以东试早柚为母本创制柑橘三倍体种质资源

【目的】三倍体植物由于减数分离紊乱，难以形成可育的雌雄配子，属于天然的不育类型，配置以2x×4x多个杂交组合，旨在创制柑橘三倍体种质，丰富柑橘无核材料。【方法】以单胚性二倍体品种东试早柚为母本与四倍体柑橘材料ZP（纸皮，四倍体甜橙）、PT（四倍体葡萄柚）、NH（四倍体，诺瓦橘柚+HB柚体细胞杂种）为父本进行倍性杂交，授粉后85 d和100 d采摘幼果并对未成熟种子实施幼胚离体挽救培养，获得再生植株后用流式细胞仪和InDel标记对其倍性及遗传来源进行鉴定。【结果】从3个倍性杂交组合的168株再生植株中，通过倍性检测获得三倍体幼苗128株且均为双亲杂交后代，其中东试早柚×ZP共计60株、东试早柚×PT共计60株、东试早柚×NH共计8株。【结论】通过倍性杂交高效创制三倍体柑橘新种质，为柑橘早熟无核育种及相关基础研究提供了珍贵的育种材料。     

一种将柑橘离体芽苗嫁接于温室砧木的高效方法

嫁接是木本果树作物快速繁殖生产的基本技术,对缩短育种周期也具有十分重要的意义。目前广为应用的主要有离体微芽嫁接、田间芽接、高接换种等嫁接方法。这里介绍一种高效的将柑橘离体芽苗直接嫁接在温室砧木上的方法。1砧木准备选用实生播种粗壮砧木苗,在新枝长出后的10～20d内、还未木质化变硬前进行嫁接。若砧木茎段已变硬,可回剪促使侧芽萌发、长出新枝,10～20d后即可嫁接。选砧木茎段粗壮直立部位,将其以上部分剪断去除(嫁接口高度30～50cm),用小刀片将剪口部分从中间切下,深度0.3～0.5cm(若砧木剪口截面不为圆形,则沿剪口直径最小的方…     

以异源四倍体体细胞杂种为父本与二倍体杂交创造柑橘三倍体的研究

 2001～2002连续两年, 以沙田柚、本地早橘、中秋橘、HB柚、国庆4号温州蜜柑等二倍体品种为母本, 以NS (橘柚+无酸甜橙) 、NH (橘柚+ HB柚) 、SH (无酸甜橙+ HB柚) 、VM (伏令夏橙+橘橙) 、HD (甜橙+丹西橘) 等优良四倍体体细胞杂种的花粉授粉, 通过胚挽救技术获得再生植株。经细胞流式仪和染色体计数观察表明, 两年从10个授粉组合中共获得244株三倍体和10株四倍体。在这些三倍体中有147株来自沙田柚为母本的组合。目前已有172株三倍体和4株四倍体植株移栽成活。这些材料为进一步选育无核三倍体品种奠定了基础。     

三倍体葡萄柚实生后代多倍体的发掘与SSR遗传鉴定

【目的】从三倍体葡萄柚自然授粉的实生后代中发掘多倍体,希望获得一批多倍体新种质,并为探索三倍体遗传规律奠定基础。【方法】秋季采摘三倍体葡萄柚成熟果实,剥取种子,MT+1 mg·L-1GA3培养基播种,待种子萌发后,用流式细胞仪快速检测其倍性,并采用SSR(simple sequence repeat)分子标记鉴定其不同倍性后代植株的来源。【结果】获得了二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和疑似非整倍体等不同倍性的再生植株各172、52、7、1、1、18株。用13对多态性SSR引物鉴定其来源,结果表明,由二倍体可能三倍体母本所产生的1X配子与周边其他二倍体品种的花粉授粉而来,也可能由三倍体母本产生的重组型2X配子的无融合生殖而来;三倍体大部分由珠心细胞发育而来;四倍体为杂交起源的四倍体;五倍体和六倍体与母本(三倍体葡萄柚)的带型完全相同。【结论】上述活体材料的发掘为柑橘多倍体育种奠定了种质基础。     

朱红橘及其突变体牛肉红金橘的AFLP分析

为弄清朱红橘红色突变体牛肉红金橘遗传的真实性,利用AFLP分子标记技术对朱红橘(Citrus reticulata Blanco)及其实生变异体牛肉红金橘进行了遗传鉴定.结果表明:从120对EcoRI/MseⅠ酶切引物中筛选出具有多态性的引物7对(MCO5E04,MCO4E01,MC04E02,MC04E03,MC04E04,MC04E06,MCO5E02);对朱红橘及其突变体牛肉红金橘进行AFLP扩增,共扩增出648条带,其中,72条具有多态性,多态性比例占11.11%;应用NTSYSpc 2.1软件统计分析,品种(系)间的遗传距离为0.0215853.牛肉红金橘与朱红橘在DNA水平上确实存在差异,牛肉红金橘为遗传上稳定的变异体,具有成为新的红肉品种的遗传基础,可作为新型材料加以保护和利用.     

4种柑橘体细胞杂种砧木的种籽特性评价

对已开花结果的4种体细胞杂种砧木的种籽类型及数量进行评价，以期筛选具有应用潜力的新型体细胞杂种砧木。秋季收集体细胞杂种成熟果实，剥取种籽统计单果平均种籽数；离体播种，观察是否具有多胚特性。体细胞杂种哈姆林甜橙 粗柠檬、朋娜脐橙 粗柠檬、朋娜脐橙 枸头橙的单果平均种籽数较高，分别为19.9、20.0和19.7粒，且种籽饱满、多胚，播种后容易萌发，实生苗生长健壮、整齐一致，从种籽特性角度可作为首选砧木应用；Page橘柚 枳的单果平均种籽数仅为3.0。对这4种细胞杂种砧木种籽特性的评价为筛选优良体细胞杂种砧木并应用推广提供了依据。     

柑桔胞质杂种及其胞质遗传重组

综述并讨论了柑桔等植物胞质杂种产生的方式、对称融合产生胞质杂种的普遍性和可能机理,以及柑桔细胞对称融合产生二倍体叶肉亲本型胞质杂种的影响因子、柑桔胞质杂种胞质基因组的遗传重组,提出了柑桔胞质杂种的意义及其应用前景.     

国际柑橘学会第九届学术大会介绍

国际柑橘学会第九届学术大会于2000年12月3～8日在美国佛罗里达州奥兰多市召开。来自45个国家和地区的1100余名代表参加了会议。其中，美国代表300余人，巴西、西班牙、意大利、墨西哥的代表较多。中国代表近加人。大会收到论文675篇，其中221篇为口头报告，375篇为墙报。我国学者提供论文20余篇，主要涉及品种选育、细胞工程、遗传转化和分子标记。     

原生质体融合与果树遗传改良

原生质体融合技术在木本植物果树中已广泛应用，并已获得包括柑桔、梨亚科与李亚科、猕猴桃、柿等近１００个组合的体细胞杂种植株。这些体细胞杂种在果树砧木及接穗品种改良中具有广阔的应用前景。对未来果树细胞融合研究的重点作了评述。     

柑橘10个品种实生后代多倍体的发掘及SSR鉴定

秋季采摘柑橘成熟果实并剥取种子,将小粒种籽和瘪籽播于MT培养基,待萌发长出2～3片真叶时,取其叶片检测倍性;将饱满种籽播种于露地,对其幼苗首先通过形态筛选获得似多倍体的植株,然后取其叶片用流式细胞仪进行倍性检测;最后对获得的多倍体植株进行SSR分子鉴定。试验结果表明,获得早金甜橙、卡特夏橙、塔罗科血橙、日辉橘、Ortanique橘橙、默科特橘橙、华农本地早橘、朱红橘和Flame葡萄柚等9个品种的四倍体分别为6、1、3、12、3、6、2、1和10株;获得早金甜橙、塔罗科血橙、Itabori甜橙和Ortanique橘橙等4个品种的三倍体分别为1、1、2、4株。用13对多态性SSR引物对胚抢救获得的三倍体和四倍体的来源进行鉴定,发现早金甜橙、Itabori甜橙的三倍体再生植株为异源三倍体;塔罗科血橙、Ortanique橘橙的三倍体可能为同源三倍体;早金甜橙和Ortanique橘橙的四倍体可能为同源四倍体;塔罗科血橙四倍体为异源四倍体。采用37对多态性引物对从饱满种籽中获得的8个品种四倍体的来源进行鉴定,发现均为同源四倍体。这些自然发掘的多倍体资源对柑橘无核育种和相关基础研究具有重要价值。