转Bt基因水稻CrylAb杀虫蛋白在水稻土中的降解

室内研究了转Bt基因水稻克螟稻2号和华池B6叶片中的CrylAb杀虫蛋白在稻田水稻土中的降解动态。分别将克螟稻2号的粉碎叶片和华池B6的整张叶片埋入3种土壤(即老黄筋泥田、青紫泥田和黄松田)中，此后每隔6～10d测定土壤或叶片中的CrylAb含量。克螟稻2号粉碎叶片中的CrylAb均以处理后的前36d，尤其是前6d的降解较快，其中在青紫泥田中最快，黄松田中最慢。在处理后6～36d内，不同土壤中的CrylAb残留量有显著差异，黄松田中的明显最高，老黄筋泥田中的次之，青紫泥田中的为最低；此后土壤间的残留量差异逐渐缩小，至处理后78d差异已不明显。土壤淹水可显著加快华池B6叶片中CrylAb的降解，且淹水后其降解动态在不同土壤之间十分相似；淹水对CrylAb降解的促进作用仅发生在前12d之内，此后多数时间内残留量在淹水与非淹水处理间无显著差异。建立了各处理中CrylAb降解的动力学指数方程，相应地得出了其降解的半衰期。还讨论了土壤有机质和微生物等因子对土壤中CrylAb降解的影响。     

抗氯霉素单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立

用人工合成的氯霉素-卵清蛋白(CAP-OVA)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选出1株能稳定传代并分泌抗氯霉素(CAP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞4C9,并以此制备腹水单抗.经间接竞争ELISA(ciELISA)检测,该单抗亚类重链类型是IgG1,轻链为κ类型,单抗腹水效价为1∶1×106,与甲砜霉素、氟甲砜霉素以及其他常见抗生素的交叉反应率小于0.01%.用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记单抗,建立了CAP直接竞争ELISA(cdELISA)方法.此法检测的线性范围为0.1~100 ng·mL-1,半数抑制浓度(IC50)为5.81 ng?L-1.添加回收实验表明所建立的CAP cdELISA方法检测限达到0.1 ng·L-1,对比试验表明其检测灵敏度与商品试剂CAP ELISA基本相当.