉机保有量为2585台,联合收割机保有量达到800台左右,脱粒机8700台,全省耕地、播种、收获机械化水平分别达到50.45%、60.7%和22.16%.农业机械化的快速发展,为增加农民收入,壮大农村经济实力,做出了巨大贡献.为农民致富奔小康增添了活力和后劲. 相似文献