SYBR Green I荧光RT-PCR法检测H5亚型禽流感病毒

用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6,12,24,48,72 h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene RG3 000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测,试图建立快速检测H5亚型AIV的real-time RT-PCR方法,并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测。结果表明：农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的teal-time RT-PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV,与常规RT-PCR比较,该方法更加特异、准确、快速。     

从省运会看湖北青少年竞技体育区域特征

采用调查法和文献资料法,收集整理了第14届省运会比赛的有关资料,分析了湖北省青少年竞技体育发展的行政体制体育区域特征和地理体育区域特征。研究表明,武汉、荆州、宜昌、黄石青少年竞技体育发展属于强势区域,比赛成绩和发展势头良好,潜江、天门、随州、神农架是青少年竞技体育发展弱势区域,缺乏竞争能力;按地理位置划分,武汉、江汉平原、鄂东南、鄂西南地区青少年体育竞技水平明显高于其他区域,但各区域具有自己的优势项目;更加科学合理地对青少年竞技体育项目统筹安排、合理布局并扬长避短,是发展湖北青少年竞技体育的必由之路。     

蜂胶和杨树胶中黄酮类成分及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

通过乙醇提取、液液萃取结合柱层析分离得到河南蜂胶和杨树胶中不同极性组分,利用高效液相色谱分析判定分离效果、确定分离成分;采用α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型评价各分离组分的体外降血糖活性;通过链脲佐菌素诱导的小鼠高血糖模型进行口服糖耐量实验,评价该分离组分体内抑制肠道内α-葡萄糖苷酶的功效。结果显示,蜂胶及其同源杨树胶的50%乙醇洗脱组分体外抑制α-葡萄糖苷酶效果最优,IC50值分别为39.03±2.76和28.28±3.79μg/mL,并能有效抑制糖尿病小鼠肠内α-葡萄糖苷酶活性,显著降低糖尿病小鼠的餐后血糖水平,有利于血糖水平恢复和保持血糖稳定;高效液相色谱分析结果发现,蜂胶及其同源杨树胶的50%乙醇洗脱组分中皆含有槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芹菜素、白杨素和高良姜素等黄酮类化合物。     

vMDV感染雏鸡的Se-GSH-PX活性和LPO含量

以马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）人工感染１日龄ＡＡ肉用雏鸡,于感染后７,１４,２８,４２和５６日龄分别检测雏鸡中枢、外周淋巴器官及主要内脏器官的含硒谷胱甘肽过氧化物酶（Ｓｅ－ＧＳＨ－ＰＸ）活性和脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量的变化。结果表明,ｖＭＤＶ感染雏鸡各器官Ｓｅ－ＧＳＨ－ＰＸ活性在检测各时期多显著低于健康对照雏鸡（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,而各器官ＬＰＯ含量则多显著高于健康对照雏鸡（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,提示马立克氏病（ＭＤ）及其肿瘤的发生和发展与Ｓｅ－ＧＳＨ－ＰＸ抗氧化活性降低和ＬＰＯ及其降解物对雏鸡的广泛病理损伤有关。     

食淀粉乳杆菌干预PRV GDNF和GSNO的ZO-1调控

为探究食淀粉乳杆菌在猪轮状病毒(PRV)感染乳鼠空肠组织中GSNO及GDNF对紧密连接蛋白ZO-1的影响,选择2日龄清洁级中国昆明鼠乳鼠作为试验动物,分为5组,正常对照组、轮状病毒组(RV组)、食淀粉乳杆菌组(L.a组)、预防性干预组(BI组)、治疗性干预组(AI组).空肠组织作为靶器官,分别应用实时荧光定量PCR检测GDNF和ZO-1 mRNA相对表达量,采用比色法检测抗氧化指标(NO、GSH、SOD、MDA、GSH-Px、CAT),通过ELISA定量检测GSNO和5-HT含量,Western blot检测ZO-1、GDNF、GFAP蛋白含量变化,免疫组化检测ZO-1蛋白分布表达变化.结果表明,食淀粉乳杆菌可显著上调ZO-1和GDNF mRNA相对表达量(P<0.05),RV组、BI组和AI组ZO-1和GDNF的mRNA相对表达量变化趋势相似,先升后降.攻毒后各时间点,L.a组5-HT含量均显著高于其他组(P<0.05),RV组5-HT含量高于对照组,低于BI组和AI组;L.a组GSNO含量均显著高于其他组(P<0.05),RV组、BI组和AI组GSNO含量整体变化趋势相似,均是先升后降;对于ZO-1、GFAP、GDNF蛋白表达,整体趋势相似,在攻毒后第2、3天表达量较显著,L.a组ZO-1和GFAP蛋白表达量比其他4组高,AI组GDNF蛋白表达量比其他4组高.免疫组化结果表明,L.a组ZO-1蛋白分布比对照组更连续均匀,BI组ZO-1蛋白分布较RV组更连续,AI组与RV组无明显差异.RV组NO含量和MDA含量显著高于其他组(P<0.05),L.a组NO和MDA含量保持不变,BI组和AI组NO和MDA含量高于L.a组,低于RV组;L.a组CAT、SOD、GSH、GSH-Px含量均高于其他组,BI组和AI组CAT、SOD、GSH、GSH-Px含量整体变化趋势一致,先降后升,且高于RV组.可知,食淀粉乳杆菌通过上调GDNF和GSNO表达和增强乳鼠空肠抗氧化能力,共同促进ZO-1表达,使其在乳鼠空肠上更均匀连续,显著提高乳鼠空肠细胞屏障强度,干预轮状病毒感染.     

食淀粉乳杆菌联合芦丁干预PoRV感染后肠道紧密连接蛋白及其相关因子变化

通过益生菌联合多酚共同对抗猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)感染，利用食淀粉乳杆菌和芦丁干预PoRV感染清洁级中国昆明鼠乳鼠，分为正常对照组(Control组)、病毒组(RV组)、食淀粉乳杆菌预防组(SR组)、芦丁1 mg·kg^-1预防组(LR组)、芦丁20 mg·kg^-1预防组(HR组)、食淀粉乳杆菌联合1 mg·kg^-1芦丁预防组(SLR组)，应用实时荧光定量PCR和免疫组化检测Occludin和Claudin-4 mRNA相对表达量及蛋白分布，ELISA定量检测RV、胰蛋白酶、PAR-2、TGF-β和MMP-9含量。结果表明，RV组病毒含量最高，RV组Occludin mRNA相对表达量显著低于其他组，Claudin-4 mRNA相对表达量显著高于其他预防组，Claudin-4蛋白在肠道组织中分布不均；其他组Claudin-4 mRNA相对表达量均降低，但蛋白分布无改变。RV组胰蛋白酶、PAR-2、TGF-β和MMP-9含量均高于其他组；SLR组TGF-β含量低于SR组，MMP-9含量低于S...     

利用鸡粪和蔬菜废弃物生产有机肥技术规程

临沂市蔬菜产业和畜牧业规模逐渐扩大，推进蔬菜废弃物和畜禽粪便综合治理和资源化合理利用，实现废弃物和畜禽粪便绿色、生态、可持续利用具有重要意义。本文以养鸡产生的鸡粪等废弃物和蔬菜种植产生的老叶等废弃物为原料，打造“生态养殖-区域收集-集中处理和综合利用”相结合的模式，为我国畜牧业、蔬菜产业的绿色、生态、可持续发展提供技术参考。