猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL~1.0×10~7拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%~0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。     

浅谈湖北省农村养羊业存在的问题及对策

通过对湖北省农村养羊户走访调研,总结了湖北省农村养羊业当前存在的问题,并提出了一套有效的应对措施。     

花生花芽分化与外部形态的关系

关于花生花芽分化发育时期的划分,国内外都有报道,尽管对花芽分化所划分的期数还不统一,但对花芽分化过程作了较详细的描述。至于花芽分化与外部形态的关系,目前研究较少,为了摸清其分化的规律,1982年秋至1983年秋共三造根据华南师大罗葆兴和广东农科院经作所叶柏荣等同志对花芽分化发育时期所划分的期数,观察了花芽分化与外部形态的关系。现将观察结果整理如下:     

雏鸡感染鸡传染性贫血病病毒分布情况研究

将鸡传染性贫血病毒强毒株C364和弱毒株C545分别接种1日龄鸡传染性贫血病毒抗体阴性的健康雏鸡,于接种后第7天和14天每组抽查3只测定血球压积值,并在接种后第1、3、5、7、10和14天各组分别宰杀3只雏鸡,取胸腺、肝脏和骨髓组织,用竞争性PCR测定其病毒含量.结果表明,雏鸡感染CAV,后表现为血球压积值下降,其中强毒感染鸡较弱毒感染鸡的红细胞压积值下降幅度大;病毒能够在雏鸡胸腺、肝脏和骨髓内繁殖,其中胸腺内病毒增殖最快,病毒滴度最高,肝脏其次,骨髓最低.     

禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究Ⅰ报——疫苗的制备、免疫效果及安全性试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获菌液,经灭活后制备成油乳剂灭活疫苗,应用该疫苗分别免疫18日龄雏鸡和60日龄以上的青年鸡;18日龄雏鸡免疫量为每只0.25mL,免疫后2周可测到ND抗体HI≥1∶16,3周攻毒ND保护率为100%;90～120日龄鸡免疫量为每只1mL,免疫3周攻毒,禽霍乱保护率为87.5%～100%.安全性试验表明,18日龄雏鸡注射0.5mL、120日龄鸡注射2mL疫苗,观察14天,无不良反应.     

高致病性PRRSV浓缩灭活疫苗的研制及免疫效果

[目的]研制高致病性PRRSV浓缩灭活疫苗。[方法]分别以病毒液、病毒浓缩液作为抗原,以甲醛、β-丙内酯为灭活剂,制成A、B、C、D 4种灭活疫苗,进行物理性状和无菌检验,安全检验合格后,与商品疫苗E进行免疫效果比较。[结果]4种疫苗均有良好的安全性。免疫后35 d,未浓缩抗原的A、C疫苗及商品疫苗E组抗体均未阳转,浓缩抗原的B、D疫苗组抗体阳转率分别达到80%和100%。[结论]浓缩病毒液制成的灭活疫苗比未浓缩病毒液制成的灭活疫苗及商品疫苗具有较好的免疫效果。     

猪奇异变形杆菌的分离与鉴定

[目的]弄清湖北江夏某猪场保育猪发病的原因.[方法]通过临床解剖、病原分离鉴定和生化鉴定,对病猪的致病菌进行鉴定.[结果]确定为该猪场猪发病是由猪奇异变形杆菌引起的.该菌对小鼠的毒力较强.药敏试验试验表明,该菌对头孢噻肟、头孢曲松及丁胺卡那霉素高度敏感.[结论]该病的防治措施主要包括对猪舍进行消毒,用敏感药物对健康易感猪群拌料和饮水,对发病猪可用敏感药物进行治疗.     

猪瘟病毒检测技术研究进展

综述了猪瘟病毒检测技术的研究现状,并对今后的研究趋势进行了展望。     

猪基因工程复合干扰素对仔猪病毒性疾病防治效果观察

以武汉市和江汉平原2个规模猪场发生猪瘟、猪蓝耳病等病毒性传染病为对象,用猪基因工程复合干扰素配合常规药物进行了预防和治疗效果试验.结果:干扰素配合常规兽药治疗总有效率分别为87.2%、84.6%;与对照组总有效率29.1%、26.1%相比较.差异极显著(P<0.01);干扰素对病毒性疾病预防试验仔猪成活率分别为95.8%、93.6%,与对照组成活率54.7%、68.1%相比较,差异极显著(P<0.01).试验表明,猪基因工程复合干扰素对规模猪场仔猪病毒性疾病防治效果良好.     

猪流行性腹泻病毒湖北株的分离鉴定及其s1基因进化分析

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是猪的肠道传染病病原,主要引起仔猪呕吐、腹泻和脱水,对一周龄内的哺乳仔猪危害最为严重,死亡率可达50%~100%。利用Vero86细胞从湖北某猪场腹泻仔猪小肠病料中分离到一株病毒,经RT-PCR检测、序列比对后确定其为PEDV,命名为HB201503株。设计PEDV s1基因的全长扩增引物,获得该株病毒的s1基因全长序列并进行了进化分析,结果表明该毒株与近年来在Gen Bank登陆的PEDV s1基因核苷酸序列相似性在91.4%~99.2%,与疫苗株CV777相似性较低,仅为91.8%。通过s1基因进化树分析表明HB201503以及近几年国内分离毒株主要集中在第I个亚群,且HB201503株与KM406183(2014,四川)和KM609206(2015,江苏)同源性较高。此外,s1蛋白氨基酸序列比对显示,HB201503与近几年分离毒株及疫苗株CV777均在55-74、157-163位氨基酸出现了连续4个以上氨基酸的缺失或替换,而且HB201503株与CV777及近几年分离毒株相比,还在270-283位氨基酸上出现了1个氨基酸的缺失和10个氨基酸的替换。