利用BSMV-VIGS技术快速分析小麦TNBL1基因的抗黄矮病功能

小麦黄矮病是由蚜虫介导的大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus, BYDV)侵染引起的小麦重要病害之一。利用cDNA-AFLP分析,筛选出在抗黄矮病小麦易位系YW642中特异表达的长度为292 bp的 cDNA片段,以此片段为启始序列,利用RACE和RT-PCR技术克隆出该基因的全长cDNA序列,推导该基因编码1个NBS-LRR蛋白,将其命名为TNBL1。本研究利用大麦条纹花叶病毒(BSMV)诱导的基因沉默(virus-inducing gene silencing, VIGS)技术,快速分析TNBL1是否参与小麦抗黄矮病反应。通过PCR添加酶切位点、定向酶切与连接,将TNBL1特异的292bp片段反向整合到BSMV-γ链的多克隆位点上,获得重组载体BSMV-γ: TNBL1as,体外转录BSMV-VIGS载体的3个组分(BSMV-TNBL1as、BSMV-α和BSMV-β),等量混合、摩擦接种到抗黄矮病的小麦易位系YW642幼苗叶片上,使YW642中TNBL1基因沉默,然后接种BYDV病原进行黄矮病抗性鉴定。结果表明,TNBL1基因沉默后的YW642对BYDV敏感、显现感病症状,其体内BYDV含量较未发生基因沉默的YW642中的明显增加,证明TNBL1基因是正向调控小麦抗BYDV反应的1个重要基因。     

利用离子束注入技术筛选陆地棉矮化株

[目的]降低棉花生产中每年因喷施缩节胺和打顶等农技措施增加的棉花生产成本,促进增产增收,提高棉农收益.[方法]2005年4月通过离子束注入技术,分别用注入剂量为8×1016和12×1016N+/cm2处理早熟陆地棉高代品系B-02,从中获取棉花矮化突变体植株.[结果]通过2005～2009年连续多代的筛选获得了不用喷缩节胺、不用打顶、株高小于60和60～70cm,且品质优于原高代品系B-02的两个系列矮化株系.[结论]通过对矮化植株的SSR分析,表明矮化突变株与原高代品系B-02相比具有较多的遗传差异,为新疆棉花矮化育种创造了新的种质资源.     

梨矮化砧对早金香矮化性及叶片矿质元素含量影响

[目的]以3种矮化砧木做中间砧嫁接早金香梨,进行矮砧嫁接树矮化效应及叶片矿质元素含量研究.[方法]根据公式计算致矮系数;分别采用凯氏法、钒钼黄比色法和火焰光度法测定N、P、K含量,Ca、Mg、Fe、Zn含量的测定采用原子吸收光度法.[结果](1)3个矮化砧木对早金香梨嫁接树均有显著的致矮作用,致矮效果由大到小依次为:中矮2号＞ 82-5＞中矮1号;(2)早金香梨嫁接树叶片中,被测矿质元素均与对照有极显著差异,其中,中矮1号、82-5做矮化砧的嫁接树叶片中,N、Ca、Mg、Fe含量均表现升高的趋势,Fe分别升高了66.5;和53.6;;而中矮2号做矮化砧的嫁接树叶片中,所测定的矿质元素的含量均有不同程度的下降,其中K和Ca的降低程度均超过了10;.[结论]中矮2号为矮化砧木类型,82-5、中矮1号为半矮化砧木类型;中矮1号、82-5矮化中间砧能促进嫁接树对矿质元素的吸收,尤其是对Fe的吸收,而中矮2号矮化中间砧作用相反,需增施肥加以改善.     

安徽桑黄花型萎缩病植原体16S rDNA序列分析及分子检测

 Mulberry yellow dwarf(MYD)disease is an quarantine disease and the causal agent is a phytoplasma.Two pairs of published universal primer, P1/P7 and Rm16F2/Rm16R1, based on the 16S-23S rDNA sequence of phytoplasma and total DNA extracted from infected mulberry tissues were employed for PCR and nested-PCR detection.The results revealed that a phytoplasma-specific 1 830 bp fragment with a G+C content of 46.01% was sequenced(GenBank accession No.GQ249410).The sequence shared 99.7% and 99.8% identity with aster yellows, the representatiive phytoplasma in 16SrI group, and mulberry dwarf phytoplasma classified into subgroup B in 16SrI group and named as the MYD phytoplasma strain Anhui(MYD-Anh).A phylogenetic tree based on 16S rDNA sequences was constructed and showed that MYD-Anh was clustered into 16SrI group.Identity of 16S rDNA sequence between MYD-Anh and mulberry yellow dwarf phytoplasma strain Zhenjiang(MD-zj) was nearly 100%, and they might belong to the same strain.Nested-PCR was used to detect the pathogenic phytoplasma from the differential tissues of mulberry infected with MYD-Anh.The results showed that a phytoplasma-specific 1.4 kb fragment was amplified with total DNA extracted from bark and vein.Nested-PCR was more sensitive than PCR for detecting MYD phytoplasma.     

观赏地被竹类引种选育及其园林应用

本文针对江苏地区的气候条件,对观赏地被竹类进行了引种选育与应用研究。经10多年的引种选育试验,从引种原则、引种驯化、引种试验、园林应用推广等方面,形成一套成功的地被观赏竹引种选育栽培技术。总结探讨了大力发展规模化观赏地被竹容器育苗作为观赏竹类应用推广重要技术思路。筛选出适合江苏引种栽培的地被竹类植物,分析了观赏地被竹园林的应用与推广。     

水稻矮缩病毒对3种内源激素含量及代谢相关基因转录水平的影响

本文以抗病品种宜香2292(Oryzas ativa L. ssp. indica cv. Yixiang 2292)为材料,采用高效液相色谱技术(HPLC)和Real-time PCR技术研究了水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)胁迫下水稻内源赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)的动态变化。结果表明,受RDV侵染后,病株体内GA3含量显著低于健株,在显症后的第1d和第10d最为明显,分别较健株低6.28和5.92倍;IAA含量呈现波动变化,但病株体内的IAA含量始终较健株低,在显症后的10d最为明显,比健株低3.58倍;与GA3和IAA相反,病株体内ABA的含量始终高于健株,显症后的第1d和第13d最为明显,分别较健株高2.29和2.84倍。Real-time PCR定量检测了植物内源激素相关基因mRNA的表达,结果显示,GA3代谢相关的氧化还原酶基因表现为下调,而IAA和ABA代谢相关的Cullin-1和P-glycoprotein1基因表现出不同程度的上调。以上结果表明:水稻矮缩病的症状表现可能与病株体内的植物内源激素失调有关。     

不同矮化处理对水仙内源激素的影响

以中国水仙(Narcissus tazettaL.var.chinensis Roem)为材料,用前期试验筛选出的最佳矮化浓度:A 50 mmol.L-1、B24.5 mmol.L-1、PP33340 mg.L-1及人工模拟气候处理水仙植株,矮化处理后水仙叶片IAA、GA3含量、(IAA+GA3)/ABA比值均显著降低;ABA含量的变化则因处理方式的不同呈现不同的变化趋势;A和B矮化处理降低了Trans-Z、DHZR的含量和(Trans-Z+DHZR)/ABA的比值。并确定了高效液相色谱测定水仙叶片IAA、ABA、GA3及Trans-Z、DHZR含量的检测条件。     

广西粉蕉生产存在的问题及发展对策

介绍了广西粉蕉的生产概况,指出广西粉蕉生产存在尖孢镰刀菌枯萎病发生严重,易遭根结线虫、象鼻虫、红蜘蛛、蓟马和烟霉病等病虫危害,品种少,种植技术不完善等问题;提出开展对香蕉枯萎病的发病、传播机理和化学防治的基础研究,开展粉蕉种植技术集成、试验、示范及品种选育研究等对策。     

近几年来水稻黑条矮缩病重发生特点及原因分析

近几年来水稻黑条矮缩病在连云港市呈逐年加重趋势。笔者在总结其发生特点的基础上,分析病害流行的原因,主要与耕作制度、灰飞虱种群数量、栽培方式、品种抗性等因素有关,同时提出了防治对策。     

抗、感玉米粗缩病材料对灰飞虱的趋性及生存力影响的研究

通过网棚内人工接种1叶1心至11叶1心期的3份抗玉米粗缩病自交系材料(DB544、沈137、90110)和3份感粗缩病玉米自交系材料(掖107、掖478、5003),调查其发病率,明确了抗病材料7叶前的抗病性与7叶后一致,感病材料7叶后的抗病性比7叶前要强;由此认为,玉米苗期为研究抗、感玉米粗缩病材料对灰飞虱的趋性及生存力影响的适宜时期。进而研究了相同环境条件下,网箱或网罩内灰飞虱在抗、感玉米材料上的落虫数和灰飞虱在上述6份材料上饲养死亡50%的时间。结果显示:灰飞虱对抗、感玉米粗缩病材料的趋性以及灰飞虱在抗病材料和感病材料上的生存力差异均不显著,认为玉米对粗缩病的抗性不是通过抗传毒介体灰飞虱而实现的。