新城疫病毒疫苗株F蛋白裂解位点改造对诱导HepG2细胞发生自噬的影响

新城疫病毒(NDV)通过启动不依赖p53的内源性凋亡通路特异性诱导肿瘤细胞凋亡.最新研究表明NDV可以引起U251肿瘤细胞发生自噬,并在后期导致细胞凋亡,但其机理尚不清楚.本研究通过反向遗传操作技术对NDV Clone30疫苗株F蛋白的碱性裂解位点进行突变,将F蛋白的裂解位点由弱毒株的GGRQGR ↓ L突变为强毒株的GRRQRR ↓ F基序,并成功拯救出突变改造病毒rC30-FmF.分别将Clone30野生型病毒株rC30-wt与rC30-FmF感染HepG2肝癌细胞,通过透射电镜检测细胞超微结构显示,rC30-FmF感染4h后细胞内出现大量自噬小体及自噬溶酶体.通过westem blot检测自噬标志蛋白LC-3 Ⅱ表明,rC30-FmF感染4h后LC3Ⅱ表达量显著上调,与rC30-wt对照组相比差异极显著(p＜0.01).研究表明,rC30-FmF可以在感染早期增加HepG2细胞自噬程度.从而初步证明F蛋白的裂解位点在诱导HepG2细胞自噬过程中具有关键作用.     

我国牛轮状病毒的分离鉴定和疫苗研究进展

约50%的犊牛腹泻是由牛轮状病毒(Bovine Rotavirus, BRV)引起的,它制约着我国养牛业的发展.论文综述了牛轮状病毒毒株的分离、鉴定方法及疫苗研制的现状,并对BRV新型疫苗的发展趋势进行了展望.     

黑龙江省猪、犬旋毛虫隔离种对兔的感染性研究

本文以旋毛虫国际标准种:旋毛形线虫(Trichinella spiralis)和本地毛形线虫(Trichinella nativa)为对照,从生物学方面对黑龙江省猪、犬旋毛虫病进行了分类研究,研究结果表明,4个旋毛虫隔离种对兔的感染性存在着明显差异,猪旋毛虫和T.spiralis对兔的感染性较强,其在兔体内的繁殖力指数(RCI)分别为62.29和143.05;而犬旋毛虫和T.nativa对兔易感性差,其在兔体内的RCI分别是10.65和12.19。     

叶黄素循环的启动:外源AsA对欧李幼苗干旱胁迫的缓解

为给提高欧李幼苗植株耐逆性提供理论指导,研究了在干旱胁迫下外源抗坏血酸(AsA)对欧李幼苗叶片光合作用和叶黄素循环的影响,并结合抑制剂与分子生物学的手段进一步研究玉米黄质(Z)形成的机制。结果表明,外施AsA缓解了干旱胁迫引起的欧李叶片光饱和点的降低,促进了内源AsA的产生,增加了叶黄素循环中Z的含量,使更多的紫黄质(V)转化成单环玉米黄质(A)和Z。AsA还能在转录水平提高紫黄质脱环氧化酶(VDE)的表达,而对玉米黄质环氧酶(ZEP)的作用不显著。抑制剂二硫苏糖醇(DTT)能显著抑制叶黄素的脱环氧化状态,但葡糖胺(Gla)作用不显著。表明外源AsA通过启动叶黄素循环增加胁迫下的热耗散能力,从而提高植株的抗胁迫能力,其中VDE对叶黄素循环的启动起到主要作用。     

大豆高赖氨酸基因PM8在烟草中的超量表达及其抗非生物胁迫功能研究

应用生物信息学方法在GenBank数据库查找到1条编码大豆LEA3蛋白的高赖氨酸蛋白基因PM8(登录号:Z22872),并利用RT-PCR方法从大豆干种子中克隆得到该基因,序列分析表明,PM8基因与GenBank上的序列存在5个碱基的差异,使编码蛋白的赖氨酸重量比由原来的19.65%增加为19.93%。构建了PM8基因的植物表达载体pEMT-PM8,用农杆菌介导法转化烟草。从转PM8基因的PCR阳性植株中选取5个既抗盐又抗旱的株系进行Real-timePCR检测。结果表明,PM8基因全部超量表达。研究为培育高营养品质且抗逆的转基因作物研究提供了一条新的途径,具有重要的研究价值。     

饲喂益生素雏鸡新城疫疫苗免疫后外周血液的体液免疫变化

为了研究益生素与疫苗的体液免疫增强联合效应,应用免疫SPA菌体花环法、间接ELISA法对饲喂益生素雏鸡ND疫苗免疫后,其外周血液B淋巴细胞数量、IgG、IgM和IgA含量的动态变化进行了较全面系统地研究。结果发现,应用益生素的雏鸡ND疫苗免疫后7d内,其上述被检指标显著高于ND疫苗单独免疫雏鸡(p0.05),表明益生素可提高雏鸡外周血液对ND疫苗的体液免疫应答能力。益生素Ⅰ组雏鸡外周血液的体液免疫指标又略高于益生素Ⅱ组雏鸡,说明益生素Ⅰ的疫苗免疫增强效果优于益生素Ⅱ。     

秸秆生物处理技术研究——微生物生态组合及发酵因素优化

本试验从微生态学考虑筛选并组合了发酵玉米秸的微生物种系，对影响混合微生物发酵玉 主秸的温度、时间、水分三因素作交叉分组设计；通过ＮＤＦ、ＡＤＦ含量分析，探索了各因素有交互作用对秸秆发酵效果的影响，初步明确：温度为１５、２０、２５、３０℃，料水比为１：１、１：２时，发酵时间１５、３０ｄ可行。     

香鳞毛蕨不同生境土壤养分与微生物多样性的研究

以黑龙江省6个香鳞毛蕨主产地(五大连池二池、五大连池三池、老黑山、镜泊湖、民俗村、镜泊峡谷)土壤为试材,利用常规实验室分析法和Biolog-Eco微平板法,研究了黑龙江省香鳞毛蕨产地土壤微生物的群落特征。对土壤养分、多样性指数及不同生境土壤对碳源的利用情况进行分析。结果表明:1)土壤有机质、全氮含量表现为老黑山最低,其他香鳞毛蕨产地间差异不显著;土壤碱解氮含量表现为五大连池三池五大连池二池民俗村、老黑山、镜泊湖、镜泊峡谷;土壤全磷含量表现为五大连池三池、五大连池二池最低,其他香鳞毛蕨产地间差异不显著;土壤速效磷含量表现为镜泊湖火山群样地较低,五大连池火山群样地较高;全钾含量表现为镜泊湖、老黑山五大连池二池、民俗村、镜泊峡谷、五大连池三池;速效钾含量表现为镜泊湖民俗村老黑山、镜泊峡谷、五大连池三池五大连池二池;缓效钾含量表现为老黑山五大连池三池五大连池二池镜泊湖、镜泊峡谷民俗村;pH介于5.38~6.56,且不同样地pH变化范围较小,变异系数为8.99%。2)各产地的土壤微生物群落功能多样性指数表现为镜泊湖镜泊峡谷、民俗村老黑山五大连池二池、五大连池三池。3)不同香鳞毛蕨产地土壤微生物碳源利用的主成分分析(PCA)表明糖类、氨基酸类、多聚物类、羧酸类、胺类和酚酸类碳源是香鳞毛蕨土壤微生物功能多样性差异的敏感碳源。4)聚类分析表明,五大连池二池和三池的土壤微生物具有相近的碳源利用模式,镜泊湖和镜泊峡谷土壤微生物的碳源利用模式相近,而老黑山和民俗村土壤微生物的碳源利用模式相近。