盐角草Cu/Zn-SOD基因的克隆及耐盐性分析

盐角草(Salicornia europaea)是一种典型的耐盐植物,为了研究盐角草Cu/Zn-SOD基因在的盐胁迫耐受中的机制,本研究利用已知植物Cu/Zn-SOD基因的保守序列设计简并引物,采用RACE技术的方法从盐角草中扩增获得Cu/Zn-SOD基因。使用生物学软件分析其氨基酸序列,并进行同源性比对。构建原核表达载体,转化大肠杆菌(Escherichiacoli),使目的蛋白在重组菌中表达,并分析了不同盐浓度并含有抗生素的液体LB培养基中菌的生长情况,IPTG诱导表达,通过测定OD600值来分析Cu/Zn-SOD基因的耐盐功能。结果通过简并引物PCR扩增和RACE技术,克隆出盐角草Cu/Zn-SOD基因。盐角草Cu/Zn-SOD基因(GenBank登录号:JQ074238.2)全长为660bp,开放阅读框长为459bp,推测编码152个氨基酸,蛋白分子量约为15.1kD,其氨基酸序列与碱蓬(Suaedasalsa)的序列相似性为96%,与黄灯笼辣椒(Capsicum chinense)的序列相似性为88%。生物学软件分析表明Cu/Zn-SOD蛋白可能存在于细胞质。构建原核表达载体pET-Cu/Zn-SOD和对照pETDuet-1,转化大肠杆菌BL21中。蛋白经IPTG诱导表达。经SDS-PAGE蛋白电泳检测发现表达蛋白条带大小与预期一致,说明目的蛋白成功表达。耐盐性分析表明重组菌BL21(pET-Cu/Zn-SOD)在高盐度培养基中的生长明显优于对照菌BL21(pETDuet-1),说明盐角草Cu/Zn-SOD基因可能在盐胁迫逆境中起到耐受性作用。     

藏绵羊不同毛色皮肤组织miRNA表达谱及靶基因分析

【目的】藏绵羊又称藏系绵羊,是中国三大粗毛羊品种之一,主要分布在西藏及其毗邻的高寒牧区,如青海、甘肃、四川、云南等地。藏绵羊由于其被毛纤维粗长,毛质细腻且保暖性好,是制造藏式地毯的上好原料。而毛色作为一种重要的经济性状,同时制约羊毛的经济价值。然而,目前对于绵羊毛色的分子调控机制尚不明确,以藏绵羊为研究对象,对其不同颜色皮肤组织（黑色和白色）进行转录组测序,旨在探讨miRNA在藏绵羊不同毛色皮肤组织转录后水平中发挥的作用及其可能参与的调控通路。【方法】选取2只具有黑白花毛色的健康藏绵羊,减去体侧被毛使皮肤完全裸露并用75%酒精消毒处理,屠宰后快速切取皮肤组织并保存在组织样品保存液中防止RNA降解,提取RNA后通过miRNA测序和生物信息学分析,获得藏绵羊不同毛色（黑色和白色）皮肤组织miRNA表达谱,筛选组织差异表达miRNA并预测相关靶基因。通过靶基因分析,获得与调控藏绵羊毛色性状可能相关的信号通路。【结果】黑色和白色皮肤组织共获得85.76兆条原始读长,经过滤后得到85.08兆条clean reads;共鉴定出334个已知的miRNA和59个新的miRNA;从中获得23个差异表达miRNA,其中14个差异表达miRNA在白色皮肤组织中表达显著上调,9个表达下调。miR-2284b和miR-744仅在藏绵羊白色皮肤中表达,而miR-23b、miR-411a-5p、miR-30c、miR-423-3p和miR-324-5p则仅在藏绵羊黑色皮肤中表达,但表达量相对较低。表达量最高的miRNA为miR-10a,而倍数差异最大的为miR-23b。其中,miR-10a可参与调节多种信号通路,其作用涉及增殖、分化、凋亡、细胞粘附等各个方面,目前并无调控绵羊毛色方面的相关报道,但其功能及作用机制的研究仍在不断扩展。miR-23b则与Wnt、Notch等信号通路有关,这些信号通路中的部分基因也和黑色素的生成有密切关系。结合倍数差异和miRNA表达量分析,miR-411a-5p、miR103和miR-200b可能也和毛色调控密切相关。本研究共预测出981个靶基因可能参与毛色调控,多数基因和WNT信号通路、MAPK通路、EDNRB信号通路及黑素原生成通路（melanogenesis pathway）相关,其中黑素原生成通路显示和WNT信号通路、KIT信号通路及EDNRB信号通路相互关联。黑素原生成通路显示藏绵羊不同毛色可能最终通过MITF基因调控下游的TYR基因（酪氨酸酶基因）影响黑色素的合成。同时,筛选7个差异表达miRNA进行定量验证,结果表明,5个miRNA在黑色皮肤组织中上调表达,2个miRNA在白色组织中上调表达,定量结果与测序结果一致。【结论】获得了藏绵羊皮肤组织miRNA表达谱,并通过生物信息学分析得到可能和调控毛色性状相关的miRNA和信号通路。这些结果表明,藏绵羊毛色性状可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路,这有助于更进一步了解毛色转录后水平的调控过程,并对进一步的功能验证奠定基础。     

建设森林康养国有林场的思考——基于淳安县林业总场的实践

森林康养是发掘森林综合服务功能的重要载体。浙江省淳安县林业总场建设森林康养林场具有得天独厚的特色优势,坚持生态保护优先,发展森林康养产业,加快康养设施建设,实现了多层次目标的交汇。培育森林康养新生业态将是现代森林康养国有林场的发展趋势。     

千岛湖消落带植被重建区野生动物红外相机监测初报

以千岛湖消落带植被重建区为研究区域,利用红外相机对消落带植被区内的主要野生动物进行了初步调查,结果表明:8台红外相机累计738个总有效监测日共拍摄个体独立照片83张,全部为省级一般保护动物其中野猪(Sus scrofa)照片81张,鼬獾(Melogale moschata)2张。千岛湖库区消落带植被重建后为地栖兽类活动增加了栖息空间,与自然针阔混交林相比没有差异,而在无植被的库区消落带则没有拍摄到野生动物,消落带植被重建效果初显。     

长×大×通、大×长×通杂交猪及其亲本的生长性能、胴体性状和肉品质比较研究

试验以通城猪为母本,长白猪（瑞典）、大白猪（英国）为父本进行三元杂交,对两个三元杂交猪（长×（大×通）、大×（长×通）,简称为长×大×通、大×长×通）及亲本分别从生长性能、胴体性状及肉品质方面进行了比较。结果显示,长×大×通和大×长×通三元杂交猪的生长性能、胴体性状及肉品质均表现出较好的杂种优势。长×大×通三元杂交猪的测定期平均日增重、料重比、活体背膘厚、剪切力、大理石纹和肌内脂肪含量的杂种优势率分别为12.54%、-13.89%、10.39%、-8.71%、-8.33%和8.57%,大×长×通的杂种优势率分别为10.81%、-11.05%、10.55%、-6.50%、6.67%和2.44%。长×大×通和大×长×通两者比较,长×大×通三元杂交猪的试验期平均日增重、眼肌面积及腿臀肉骨率分别为843.4 g/d、34.51 cm²和73.54%,大×长×通三元杂交猪分别为808.6 g/d、31.45 cm²和70.67%,二者差异均显著（P<0.05）。综上所述,以通城猪为母本进行的两个三元杂交猪的生长和胴体性状显著优于亲本通城猪,肉质显著优于亲本长白猪和大白猪,且长×大×通组合优于大×长×通组合。     

EM菌剂调制甘蔗梢及饲喂德宏水牛的效果

[目的]本试验旨在探讨规模化生产条件下,比较了EM菌对甘蔗梢青贮品质及育肥效果的影响,为充分开发利用甘蔗梢发展养牛业提供依据。[方法]通过对青贮甘蔗梢和添加EM菌剂青贮甘蔗梢的营养成分、纤维素的测定和饲喂育肥试验对比。[结果]表明：①直接青贮pH值为3.9,添加EM菌剂青贮的pH值为3.8,两者的感官评定均达到优质标准。②鲜甘蔗梢经直接青贮后,粗蛋白含量减少了13.5%,而粗脂肪提高了23.6%,差异显著（P〈0.05）。③经EM青贮后,CP、EE和Ash含量显著增加（P〈0.01）,分别比直接青贮提高了62.0%、36.8%和6.0%。④在不补饲精料的情况下,对退役水牛饲喂直接青贮的甘蔗梢青贮饲料,平均日增重（ADG）仅为33g;饲喂EM青贮,ADG得到了极显著的提高,为314 g（P〈0.01）;每头每天再补给0.5 kg肉牛浓缩料和2.0 kg、4.0 kg精料补充料,ADG分别达到820 g1、065 g和1 431 g,差异极显著（P〈0.01）。[结论]EM菌剂能显著提高甘蔗梢的消化利用率及适口性;甘蔗梢添加EM菌剂微贮后育肥退役水牛,日增重和经济效益显著高于直接青贮。     

两种热带禾本科牧草的营养价值及变化动态评价

对比研究了两个地方牧草品种盈江危地马拉草和德宏象草的生长发育及主要营养成分的季节变化。结果表明:两种牧草的生长发育模式存在较大差异;相同物候阶段,德宏象草的营养价值略优于盈江危地马拉草,但相同生长天数的盈江危地马拉草营养价值优于德宏象草;从季节变化角度分析,盈江危地马拉草营养价值可较长时间保持相对稳定,但德宏象草随生长时间延长下降迅速。两个品种的物候发育及营养价值变化特点决定了两种牧草的利用方式不同,生长季内德宏象草适合多次刈割利用,盈江危地马拉草则适合采取较少次数的刈割方式。     

应用二花脸与大约克猪建立参考家系进行连锁分析的研究

应用１头德国大约克公猪及３头二花脸母猪通过回交法（父女交配）建立了参考家系，采集了１５４头个体的血样，对１２号染色体 微卫星位点（ＳＷ９５７、ＳＷ１５５３、ＳＷ１３５０、ＳＷ８７４）检测了每个个体的基因型，应用ＣＲＩＭＡＰ程序进行了连锁分析得出了３个位点在猪１２号梁色体上的最佳排序为：ＳＷ１５５３－ＳＷ１３５０－ＳＷ８７４。其中在ＵＳＤＡ－ＭＡＲＣ家系中由于未检测到重组而不能排序的两个位点（ＳＷ１     

千岛湖林相改造历程与方向

文章回顾了淳安县新安江开发总公司对千岛湖林相改造历程,分析了存在的问题,提出了新时期千岛湖林相改造的建议与方向。     

巍山县肉牛常用饲料营养价值评定

对巍山县19种肉牛常用精、粗饲料的营养价值进行综合评定,测定了常规营养成分、范氏纤维成分、体外消化率、瘤胃降解率及能量价值。结果表明:不同饲料之间的营养成分、体外消化率、瘤胃降解率和有效能含量存在较大差异,优质粗饲料较秸秆饲料高,优质牧草较野生牧草高,而肉牛浓缩料和肉牛精料补充料比玉米面和牧草提供较大比例的过瘤胃蛋白。