小鹅瘟病毒VP3基因的原核表达

根据GenBank已发表的小鹅瘟病毒B株基因序列,设计并合成1对特异性引物,经PCR扩增得到了1 457 bp的目的片段,并将该片段克隆至pMD-18T simple载体中,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-VP3.经0.1 mmol/L IPTG诱导,目的蛋白在大肠杆菌中得到表达.Western-blot分析表明,该蛋白具有良好的反应原性.为开发相应的基因工程疫苗奠定了理论基础.     

茶文化与地方立法保护

中国是世界上最早发现茶树并对其进行利用的国家,我们的祖先在种茶、饮茶过程中,逐渐将茶叶的特性融入到自己的生活中,结合我国的儒道思想,形成了茶道、茶画等一系列东方特色的茶文化。但近年来随着经济水平的发展,茶文化逐渐变为赚取经济利益的手段,茶文化保护岌岌可危,尽管各地采取不同手段对本地茶文化进行保护,但始终没有涉及根本。本文从法律手段的保护出发,探讨地方通过立法途径保护茶文化健康发展的必要性,为茶文化的保护与发展提供法律支持。     

山西后沟堡子酒大曲中优势霉菌的分离及鉴定

对山西后沟堡子酒酒曲样品进行初步分离纯化,得到L1和L2霉菌.观察发现L1菌株的菌落呈白色、形态较大、有蔓延性、菌丝呈放射状；L2菌株的菌落呈灰黑色、形状不规则、有细长的皱褶.生理生化试验结果表明:L1和L2均能利用葡萄糖、麦芽糖和半乳糖,均不能利用蔗糖;L1和L2均能利用供试氮源,而在牛肉膏、酵母粉中生长较好；L1和L2菌株的载玻片培养观察可以看到膨大的孢子囊以及帚状枝,结合《真菌鉴定手册》可以鉴定这两株菌株属于曲霉菌.该研究为优化堡子酒的质量、提高堡子酒的营养价值、开发堡子酒系列新品种提供参考.     

鹅细小病毒YBLJ株VP3基因的真核表达

为了研究鹅细小病毒(GPV)YBLJ株VP3基因的生物学特性,根据已克隆的GPV YBH株VP3基因序列(GenBank:JN836326),设计并合成一对特异性引物,经PCR扩增、克隆、转化、酶切与亚克隆,构建真核表达载体pcDNA-VP3,将鉴定正确的质粒转染至Vero细胞,经RT-PCR检测VP3基因转录水平,通过间接免疫荧光试验(IFA)观察VP3基因表达水平.结果显示,克隆的VP3基因全长约1 605 bp;构建了真核表达载体pcDNA-VP3,经RT-PCR对转染细胞总RNA扩增得到特异性目的片段,IFA检测显示VP3基因在Vero细胞中获得了稳定表达.本研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础.     

威百亩熏蒸对土壤硝化作用及amoA型硝化细菌群落结构的影响

为探究威百亩对土壤硝化作用的影响及作用机制,通过理化分析和变性梯度凝胶电泳方法研究浓度为20、100和500 mg/kg威百亩熏蒸处理对土壤硝化作用及amoA型硝化细菌群落结构的影响。结果表明,威百亩熏蒸处理0、14、28 d后,3种浓度处理的土壤硝化率与对照差异不显著;处理56 d后,20、100和500 mg/kg浓度处理的土壤硝化率分别为81.15%、76.66%和94.08%,前两者与对照差异不显著,后者与对照差异显著;而处理84 d后,3种浓度处理的土壤硝化率与对照差异均不显著。与对照相比,3个浓度威百亩熏蒸处理不同时间后土壤amoA型硝化细菌群落的均匀度指数差异不显著。熏蒸处理14 d后,浓度20、100 mg/kg威百亩处理的土壤amoA型硝化细菌群落的香农多样性指数和丰富度指数分别为1.00、10.97和0.84、7.79,与对照的0.92和9.78均无显著差异;而浓度500 mg/kg威百亩处理的香农多样性指数和丰富度指数分别为0.59、5.77,显著低于对照。表明威百亩对土壤硝化强度的影响较amoA型硝化细菌群落延迟,说明土壤中硝化作用的强弱并非完全决定于土壤amoA型硝化细菌的作用。     

小鼠抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备

采用杂交瘤技术,用纯化的鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV) VP3蛋白免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体(mAb),经间接ELISA方法筛选和有限稀释法进行3次亚克隆后获得一株抗鹅细小病毒VP3蛋白杂交瘤细胞株(4E5).经鉴定,该mAb为IgGl亚型,轻链为κ链.Western blot试验结果表...     

超声萃取-重氮偶合光度法快速检测发酵茶中亚硝酸盐

采用超声萃取法提取6种不同发酵茶中的亚硝酸盐,并用重氮偶合光度法测定其含量。结果表明,用超声萃取-重氮偶合光度法测定发酵茶叶中的亚硝酸盐,其结果与常规的水浴提取-重氮偶合光度法无差异,且该方法具有简便省时,不需加热,适于批量测定的优点,可以作为一种快速测定发酵茶中亚硝酸盐含量的方法。